Ποιοτική ανάλυση PCR για την ανίχνευση της ηπατίτιδας C

Η ηπατίτιδα C είναι μια σοβαρή ιογενής ασθένεια που εμφανίζεται στο σώμα ενός ασθενούς υπό την επίδραση βακτηρίων όπως το HCV. Ανάλογα με το στάδιο ανάπτυξης, μια τέτοια παθολογία μπορεί να προχωρήσει χωρίς συμπτώματα ή να εκδηλωθεί ως ίκτερος, μειωμένη δραστηριότητα και άλλες λειτουργικές διαταραχές. Ταυτόχρονα, αυτή η ασθένεια μπορεί να θεραπευτεί μόνο τις πρώτες εβδομάδες, ενώ το παθογόνο είναι σε περίοδο επώασης. Μια ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C μπορεί να διαγνώσει μια λοίμωξη στο αρχικό στάδιο.

Γενικά στοιχεία για την ηπατίτιδα C

Η ηπατίτιδα κατηγορίας Γ θεωρείται η πιο επικίνδυνη από όλους τους τύπους ιογενών παθολογιών, καθώς έχει πολύ υψηλή τάση να μεταλλάσσεται. Μόλις στο σώμα, τα συστατικά RNA αλλάζουν συνεχώς τη δομή τους, γι 'αυτό το ανοσοποιητικό σύστημα δεν μπορεί ανεξάρτητα να παράγει τα σωστά αντισώματα για μια φυσική θεραπεία για την ασθένεια. Αυτό καθιστά δυνατή την εξάπλωση της λοίμωξης χωρίς πολλά εμπόδια..

Μετά από μερικές εβδομάδες, ο ιός μεταλλάσσεται σε τέτοια κατάσταση που ένα άτομο αρχίζει να αισθάνεται τα πρώτα συμπτώματα, που εκδηλώνονται με τη μορφή:

  • Περιοδική ζάλη;
  • Ναυτία ή ακόμα και έμετος.
  • Χρόνια κόπωση;
  • Πόνος στο σωστό υποχονδρικό?
  • Αυξημένη θερμοκρασία σώματος.


Μετά το στάδιο της επιδείνωσης, η ασθένεια γίνεται χρόνια. Με τη βοήθεια της φαρμακευτικής θεραπείας, ο ασθενής μπορεί να τον υποστηρίξει μόνο κατά τη διάρκεια της περιόδου επώασης, αποφεύγοντας επαναλαμβανόμενες υποτροπές.

Ενδείξεις για διαγνωστικά

Δεν διενεργείται ποιοτική μελέτη των κυττάρων RNA του ιού της ηπατίτιδας C κατόπιν αιτήματος του ασθενούς, ενδείξεις για μια τέτοια διαδικασία μπορεί να είναι μόνο:

  • Εξέταση ιστών που αναπτύχθηκαν με βιοψία.
  • Έρευνα λευχαιμιών και κακοήθων όγκων.
  • Διαγνωστικά του οργανισμού για την παρουσία γενετικών παθολογιών σε αυτό.
  • Ταυτοποίηση ενός ατόμου με σύγκριση των βιολογικών υγρών του ασθενούς με τα διαθέσιμα βιοϋλικά.
  • Ανίχνευση του αιτιολογικού παράγοντα μιας ιογενούς λοίμωξης (με μικτή ηπατίτιδα).

Επιπλέον, η ανάλυση RNA είναι σε θέση να δείξει μια αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της τρέχουσας πορείας της θεραπείας, η οποία είναι πολύ σημαντική στη θεραπεία μιας ιογενούς νόσου..

Τι είναι η Ανάλυση PCR

Η μελέτη της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης είναι μια εις βάθος ανάλυση του αίματος, η οποία διεξάγεται με σκοπό την ανίχνευση των κυττάρων του ιού RNA σε αυτό. Ανάλογα με την κατεύθυνση, αυτή η διαδικασία μπορεί να δείξει:

  • Η παρουσία ή απουσία ηπατίτιδας στο σώμα (ποιοτικός τύπος PCR).
  • Ιικό φορτίο στο ανοσοποιητικό σύστημα (ποσοτική δοκιμή που δείχνει το επίπεδο του ριβονουκλεϊκού οξέος στο αίμα).
  • Τρέχων γονότυπος της νόσου (γονότυπος).

Από όλες τις παραπάνω δοκιμές, μόνο το πρώτο είναι υποχρεωτικό. Με βάση τα αποτελέσματα της αποκωδικοποίησής του, ο γιατρός θα μπορεί να βρει περισσότερες λεπτομέρειες σχετικά με την τρέχουσα ασθένεια..

Βασικά ερευνητικά οφέλη

Αν συγκρίνουμε την ανάλυση PCR με διαδικασίες όπως: OAC, ELISA και σάρωση υπερήχων, τότε το πρώτο τεστ θα έχει ορισμένα χαρακτηριστικά πλεονεκτήματα:

  • Υψηλή ταχύτητα των αποτελεσμάτων επεξεργασίας.
  • Η ικανότητα μελέτης σχεδόν όλων των ανθρώπινων βιολογικών υγρών (ιδρώτας, δάκρυα, αίμα, ξύσιμο από τον βλεννογόνο και ακόμη και το επιθήλιο του δέρματος).
  • Η παρουσία ενός δείκτη ιικού φορτίου.
  • Πλήρης απολύμανση του υλικού δοκιμής (μια τέτοια διαδικασία εκτελείται πριν από την έναρξη της ανάλυσης PCR, προκειμένου να αποφευχθούν λοιμώξεις μέσω του προκύπτοντος υγρού).
  • Υψηλό περιεχόμενο πληροφοριών (αυτή η αντίδραση δείχνει όχι μόνο την παρουσία του ιού, αλλά επίσης καθορίζει τη φύση του).

Είναι σημαντικό να γνωρίζετε! Το μόνο μειονέκτημα της δοκιμής PCR για ηπατίτιδα C είναι η ανάγκη περίπλοκης κατάρτισης προσωπικού και εξοπλισμού..

Υψηλής ποιότητας PCR για ηπατίτιδα C

Το αποτέλεσμα μιας υψηλής ποιότητας PCR για την ηπατίτιδα C είναι θεμελιώδης δείκτης ολόκληρης της μελέτης, καθώς χάρη σε αυτό ο γιατρός μπορεί να καθορίσει την παρουσία παθολογίας σε έναν ασθενή. Αλλά μια αρνητική απάντηση στην παραπάνω αντίδραση δεν θα δείχνει πάντα ένα εντελώς υγιές σώμα. Σε τελική ανάλυση, εάν ο αριθμός των κυττάρων RNA πέσει κάτω από το επιτρεπόμενο επίπεδο, τότε η σάρωση PCR απλά δεν θα τις παρατηρήσει.

Ερμηνεία των αποτελεσμάτων ανάλυσης

Μια ποιοτική δοκιμή PCR για την παρουσία RNA από κύτταρα ηπατίτιδας C μπορεί να δείξει μόνο δύο πιθανές αποκρίσεις. Εξετάστε τις τιμές που δείχνουν την κανονική κατάσταση ενός ατόμου και τη συνεχιζόμενη παθολογία.

Κανόνας

Ο φυσιολογικός δείκτης μιας ποιοτικής δοκιμής αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης είναι ένα αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής. Παρατηρείται σε μηδενικό ιικό φορτίο και την απουσία αναγνωρισμένου γονότυπου. Αλλά για να διασφαλιστεί πλήρως η ασφάλειά του, είναι καλύτερο για τον ασθενή να υποβληθεί σε μια σειρά από πρόσθετες διαδικασίες που μπορούν να αποκαλύψουν ασθένειες που οδηγούν σε μόλυνση με ηπατίτιδα C.

Αποκλίσεις

Εάν η δοκιμή PCR έδειξε θετική απόκριση, τότε αυτό είναι ένα σαφές σημάδι ότι υπάρχει ένας ιός στο σώμα του εξεταζόμενου ατόμου. Ανάλογα με την ποσοτική τιμή (από 1,8x έως 2,4x), ο γιατρός θα είναι σε θέση να καθορίσει το τρέχον στάδιο της ανάπτυξής του, το οποίο θα είναι το πρώτο βήμα για την κατάρτιση της σωστής πορείας θεραπείας. Και με τη βοήθεια του γονότυπου, μπορείτε επίσης να εντοπίσετε την κατηγορία της ηπατίτιδας ακόμη και πριν από τις χαρακτηριστικές εκδηλώσεις της (δείκτες B1, B2 ή B3).

Ψευδώς θετικά και ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα

Από μόνη της, μια δοκιμή PCR δεν είναι σχεδόν ποτέ λάθος. Αλλά υπό την επίδραση του ανθρώπινου παράγοντα, η πιθανότητα εσφαλμένης διάγνωσης αυξάνεται σημαντικά. Επομένως, για να ληφθεί η πιο σωστή αποκωδικοποίηση, πρέπει να ληφθούν υπόψη οι ακόλουθοι κανόνες πριν από την πραγματοποίηση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης:

  1. Όλα τα μελετημένα βιοϋλικά πρέπει να βρίσκονται σε αξιοπρεπή απόσταση μεταξύ τους (ο συνδυασμός οποιωνδήποτε βιοσυστατικών θα προκαλεί πάντα ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα).
  2. Είναι απαραίτητο να αποθηκεύσετε και να μεταφέρετε τα ληφθέντα υγρά για ανάλυση σε ειδικά προστατευμένα δοχεία όπου παρατηρείται το καθεστώς θερμοκρασίας (τα βιολογικά συστατικά χάνουν πολύ εύκολα τις ιδιότητές τους, η οποία γίνεται επίσης αιτία εσφαλμένης διάγνωσης).
  3. Πριν από την εργασία με βιοϋλικά, το δωμάτιο του εργαστηρίου πρέπει να υποβληθεί σε καλή επεξεργασία, έτσι ώστε τα συντρίμμια να μην εισέλθουν στο δοκιμαστικό υγρό.
  4. Απαγορεύεται αυστηρά η χρήση αντιδραστηρίων που έχουν λήξει (τέτοια αμέλεια δεν είναι ασυνήθιστη στα σύγχρονα ιατρικά ιδρύματα).

Είναι σημαντικό να γνωρίζετε! Η ορθότητα του ληφθέντος αποτελέσματος PCR μπορεί επίσης να εξαρτάται από τον ίδιο τον ασθενή, εάν δεν ακολουθεί τους κανόνες για την προετοιμασία της δειγματοληψίας αίματος. Το αποτέλεσμα κάθε μιας από τις καταστάσεις που αναφέρονται θα είναι μια εκ νέου παράδοση της ανάλυσης..

Συχνότητα ανάλυσης PCR

Η σύγχρονη ιατρική δεν επιβάλλει περιορισμούς στην ανάλυση υψηλής ποιότητας PCR για ηπατίτιδα C. Ωστόσο, μια τέτοια διαδικασία πραγματοποιείται για κάθε κατηγορία ασθενών ορισμένες φορές. Και συγκεκριμένα:

  • Για άτομα στο σώμα του οποίου δεν υπάρχει παθολογία - όχι περισσότερο από 1-2 φορές το χρόνο.
  • Για ασθενείς που υποβάλλονται σε θεραπεία για ηπατίτιδα C - 2 φορές (πριν από την έναρξη της θεραπείας και πιο κοντά στη μέση)
  • Για έγκυες γυναίκες - τουλάχιστον 1-2 φορές το μήνα, κατά τη διάρκεια της κύησης (τότε η δοκιμή πραγματοποιείται όχι περισσότερο από 2 φορές το χρόνο).
  • Για μωρά ηλικίας λίγων εβδομάδων - τουλάχιστον 2 φορές το χρόνο.

Λόγω του αβλαβούς της, η μέθοδος PCR χρησιμοποιείται συχνά ακόμη και για νεογέννητα μωρά, η οποία θεωρείται ένα άλλο από τα σημαντικά πλεονεκτήματά της..

Όσον αφορά το κόστος, η διαδικασία για την πραγματοποίηση αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης διαφέρει σημαντικά από τις τυπικές μελέτες. Λόγω αυτού, ορισμένοι άνθρωποι δεν μπορούν να το αντέξουν οικονομικά. Αλλά σύμφωνα με άλλα κριτήρια, αυτό το τεστ δεν έχει ανταγωνιστές, οπότε οι γιατροί το συνιστούν συχνότερα..

Ανάλυση PCR της ηπατίτιδας C (ηπατίτιδα C RNA)

Ανάλυση PCR

Μια ποιοτική ανάλυση δείχνει την παρουσία ενός ιού στο αίμα. Αυτή η δοκιμή είναι απαραίτητη για όλους τους ασθενείς με αντισώματα κατά της ηπατίτιδας C. Το αποτέλεσμα μπορεί να «ανιχνευθεί» ή «να μην ανιχνευθεί». Τιμές αναφοράς (τιμή που πρέπει να είναι κανονική) - "not found". Ένα ανιχνευμένο αποτέλεσμα μπορεί να υποδηλώνει ότι ο ιός πολλαπλασιάζεται και μολύνει νέα ηπατικά κύτταρα. Μια ποιοτική δοκιμή PCR έχει κάποια ευαισθησία (10-500 IU / ml.). Αυτό σημαίνει ότι εάν ο ιός υπάρχει στο αίμα σε πολύ χαμηλή συγκέντρωση (κάτω από το όριο ευαισθησίας της μεθόδου), μπορεί να επιτευχθεί ένα "μη ανιχνευμένο" αποτέλεσμα. Επομένως, κατά τη διεξαγωγή υψηλής ποιότητας PCR σε ασθενείς με χαμηλή ιοιμία (συγκέντρωση ιού), για παράδειγμα, που υποβάλλονται σε αντιική θεραπεία, είναι σημαντικό να γνωρίζετε την ευαισθησία του διαγνωστικού συστήματος. Για τον έλεγχο της ιολογικής απόκρισης κατά τη διάρκεια της αντιιικής θεραπείας, είναι επιθυμητό να χρησιμοποιήσετε ένα διαγνωστικό σύστημα με ευαισθησία τουλάχιστον 50 IU / ml. Τέτοια κριτήρια πληρούνται, για παράδειγμα, COBAS AMPLICOR HCV-TEST (αναλυτική ευαισθησία 50 IU / ml ή 100 αντίγραφα / ml), RealBest HCV RNA (αναλυτική ευαισθησία 15 IU / ml ή 38 αντίγραφα / ml) και άλλα..

Πού είναι ασφαλές να αγοράσετε νέα φάρμακα για την ηπατίτιδα C; Κατά τη γνώμη μας, ο πιο βέλτιστος και αξιόπιστος τρόπος είναι να χρησιμοποιήσετε τις υπηρεσίες αποδεδειγμένων παρόχων στο φόρουμ μας, οι οποίοι έχουν ήδη βοηθήσει εκατοντάδες ασθενείς να απαλλαγούν από αυτήν την ασθένεια..

Κόστος PCR

Ανάλυση PCR, το κόστος της οποίας εξαρτάται από τα αντιδραστήρια που χρησιμοποιούνται και μπορεί να κυμαίνεται από 300 ρούβλια. έως 5.000 ρούβλια, που εκτελούνται από μία ημέρα έως μια εβδομάδα.

Εκτός από τη μέθοδο PCR, η μέθοδος της μεταγραφικής ενίσχυσης (TMA) χρησιμοποιείται επίσης για την ανίχνευση του HCV RNA, το οποίο έχει καλύτερη ευαισθησία (περίπου 5-10 IU / ml), αλλά αυτή η μέθοδος δεν είναι ακόμη ευρέως διαδεδομένη στη Ρωσία..

Πόσο συχνά πρέπει να κάνω HCV PCR; Συνήθως εκτελείται αμέσως μετά την ανίχνευση αντισωμάτων κατά της ηπατίτιδας C και μετά την 4η, 12η, 24η εβδομάδα αντιιικής θεραπείας, καθώς και 24 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση του AVT και στη συνέχεια ετησίως, σε περίπτωση SVR.

Φιγούρα: 1. Ένα παράδειγμα των αποτελεσμάτων της ποιοτικής PCR της ηπατίτιδας C.

Η ποσοτική ανάλυση PCR (ιικό φορτίο) είναι μια δοκιμή για τη συγκέντρωση του ιού (ιοιμία) στο αίμα. Το ιικό φορτίο είναι ο αριθμός μονάδων γενετικού υλικού (ιικό RNA) που υπάρχει σε δεδομένο όγκο αίματος (συνήθως 1 ml, που αντιστοιχεί σε 1 κυβικό εκατοστό). Αυτό το ποσό εκφράζεται σε αριθμούς, μονάδες μέτρου IU / ml (διεθνείς μονάδες ανά χιλιοστόλιτρο). Η ποσότητα του ιού μπορεί να εμφανιστεί με διαφορετικούς τρόπους. Για παράδειγμα, 1,5 εκατομμύρια IU / ml, που αντιστοιχεί σε 1,500,000 IU / ml ή 1,5 * 10 6 IU / ml. Ορισμένα εργαστήρια χρησιμοποιούν άλλες μονάδες μέτρησης - αντίγραφα / ml. Ο συντελεστής μετατροπής από αντίγραφα σε διεθνείς μονάδες είναι διαφορετικός για διαφορετικά συστήματα δοκιμών. Η κατά προσέγγιση τιμή μπορεί να υπολογιστεί εκ νέου σύμφωνα με τον τύπο 1 IU / ml = 4 αντίγραφα / ml, για παράδειγμα, 5,5 * 10 5 IU / ml = 2,2 * 10 6 αντίγραφα / ml.

Τι επηρεάζει το ιικό φορτίο;?

Πρώτον, η μολυσματικότητα. Όσο υψηλότερη είναι η συγκέντρωση του ιού, τόσο μεγαλύτερος είναι ο κίνδυνος μετάδοσης του ιού, για παράδειγμα μέσω σεξουαλικής επαφής ή μέσω κάθετης μετάδοσης. Δεύτερον, η συγκέντρωση του ιού επηρεάζει την αποτελεσματικότητα της θεραπείας (εάν η θεραπεία πραγματοποιείται βάσει ιντερφερόνης). Έτσι, ένα χαμηλό ιικό φορτίο είναι ένας ευνοϊκός παράγοντας κατά τη διάρκεια της θεραπείας, και ένα πολύ υψηλό είναι δυσμενές. Επίσης, η ποσοτική PCR έχει μεγάλη σημασία κατά τη διεξαγωγή θεραπείας με ιντερφερόνη για την αξιολόγηση της επιτυχίας της και τον προγραμματισμό της διάρκειας του μαθήματος. Έτσι, με γρήγορη ανταπόκριση στη θεραπεία και χαμηλή ιοιμία πριν από τη θεραπεία, οι χρόνοι θεραπείας μπορούν να μειωθούν. Αντίθετα, με αργή μείωση της συγκέντρωσης του ιού, το AVT μπορεί να επεκταθεί.

Ποιο φορτίο θεωρείται χαμηλό και ποιο είναι υψηλό?

Ένα υψηλό φορτίο θεωρείται πάνω από 800 * 10 3 ή 800.000 IU / ml, που είναι περίπου 300 * 10 4 ή 3.000.000 αντίγραφα / ml. Ένα φορτίο άνω των 1 * 10 7 IU / ml θεωρείται πολύ υψηλό. Ωστόσο, δεν υπάρχει ακόμη γενική γνώμη μεταξύ των ειδικών σχετικά με τις τιμές που διακρίνουν την υψηλή και τη χαμηλή ιοιμία. Έτσι, σε ορισμένα έργα, αυτό το όριο θεωρείται ότι ανέρχεται σε 400.000 ME / ml..

Πόσο συχνά κάνετε ποσοτικό τεστ?

Συνήθως γίνεται πριν από τη θεραπεία και μετά τη 12η εβδομάδα θεραπείας για να εκτιμηθεί η αποτελεσματικότητά της σε περίπτωση που εξακολουθεί να προσδιορίζεται μια δοκιμή RNA υψηλής ποιότητας.

Το αποτέλεσμα μιας ποσοτικής εξέτασης μπορεί να είναι μια ποσοτική αξιολόγηση της ιοιμίας με τη μορφή που περιγράφεται παραπάνω, καθώς και τα αποτελέσματα "κάτω από το εύρος μέτρησης" και "δεν ανιχνεύθηκε".

Το όριο ευαισθησίας της ποσοτικής PCR είναι συνήθως υψηλότερο από αυτό της ποιοτικής PCR. Έτσι, για το σύστημα COBAS AMPLICOR, είναι 600 ME / ml. Το αποτέλεσμα «δεν ανιχνεύθηκε» μπορεί να υποδεικνύει ότι η ποσοτική δοκιμή και η επιβεβαιωτική ποιοτική δοκιμή δεν ανίχνευσαν ιικό RNA. Ένα αποτέλεσμα "κάτω από το εύρος μέτρησης" σημαίνει ότι η ποσοτική δοκιμή δεν ανίχνευσε το RNA της ηπατίτιδας C, αλλά ο ιός υπάρχει σε πολύ χαμηλή συγκέντρωση (εάν πραγματοποιήθηκε πρόσθετη επιβεβαιωτική ποιοτική δοκιμή).

Σχήμα 2 Παράδειγμα ποσοτικών αποτελεσμάτων δοκιμής.

Ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C: ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Ο ιός RNA εισέρχεται στα ηπατικά κύτταρα και προκαλεί την ασθένεια - ηπατίτιδα C. Η ασθένεια είναι οξεία και χρόνια. Χαρακτηρίζεται από ροή χωρίς ορατά σημάδια. Αυτό το μάθημα εξηγείται από την υψηλή ικανότητα του ιού να μεταλλαχθεί και την εμφάνιση διαφόρων ειδών. Αυτό βοηθά το παθογόνο να προσαρμοστεί στον ξενιστή και να αποφύγει την ανοσολογική άμυνα..

Η έρευνα στα πρώτα στάδια της ανάπτυξης είναι αναποτελεσματική. Πραγματοποιείται ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C για τον εντοπισμό του παθογόνου και την έναρξη της θεραπείας εγκαίρως.

Τι θα μάθω; Το περιεχόμενο του άρθρου.

Τι είναι ένα ποιοτικό τεστ ηπατίτιδας C?

Η ηπατίτιδα C είναι μια σοβαρή ασθένεια με χρόνια ανάπτυξη κίρρωσης και καρκίνου του ήπατος. Οι επιστήμονες δεν ήταν σε θέση να αναπτύξουν ένα εμβόλιο κατά της νόσου για μεγάλο χρονικό διάστημα, παρά τη μελέτη των δομικών χαρακτηριστικών του HCV. Η ποικιλία των ειδών παθογόνων μελετώνται ελάχιστα.

Μόνο με τη βοήθεια εργαστηριακών εξετάσεων μπορεί να εντοπιστεί βλάβη οργάνων και να προληφθεί η μόλυνση άλλων. Για το σκοπό αυτό, πραγματοποιείται ποιοτική δοκιμή PCR για ηπατίτιδα C..

Ο φορέας μπορεί να μολυνθεί για πολλά χρόνια και να μην γνωρίζει την ασθένεια. Μια ποιοτική ανάλυση περιλαμβάνει τη διεξαγωγή αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης του αίματος του ασθενούς στο εργαστήριο για την παρουσία του ιού RNA. Η διάγνωση γίνεται σε υπερευαίσθητο ιατρικό εξοπλισμό που βοηθά στην ανίχνευσή του.

Τι δείχνει η ποιοτική ανάλυση?

Μια εξέταση υψηλής ποιότητας με χρήση PCR έχει πλεονεκτήματα σε σχέση με άλλες μεθόδους:

  • Αυτή η μέθοδος βοηθά στον εντοπισμό του γενετικού υλικού του παθογόνου σε πρώιμα στάδια.
  • δείχνει τον τύπο του παθογόνου?
  • Χρησιμοποιείται ένα σύστημα δοκιμών, δεν υπάρχει ανάγκη σποράς του υλικού σε θρεπτικό μέσο.
  • έχει υψηλή ταχύτητα διάγνωσης του παθογόνου: το αποτέλεσμα της ανάλυσης θα είναι έτοιμο σε 5 ώρες.
  • αποκαλύπτει κρυφή μόλυνση.

Μια ποιοτική ανάλυση συνταγογραφείται κατά τη διάρκεια μιας ρουτίνας εξέτασης, όταν υπάρχουν ενδείξεις για τη συμπεριφορά της. Διεξάγεται κατά τη διάρκεια της θεραπείας, μετά την ανάρρωση. Με τη βοήθειά του, επιβεβαιώνεται η παρουσία ή η απουσία αντισωμάτων του ιού της ηπατίτιδας C στο αίμα.

  • ποσοτικό περιεχόμενο του γονότυπου HCV ·
  • ποιοτικά χαρακτηριστικά του ιικού RNA.
  • γονότυπος.

Δοκιμάστε ξανά για να επιβεβαιώσετε το αποτέλεσμα με ένα πιο ευαίσθητο αντιδραστήριο.

Ενδείξεις για έρευνα

Για την εκτέλεση υψηλής ποιότητας PCR, απαιτούνται προϋποθέσεις για το ραντεβού του:

  • σεξουαλική επαφή με άτομο που έχει μολυνθεί από τον ιό της ηπατίτιδας.
  • κίρρωση του ήπατος;
  • υποχρεωτική εξέταση πριν από τη χειρουργική επέμβαση ·
  • εμβολιασμός κατά του ιού της ηπατίτιδας Β ·
  • ρουτίνα εξέταση υπαλλήλων ιατρικών ιδρυμάτων, νηπιαγωγείων, σχολείων.

Εάν ο ασθενής εμφανίζει σαφή σημάδια ηπατίτιδας:

  • κίτρινο χρώμα του δέρματος, ασπράδια των ματιών
  • πόνος στο σωστό υποχόνδριο
  • κούραση;
  • αύξηση του μεγέθους του ήπατος.
  • ναυτία.

Ο ιός της ηπατίτιδας C εισέρχεται στα ηπατικά κύτταρα μέσω των αιμοφόρων αγγείων. Το παθογόνο μπορεί να εισέλθει μέσω αιμοκάθαρσης, μέσω της χρήσης μολυσμένης βελόνας, μέσω τατουάζ, σε οδοντιατρικά και καλλυντικά γραφεία.

Η μετάδοση του ιού στο νεογέννητο από μολυσμένη μητέρα είναι δυνατή εάν το δέρμα του μωρού τραυματιστεί κατά τον τοκετό. Μια ποιοτική ανάλυση αποκαλύπτει έναν ιό και υποδεικνύει δευτερεύοντα σημάδια: την παρουσία αντισωμάτων στο αίμα του ασθενούς.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων

Ένας ηπατολόγος ή ειδικός για τις μολυσματικές ασθένειες αποκρυπτογραφεί τα αποτελέσματα της PCR και της ELISA για την ηπατίτιδα C. Τα δεδομένα που λαμβάνονται επιβεβαιώνονται με μια ολοκληρωμένη εξέταση:

  • βιοχημική ανάλυση;
  • Υπερηχογράφημα οργάνου
  • βιοψία ήπατος.

Με βάση τα δεδομένα που ελήφθησαν, ο γιατρός επιβεβαιώνει ή αρνείται την ηπατίτιδα C.

Η τυπική ευαισθησία της δοκιμής PCR κυμαίνεται από 10-500 IU / ml. Η ανάλυση δεν δίνει αποτέλεσμα εάν είναι κάτω από την καθορισμένη παράμετρο.

Η ποσοτική ανάλυση PCR δείχνει το ιικό φορτίο: τη συγκέντρωση του παθογόνου στο ανθρώπινο σώμα (πόσα θραύσματα φλαβοϊού είναι σε 1 ml αίματος). Αυτή η μέθοδος εξέτασης συνταγογραφείται πριν από την έναρξη σύνθετης θεραπείας και κατά τη 12η εβδομάδα της νόσου. Αυτος βοηθαει:

  1. Προσδιορίστε το βαθμό της νόσου. Εάν η συγκέντρωση του ιού στο αίμα του ασθενούς είναι υψηλή, είναι δυνατή η μετάδοση της λοίμωξης σε άλλους..
  2. Ορίστε αντιιική θεραπεία, επιλέξτε την επιθυμητή μέθοδο θεραπείας.
  3. Κάντε μια πρόβλεψη για ανάκαμψη.

Είναι σημαντικό να προσδιοριστεί ο γονότυπος, καθώς το παθογόνο μεταλλάσσεται συνεχώς και προσαρμόζεται στο σώμα. Είναι γνωστοί 11 τύποι, τρεις εντοπίστηκαν στο έδαφος της Ρωσικής Ομοσπονδίας: 1, 2, 3. Η εξέταση θα δείξει τον τύπο της ιογενούς λοίμωξης.

Όταν αποκρυπτογραφούν, γράφουν:

  • Εντοπίστηκε RNA.
  • Δεν ανιχνεύτηκε RNA (δεν ανιχνεύθηκε ασθένεια).
  • τύπος φλαβοϊού;
  • ποσοτική σύνθεση (συγκέντρωση στο αίμα)
  • όνομα δοκιμής.

Εντοπίστηκε RNA

Εάν η ηπατίτιδα C βρίσκεται στο βιολογικό υλικό του ασθενούς, ο γιατρός συνταγογραφεί μια δεύτερη μελέτη για να αποκλείσει ένα σφάλμα. Η εξέταση του βιοϋλικού γίνεται από 1 έως 5 ημέρες. Η διάρκεια εκτέλεσης εξαρτάται από τον φόρτο εργασίας του προσωπικού.

Η παρουσία φλαβοϊού και αντισωμάτων σε αυτό δείχνει μια μακρά πορεία της νόσου, η οποία έχει περάσει σε ένα χρόνιο στάδιο. Ψευδείς ενδείξεις εμφανίζονται σε έγκυες γυναίκες και σε άτομα με άλλες μολυσματικές ασθένειες.

Δεν εντοπίστηκε RNA

Η ποιοτική ανάλυση δεν ανίχνευσε την ηπατίτιδα C. Μια αρνητική τιμή σημαίνει ότι δεν υπάρχει RNA ιού στο αίμα. Η κόπωση και άλλα σημεία μπορεί να σχετίζονται με άλλη λοίμωξη στο σώμα και απαιτούν περαιτέρω μελέτη..

Τι πρέπει να κάνετε εάν εντοπιστεί RNA του ιού της ηπατίτιδας C?

Εάν ο ιός βρίσκεται στο αίμα, δεν πρέπει να απελπιστείτε και να πανικοβληθείτε. Στο 20 τοις εκατό, η ασθένεια θεραπεύεται από μόνη της. Τα αντισώματα δεν υποδεικνύουν πάντα ότι έχετε ηπατίτιδα C. Υπάρχουν εργαστηριακά σφάλματα. Καλοήθεις και κακοήθεις όγκοι, μολυσματικές εστίες στο σώμα, προηγούμενος εμβολιασμός επιχρίσσουν την εικόνα PCR.

Η έγκαιρη ανίχνευση βοηθά να σταματήσει η ασθένεια εγκαίρως. Συνιστάται αντιιική θεραπεία. Τα ναρκωτικά βοηθούν στη θεραπεία μιας χρόνιας νόσου εντός 3-6 μηνών.

Ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C, ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Ηπατίτιδα Β και Ηπατίτιδα C: εξέταση αίματος, όπως υποδεικνύεται, ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Δοκιμή αίματος HBsAg και HCV: τι είναι αυτό, ενδείξεις, αποκωδικοποίηση

Ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα Β: ερμηνεία των δεικτών και του κανόνα τους

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C: πού και πώς να περάσει σωστά, πράγμα που σημαίνει θετικό και αρνητικό αποτέλεσμα

Η PCR για την ηπατίτιδα C είναι μια υποχρεωτική ανάλυση κατά την εξέταση ενός ασθενούς με συμπτώματα ηπατικής βλάβης. Η μελέτη συνταγογραφείται για να επιβεβαιώσει τη διάγνωση και να λάβει τις πληρέστερες πληροφορίες σχετικά με τον αιτιολογικό παράγοντα της νόσου, τη δραστηριότητα της ιογενούς λοίμωξης. Τα αποτελέσματα χρησιμεύουν ως βάση για τη συνταγογράφηση αντιιικής θεραπείας, τον προσδιορισμό της διάρκειας και την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητάς της..

Τα διαγνωστικά που χρησιμοποιούν την τεχνική αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης έχουν διαδεδοθεί σχετικά πρόσφατα. Έρευνα σχετικά με αυτό το θέμα έχει διεξαχθεί από τα μέσα της δεκαετίας του 1970. Αλλά οι πρώτες δημοσιεύσεις σχετικά με τη δυνατότητα χρήσης PCR στην πρακτική ιατρική εμφανίστηκαν μόνο στα μέσα της δεκαετίας του 1980..

  • Τύποι PCR
  • Ενδείξεις για τη δοκιμή
  • Πού να πάρετε?
  • Κανόνες αιμοδοσίας
  • Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων
  • Πλεονεκτήματα της διάγνωσης PCR
  • Το κόστος

Όταν εξηγούν τι είναι η PCR, οι γιατροί τονίζουν ότι αυτή είναι η πιο αξιόπιστη και αξιόπιστη ανάλυση για την ηπατίτιδα C. Αυτή η δοκιμή επιτρέπει όχι μόνο τον εντοπισμό των σωματιδίων RNA του ιού, αλλά και τη διαπίστωση της συγκέντρωσής του (υποδεικνύει τη δραστηριότητα της μολυσματικής διαδικασίας) και τον γονότυπο. Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται παίζουν βασικό ρόλο στον προσδιορισμό της τακτικής και του σχήματος της περαιτέρω θεραπείας..

Ποια είναι η ουσία της οργάνωσης μιας αντίδρασης; Με τη βοήθεια ορισμένων βιολογικά ενεργών ουσιών, επιτυγχάνεται αύξηση του αριθμού των σωματιδίων RNA του ιού σε μικρό όγκο αίματος. Στη συνέχεια, μέρη του γονιδιώματος προσδιορίζονται με διάφορες φυσικοχημικές μεθόδους.

Η PCR εκτελείται χρησιμοποιώντας διάφορα στοιχεία:

  • Αλφαβητάρι. Αυτή είναι μια τεχνητά συντεθειμένη ένωση στην οποία η νουκλεοτιδική αλληλουχία είναι απολύτως πανομοιότυπη με μια συγκεκριμένη περιοχή του RNA του ιού, η οποία δεν υφίσταται μεταλλάξεις και αλλαγές ανάλογα με τον γονότυπο. Ο προσδιορισμός του RNA του ιού της ηπατίτιδας C πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας ένα αυστηρά ειδικό αστάρι.
  • RNA πολυμεράση. Ένα ένζυμο που χαρακτηρίζεται από σταθερότητα και δομική σταθερότητα στο πλαίσιο των θερμοκρασιών που απαιτούνται για τη σωστή πορεία μιας χημικής αντίδρασης. Παρέχει την κατασκευή μιας αλυσίδας RNA σε ένα από τα στάδια PCR.
  • Πρωτεϊνικό μείγμα. Για την κατασκευή επιπλέον τμημάτων του RNA, απαιτείται "δομικό υλικό", για το οποίο ορισμένες ενώσεις της πρωτεϊνικής δομής προστίθενται στο βιολογικό δείγμα.
  • Ρυθμιστής. Μείγμα που διατηρεί το βέλτιστο επίπεδο pH για την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.
  • Ένα δείγμα βιολογικού υλικού που είναι ύποπτο ότι περιέχει δείγμα RNA HCV (ιός της ηπατίτιδας C).

Σε ορισμένες μεθόδους σταδιοποίησης PCR, χρησιμοποιούνται επιπλέον ανιχνευτές RNA και άλλοι εσωτερικοί έλεγχοι, οι οποίοι χρησιμοποιούνται ως δείγματα ελέγχου κατά τον προσδιορισμό των αποτελεσμάτων.

Η ίδια η διαδικασία αύξησης περιοχών του ιικού RNA χρησιμοποιώντας μια μήτρα ονομάζεται ενίσχυση. Η αντίδραση προχωρά σε διάφορα στάδια:

  1. Μετουσίωση. Η διαδικασία "ξετύλιξης" κλώνων RNA παρέχεται αυξάνοντας τη θερμοκρασία σε ένα ορισμένο επίπεδο.
  2. Ανόπτηση. Μετά τη μείωση της θερμοκρασίας στις απαιτούμενες τιμές, τα αστάρια προσκολλώνται στο RNA. Αυτό το στάδιο είναι δυνατό μόνο εάν τα επιθυμητά ιικά σωματίδια υπάρχουν στο δείγμα αίματος..
  3. Άμεση σύνθεση ιικών περιοχών RNA με τη συμμετοχή ενζύμων.

Οι αναφερόμενοι κύκλοι της σταδιοποίησης PCR επαναλαμβάνονται αρκετές δεκάδες φορές, γεγονός που παρέχει πολλαπλή αύξηση στον αριθμό των περιοχών RNA του παθογόνου ηπατίτιδας C του επιπέδου που καθορίζεται από εργαστηριακές μεθόδους.

Το δείγμα αίματος προετοιμάζεται κατάλληλα πριν από τη δοκιμή. Το περιέχον RNA προσροφάται σε ένα ρυθμιστικό φορέα, στη συνέχεια εκπλένεται και χρησιμοποιείται για την έναρξη της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης.

Τα αποτελέσματα ανιχνεύονται είτε με ηλεκτροφόρηση (οριζόντια ή κάθετη) είτε με υβριδισμό. Η μέθοδος για την αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων της αντίδρασης επιλέγεται με βάση τους στόχους της μελέτης (απλά προσδιορισμός του RNA ή προσδιορισμός της κατά προσέγγιση ποσού του).

PCR - η πιο ακριβής εξέταση αίματος για ηπατίτιδα C

Ο κατάλογος των προτεινόμενων μελετών για το HCV περιλαμβάνει διάφορα στοιχεία που διαφέρουν ως προς το κόστος, τον χρόνο ετοιμότητας και τη μέθοδο υλοποίησης..

Εάν αναφερόμαστε στα πρωτόκολλα του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (ΠΟΥ), η διαδικασία διάγνωσης μιας λοίμωξης περιλαμβάνει διάφορα διαδοχικά στάδια..

Αρχικά, ενοικιάστε:

  • γενική ανάλυση αίματος και ούρων
  • βιοχημεία αίματος
  • έρευνα για την περιεκτικότητα σε γλυκόζη (αυστηρά με άδειο στομάχι) ·
  • Δοκιμή HIV;
  • φθοριογραφία
  • ανοσογράφημα (εάν υποψιάζεστε την παρουσία αυτοάνοσων παθολογιών).

Εάν οι παράμετροι της βιοχημικής εξέτασης αίματος αποκλίνουν από τον φυσιολογικό κανόνα, ο ασθενής συνταγογραφείται μια δοκιμή με βάση την ανίχνευση συγκεκριμένων αντισωμάτων που παράγονται από την επαφή του ιού με το αίμα (ELISA).

Αλλά μια τέτοια εξέταση αίματος για ηπατίτιδα C έχει ένα σημαντικό μειονέκτημα. Η διαδικασία της σύνθεσης αντισωμάτων εξαρτάται από τη λειτουργία και την παραγωγή ανοσοϊκανών κυττάρων. Τα ατομικά χαρακτηριστικά του σώματος μπορούν να προκαλέσουν ψευδώς αρνητική και ψευδώς θετική απόκριση..

Πριν συνταγογραφήσει μια δοκιμή ELISA, ο γιατρός λέει στον ασθενή για ένα πιθανό σφάλμα, το οποίο θέτει μια ερώτηση απάντησης: "Ποια εξέταση αίματος δείχνει την ηπατίτιδα C με ελάχιστο κίνδυνο να πάρει λανθασμένα αποτελέσματα;" Για να επιβεβαιώσετε ή να αντικρούσετε τη διάγνωση, η πιο ακριβής εργαστηριακή δοκιμή είναι PCR σε πραγματικό χρόνο.

Περαιτέρω τακτικές δράσης εξαρτώνται από αυτό που δείχνει η έρευνα. Εάν επιβεβαιωθεί η διάγνωση, ο ασθενής συνταγογραφείται αμέσως ηπατοπροστατευτικά, προειδοποιώντας για τη σημασία της σωστής διατροφής και ενός υγιεινού τρόπου ζωής. Αλλά η στοχευμένη θεραπεία είναι αδύνατη χωρίς να προσδιοριστεί το επίπεδο του ιικού φορτίου και του γονότυπου της ηπατίτιδας C..

Ορισμένα φάρμακα μπορούν να προκαλέσουν επιδείνωση της ηπατίτιδας Β. Επομένως, προκειμένου να αποκλειστούν επιπλοκές, συνταγογραφούνται επιπλέον δοκιμές για HBsAg. Ο HCV αντιμετωπίζεται μόνο μετά από αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής.

Είδος: Ποιοτικός, Ποσοτικός και Γονοτυπικός

Στην αρχική διάγνωση της ηπατίτιδας C, ο τίτλος των αντισωμάτων που παράγονται προσδιορίζεται με την ορολογική μέθοδο. Αυτό το αποτέλεσμα δείχνει περίπου τη δραστηριότητα της παθολογικής διαδικασίας. Ωστόσο, ο γιατρός μπορεί να λάβει τις πιο ακριβείς πληροφορίες μόνο αφού μελετήσει τα δεδομένα PCR.

Επί του παρόντος, σε σχεδόν όλα τα εργαστήρια, η ανάλυση πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας μια υπερευαίσθητη μέθοδο. Έτσι, η διάγνωση του HCV είναι δυνατή εντός 10-14 ημερών μετά τη μόλυνση, λιγότερο συχνά - μετά από 2,5-3 εβδομάδες. Ανάλογα με τους επιδιωκόμενους στόχους κατά τη διάρκεια της μελέτης, ο γιατρός συνταγογραφεί έναν συγκεκριμένο τύπο εξέτασης.

Υπάρχουν οι ακόλουθοι τύποι PCR:

  1. Ποιοτικός. Όταν συνταγογραφούν διαγνωστικές εξετάσεις, οι ασθενείς έχουν το ερώτημα τι δείχνει αυτή η ερευνητική μέθοδος. Η ποιοτική ανάλυση με τη μέθοδο PCR είναι μια εξαιρετικά ευαίσθητη δοκιμή που καθορίζει την παρουσία RNA ιού στο αίμα σε μια ελάχιστη συγκέντρωση. Συνήθως, αυτό το είδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας τεχνολογία αντίστροφης μεταγραφής. Αυτή είναι μία από τις λίγες μεθόδους PCR στις οποίες το RNA μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως στόχος.
  2. Ποσοτικός. Η ποσοτικοποίηση της ηπατίτιδας C σας επιτρέπει να προσδιορίσετε το ακριβές επίπεδο του HCV RNA στο αίμα σας. Η έρευνα είναι δυνατή με έναν μόνο τρόπο - τη μέθοδο σε πραγματικό χρόνο. Κατά τη διάρκεια της προετοιμασίας του υλικού για PCR, προστίθεται μια χρωστική στο δείγμα. Μετά από κάθε κύκλο ενίσχυσης, πραγματοποιείται μια αυτοματοποιημένη ποσοτική μελέτη σε πραγματικό χρόνο. Η τεχνική πραγματοποιείται συχνά σε συνδυασμό με αντίστροφη μεταγραφή. Έτσι, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί ποιοτικά ο μικρός αριθμός αντιγράφων RNA του ιού. Είναι λογικό να καθοριστεί ποσοτικά το επίπεδο του HCV RNA εάν επιτευχθεί ένα θετικό αποτέλεσμα ποιοτικής PCR..
  3. Γονότυπος. Η ανάλυση πραγματοποιείται στο τελικό στάδιο της διαγνωστικής διαδικασίας. Η αρχή της μελέτης βασίζεται στη διαφορά στην αλληλουχία νουκλεοτιδίων, η οποία διακρίνει έναν γονότυπο του ιού της ηπατίτιδας C από τον άλλο. Συνήθως η ανάλυση γίνεται με PCR πολλαπλών εκκινητών (multiplex).

Εάν υποψιάζεστε ότι υπάρχει φορέας του ιού, είναι απαραίτητο να εκτελέσετε PCR υψηλής ποιότητας. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, το άτομο είναι πιθανότατα υγιές. Αλλά για να αποκλειστεί εντελώς η μόλυνση, συνιστάται να επαναλάβετε τη μελέτη μετά από 7-10 ημέρες. Εάν ανιχνευτεί το RNA του ιού, διεξάγονται περαιτέρω δοκιμές (ποσοτικοί και γονότυποι).

Ενδείξεις για εργαστηριακή δοκιμή

Η κύρια ένδειξη δωρεάς αίματος για ηπατίτιδα C με τη μέθοδο αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης είναι ένας θετικός ενζυμικός ανοσοπροσδιορισμός (ανεξάρτητα από τον τύπο: Σύνολο, διαφοροποιημένη δοκιμή για IgG και IgM).

Επιπλέον, πρέπει να ελέγξετε:

  • κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης (η δοκιμή γίνεται δύο φορές - κατά το πρώτο τρίμηνο και 7-10 εβδομάδες πριν από τη γέννηση).
  • όταν εργάζεστε με αυξημένο κίνδυνο μόλυνσης (νοσοκόμες, βοηθοί εργαστηρίου, υπάλληλοι κέντρων δωρητών, κοσμετολόγοι κ.λπ.).
  • με αδιάκριτη σεξουαλική επαφή και απροστάτευτη επαφή με άγνωστο άτομο ·
  • στο πλαίσιο του HIV, του καρκίνου, της λήψης ορισμένων φαρμάκων κ.λπ.
  • ασθενείς εθισμένοι σε ενδοφλέβια φάρμακα.
  • με τη συνεχή διεξαγωγή επεμβατικών διαγνωστικών ή θεραπευτικών διαδικασιών ·
  • με μετάγγιση αίματος που πραγματοποιήθηκε πριν από το 1992 (προηγουμένως δεν υπήρχαν αξιόπιστοι τρόποι ελέγχου βιολογικού υλικού δότη για την παρουσία ιού).
  • όταν μια ανοιχτή πληγή έρχεται σε επαφή με αίμα κάποιου άλλου, αποστειρωμένα ιατρικά εργαλεία.

Η επίπτωση αυξάνεται κάθε χρόνο. Ως εκ τούτου, για την έγκαιρη ανίχνευση λοίμωξης, συνιστώνται εργαστηριακές εξετάσεις για HCV μία φορά το χρόνο..

Πού να δοκιμάσετε

Όταν επικοινωνεί με την κλινική, ο ασθενής δικαιούται δωρεάν εξετάσεις. Πρώτα όμως κάνουν μια δοκιμή ELISA. Και μόνο με θετικό ή αμφίβολο αποτέλεσμα, εμφανίζεται μια μελέτη PCR. Επομένως, μια επείγουσα διάγνωση μπορεί να γίνει επικοινωνώντας με ένα πληρωμένο εργαστήριο, όπου μπορείτε να δωρίσετε αίμα για PCR σε μια κατάλληλη στιγμή για τον ασθενή. Ταυτόχρονα, συνιστάται να ελέγχετε αμέσως τους δείκτες των ηπατικών ενζύμων, τις τυπικές κλινικές παραμέτρους του αίματος.

Κατά κανόνα, η μελέτη του αίματος με PCR είναι διαθέσιμη σε σχεδόν οποιοδήποτε εργαστήριο. Εάν το σημείο συλλογής αίματος δεν είναι εξοπλισμένο με τον κατάλληλο εξοπλισμό, το βιολογικό υλικό μεταφέρεται για τη μελέτη σύμφωνα με το καθεστώς θερμοκρασίας και άλλες συνθήκες. Η PCR σε πολυκλινική είναι δυνατή μόνο μετά από άλλες εξετάσεις, τα αποτελέσματα των οποίων δείχνουν έμμεσα την παρουσία ηπατίτιδας C.

Πώς να δωρίσετε σωστά αίμα

Πριν δωρίσετε αίμα για την ανίχνευση ενός πιθανού ιού, θα πρέπει να ακολουθήσετε έναν αριθμό κανόνων για την προετοιμασία της ανάλυσης..

Οι κύριες πτυχές αναφέρονται στο σημείωμα:

  1. Για 5-7 ημέρες, σταματήστε την κατανάλωση λιπαρών, τηγανισμένων τροφίμων, αλκοόλ. Σε γενικές γραμμές, οι γιατροί συστήνουν να τηρούν τους διατροφικούς κανόνες για τη δίαιτα αριθμός 5.
  2. Μην τρώτε 12-14 ώρες πριν από τη μελέτη. Μπορείτε να πιείτε μόνο νερό.
  3. Είναι καλύτερο να δωρίσετε αίμα το πρωί..
  4. Μην καπνίζετε πριν από τη διαδικασία.

Θα πρέπει επίσης να προειδοποιήσετε τον γιατρό σχετικά με τα φάρμακα που λαμβάνονται, τα πιθανά προβλήματα υγείας, τις χρόνιες ασθένειες..

Το αίμα προέρχεται από μια φλέβα. Μετά το πέρας της διαδικασίας, η νοσοκόμα σφραγίζει το σημείο παρακέντησης με αποστειρωμένο γύψο, προειδοποιεί για την ανάγκη κάμψης του βραχίονα και κράτημα σε αυτήν τη θέση για 10-15 λεπτά. Διαφορετικά, η πιθανότητα επώδυνου αιματώματος είναι υψηλή..

Πόσο διαρκεί η έρευνα;?

Η ανάλυση που πραγματοποιείται εξαρτάται από το εργαστήριο. Ο μέσος χρόνος παράδοσης κυμαίνεται από 1-3 ημέρες. Ορισμένες κλινικές παρέχουν υπηρεσία επί πληρωμή για ταχεία δοκιμή PCR, ωστόσο, ο χρόνος περιορίζεται από τις δυνατότητες του ιατρικού εξοπλισμού..

Στην πολυκλινική, τα αποτελέσματα μπορούν να μεταδοθούν στον γιατρό εντός 7-10 ημερών. Αυτό σχετίζεται με μεγάλη εισροή ασθενών. Ταυτόχρονα, το βιολογικό υλικό αποθηκεύεται σύμφωνα με όλες τις απαιτήσεις.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων

Κατά κανόνα, η αποκωδικοποίηση PCR υψηλής ποιότητας δεν είναι δύσκολη. Αλλά για να αποφύγετε την παρερμηνεία, θα πρέπει να συμβουλευτείτε έναν γιατρό με τη φόρμα που λάβατε από το εργαστήριο. Οι επιλογές, που σημαίνει αυτό ή αυτόν τον τύπο PCR, εμφανίζονται στον πίνακα.

Αρνητικό: το άτομο είναι υγιές ή η συγκέντρωση του ιικού RNA στο αίμα είναι πολύ χαμηλή για ανίχνευση.

Θετικό: το άτομο έχει μολυνθεί

Διεξάγεται εάν το ιό RNA ανιχνεύεται με ποιοτική ερευνητική μέθοδο.

Ανάλογα με τα αποτελέσματα των δοκιμών που λαμβάνονται, προσδιορίζεται το επίπεδο του ιικού φορτίου

Διεξήχθη με ηπατίτιδα C, επιβεβαιωμένη με άλλες ερευνητικές μεθόδους.

Η ανάλυση σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε τον ακριβή γονότυπο του παθογόνου της παθολογίας

Αλλά συχνά προκύπτει μια κατάσταση όταν η ELISA για ηπατίτιδα C είναι θετική και η PCR είναι αρνητική. Μόνο ένας γιατρός μπορεί να αποκρυπτογραφήσει τέτοια αποτελέσματα των εξετάσεων..

Ωστόσο, τέτοια δεδομένα είναι δυνατά στις ακόλουθες περιπτώσεις:

  • εγκυμοσύνη;
  • μεταφέρεται σε οξεία μορφή ηπατίτιδας C ·
  • Η θεραπεία HCV ολοκληρώθηκε.
  • την παρουσία λοιμώξεων που αυξάνουν την πιθανότητα ψευδώς θετικού αποτελέσματος ELISA.

Μόνο η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης δείχνει την ακριβή παρουσία ιογενούς λοίμωξης στο σώμα. Στο πλαίσιο της αρνητικής PCR, ένα θετικό ELISA στις περισσότερες περιπτώσεις δείχνει ότι το άτομο δεν έχει μολυνθεί. Αλλά ο γιατρός πρέπει να καθορίσει την ακριβή αιτία του ψευδώς θετικού αποτελέσματος..

Ποιοτική ανάλυση

Μια ποιοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C επιβεβαιώνει την παρουσία του παθογόνου στο αίμα. Εάν το RNA του ιού δεν ανιχνευθεί, το άτομο είναι υγιές. Ωστόσο, εάν υπάρχει υποψία μόλυνσης, συνιστάται να υποβληθείτε ξανά στη μελέτη. Ένα θετικό αποτέλεσμα δείχνει λοίμωξη. Αλλά αυτή η ανάλυση δεν επιτρέπει τη διαφοροποίηση της χρόνιας ηπατίτιδας C από την οξεία και δεν μπορεί να δείξει πόσο ενεργή είναι η παθολογική διαδικασία..

Ποσοτική δοκιμή

Η ποσοτική ανάλυση με PCR πραγματοποιείται μετά την επιβεβαίωση της διάγνωσης και η αποκωδικοποίησή της είναι σημαντική για τον προσδιορισμό της τακτικής θεραπείας. Ανάλογα με τη συγκέντρωση των σωματιδίων του αιτιολογικού παράγοντα της ηπατίτιδας C, διακρίνονται διάφοροι βαθμοί ιού φορτίου: μεσαίο, υψηλό και χαμηλό. Όσο υψηλότερος είναι ο δείκτης, τόσο πιο σοβαρή είναι η λοίμωξη και τόσο πιο δύσκολη είναι η θεραπεία. Κανονικά, το ιικό RNA απουσιάζει στο αίμα.

Γονότυπος

Πολλά εργαστήρια εκτελούν γονότυπους σε συνδυασμό με ποσοτική PCR, η οποία εξοικονομεί χρήματα. Μια τέτοια μελέτη γίνεται μόνο μία φορά, πριν από την έναρξη της θεραπείας. Συνήθως, η ανάλυση πραγματοποιείται για έναν από τους τέσσερις πιο συνηθισμένους γονότυπους (1, 2, 3 ή 4). Ο υποτύπος HCV προσδιορίζεται ταυτόχρονα. Δεν είναι δυνατός ο γονότυπος για τα υποείδη 5 και 6 της ηπατίτιδας C σε κάθε εργαστήριο.

Πλεονεκτήματα της διάγνωσης PCR

Τα διαγνωστικά με μέθοδο PCR είναι ευρέως διαδεδομένα λόγω:

  • υψηλή ακρίβεια (υπό την προϋπόθεση ότι χρησιμοποιούνται τα συστήματα δοκιμής τελευταίας γενιάς) ·
  • ευκολία δειγματοληψίας βιοϋλικών
  • γρήγορα αποτελέσματα (έως 5 ημέρες).

Αλλά το κύριο πλεονέκτημα έγκειται στις ευρείες διαγνωστικές δυνατότητες της μελέτης. Η ανάλυση επιτρέπει όχι μόνο τον εντοπισμό του ιού, αλλά και τον ακριβή προσδιορισμό της συγκέντρωσής του στο σώμα και τον προσδιορισμό του γονότυπου της λοίμωξης. Επιπλέον, απαιτείται ποσοτική έρευνα για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της αντιιικής θεραπείας. Ο κύριος στόχος της θεραπείας είναι να επιτευχθεί ο ρυθμός δοκιμής (δηλαδή, μη ανιχνεύσιμο επίπεδο HCV RNA) στις 4, 12 ή 24 εβδομάδες της αντιιικής πορείας και να διατηρηθεί αυτό το αποτέλεσμα.

Το κόστος

Το κόστος της ανάλυσης PCR ποικίλλει ανά περιοχή. Έτσι, στη Μόσχα οι τιμές είναι υψηλότερες. Η PCR υψηλής ποιότητας θα κοστίσει 600-800 ρούβλια, ποσοτικά - 2200-3000 ρούβλια, γονοτυπία - από 1000 ρούβλια. Μπορείτε να μάθετε ακριβώς πόσο κοστίζει μια συγκεκριμένη μελέτη απευθείας στο εργαστήριο, στον ιστότοπο ενός ιατρικού οργανισμού ή μέσω τηλεφώνου.

Ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C: χαρακτηριστικά, ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Η ιογενής ηπατίτιδα C είναι μια από τις πιο σοβαρές ασθένειες που μπορεί να αντιμετωπίσει ένας σύγχρονος άνθρωπος. Το πρόβλημα είναι ότι αυτή η σοβαρή ασθένεια είναι πρακτικά ασυμπτωματική και ένα άτομο μπορεί να αισθανθεί φυσιολογικό, ενώ μια ύπουλη ασθένεια προκαλεί ανεπανόρθωτη βλάβη στο ήπαρ του..

Για να αποφευχθούν επικίνδυνες συνέπειες, είναι απαραίτητο να γίνει έγκαιρη διάγνωση του HCV. Μία από τις καλύτερες διαγνωστικές μεθόδους είναι μια ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C. Αυτή η μέθοδος προσδιορισμού της διάγνωσης είναι η πιο ενημερωτική και εντελώς ανώδυνη για τους ασθενείς. Αλλά πώς να δοκιμάσετε την ηπατίτιδα C PCR; Τι είναι αυτή η ανάλυση; Πώς διαγιγνώσκεται η ηπατίτιδα C με PCR; Ας μιλήσουμε για αυτό στο άρθρο.

Η ανάλυση για την ηπατίτιδα C είναι ποιοτική - τι είναι?

Επί του παρόντος, υπάρχουν πολλές μέθοδοι για τη διάγνωση ιογενών ασθενειών, συμπεριλαμβανομένου του HCV. Αλλά μια εξέταση αίματος PCR για ηπατίτιδα C - τι είναι αυτό; Πρώτα απ 'όλα, πρέπει να ειπωθεί ότι πρόκειται για μια μελέτη των βιολογικών υλικών του ασθενούς για την ανίχνευση του HCV παθογόνου. Διεξάγεται εξέταση αίματος PCR για ηπατίτιδα C σε εργαστηριακές συνθήκες. Αυτή η μελέτη απαιτείται για όλους τους ασθενείς στους οποίους έχουν βρεθεί αντισώματα αίματος έναντι αντιγόνων ηπατοϊού. Ο κύριος σκοπός της διάγνωσης PCR της ηπατίτιδας είναι η ανίχνευση φλαβοϊού.

Η συντομογραφία PCR σημαίνει "αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης". Αυτό σημαίνει ότι με τη βοήθεια αυτής της ανάλυσης της ηπατίτιδας C ποιοτικά, αποκαλύπτεται η μέγιστη περιοχή βλάβης στα ηπατικά κύτταρα και τους ιστούς από τον ηπατοϊό. Αυτή η αναλυτική μέθοδος σας επιτρέπει να προσδιορίσετε την ποσοτική έκταση της βλάβης στο σώμα, καθώς και τα ποιοτικά χαρακτηριστικά του παθογόνου..

Τα ποιοτικά αποτελέσματα των δοκιμών ηπατίτιδας PCR μπορούν να βοηθήσουν τη θεραπεία των ηπατολόγων να καθορίσουν το σχήμα θεραπείας HCV για έναν συγκεκριμένο ασθενή. Επίσης, χάρη σε αυτήν τη μέθοδο, καθορίζεται η διάρκεια της θεραπευτικής πορείας, καθώς μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να προσδιοριστεί πόσο σοβαρή πρέπει να ξεπεραστεί η λοίμωξη..

Πώς να εξεταστείτε για PCR ηπατίτιδας C?

Κατά τη διάγνωση του HCV, πραγματοποιείται μεγάλος αριθμός διαφορετικών μελετών προκειμένου να προσδιοριστεί η καταλληλότερη μέθοδος θεραπείας της εν λόγω ασθένειας. Αλλά πώς να κάνετε ένα τεστ PCR για ηπατίτιδα C?

Πριν απαντήσετε σε αυτήν την ερώτηση, πρέπει να διευκρινιστεί ότι ο υπό εξέταση τύπος ανάλυσης ονομάζεται επίσης δοκιμή RNA. Πράγματι, ο φλαβοϊός περιέχει ένα σωματίδιο RNA, οι διαστάσεις του οποίου είναι από 30 έως 60 nm. Ο ιός είναι επιρρεπής σε μεταλλάξεις και αυτό λαμβάνεται πάντα υπόψη κατά τη διάγνωση αυτού του τύπου. Η αντίσταση κάθε γονότυπου του HCV παθογόνου διαφέρει σημαντικά, επομένως η πρόγνωση της πορείας της νόσου εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από αυτήν την ανάλυση για ποιοτική ηπατίτιδα..

Αλλά πώς να δωρίσετε αίμα για PCR για ηπατίτιδα C; Κατά τη διάγνωση, τόσο οι προπαρασκευαστικές ενέργειες του ασθενούς όσο και η ίδια η διαδικασία αιμοδοσίας έχουν μεγάλη σημασία:

  • Κατά τη διάρκεια της ημέρας πριν από τη δωρεά αίματος για υψηλής ποιότητας PCR για ηπατίτιδα, ο ασθενής πρέπει να εγκαταλείψει λιπαρές τροφές, αλκοόλ και κάπνισμα. Διαφορετικά, τα αποτελέσματα θα είναι ανακριβή.
  • Το βράδυ, την παραμονή της εξέτασης αίματος για ηπατίτιδα με PCR, ο ασθενής δεν πρέπει να τρώει τίποτα.
  • Τα βιολογικά υλικά πρέπει να παραδοθούν νωρίς το πρωί, πριν από τις 8:00. Απαγορεύεται αυστηρά το φαγητό και ακόμη και το ποτό πριν από αυτό.
  • Ένα δείγμα αίματος από τον ασθενή συλλέγεται από μια φλέβα χρησιμοποιώντας μια αποστειρωμένη σύριγγα μιας χρήσης. Ως μέρος της προσωπικής ασφάλειας, συνιστάται στον ασθενή να διασφαλίσει ότι η διαδικασία πραγματοποιείται αποκλειστικά με αποστειρωμένη σύριγγα..

Αφού περάσει την ανάλυση για PCR ηπατίτιδας C, ο ασθενής επιστρέφει στο σπίτι. Λαμβάνεται λίγο αίμα για εργαστηριακές δοκιμές, οπότε δεν θα υπάρξουν αρνητικές επιπτώσεις από την ασήμαντη απώλεια..

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων της έρευνας

Η αποκωδικοποίηση των διαγνωστικών PCR της ηπατίτιδας C πραγματοποιείται στο εργαστήριο. Οι εργαστηριακοί εργαζόμενοι πραγματοποιούν μια σειρά συγκεκριμένων μελετών, το αποτέλεσμα των οποίων καταγράφεται γραπτώς. Η τυποποιημένη ευαισθησία της δοκιμής, χάρη στην οποία είναι δυνατόν να διαπιστωθεί η παρουσία και η κατανομή ενός παθογόνου, κυμαίνεται από 10 έως 500 IU / ml.

Τα αποτελέσματα των δοκιμών αποκωδικοποιούνται με παρόμοιο τρόπο:

  • Ένα θετικό αποτέλεσμα δείχνει υψηλή συγκέντρωση του παθογόνου στο αίμα του ξενιστή. Σε αυτήν την περίπτωση, όσο υψηλότερος είναι ο δείκτης, τόσο πιο σοβαρός είναι ο ασθενής που πάσχει από HCV.
  • Τα αρνητικά αποτελέσματα των δοκιμών δείχνουν μια εξαιρετικά χαμηλή συγκέντρωση ηπατοϊού στο αίμα ενός ατόμου. Εάν δεν ανιχνευθεί PCR ηπατίτιδας C, για μετέπειτα θεραπεία, πρέπει να προσδιοριστεί το μέγιστο όριο ευαισθησίας του βιολογικού υλικού του ασθενούς σε διάφορα αντιδραστήρια..

Μετά τη μελέτη του βιοϋλικού, οι εργαζόμενοι στο ιατρικό εργαστήριο εκδίδουν μια συγκεκριμένη ετυμηγορία, η οποία είναι υποχρεωτική τεκμηριωμένη και αρχειοθετημένη.

Τι πρέπει να κάνει ο ασθενής αφού λάβει τα αποτελέσματα της εξέτασης?

Αφού λάβει τα αποτελέσματα της μελέτης δειγμάτων αίματος, ο ασθενής πρέπει να πάει στον θεράποντα ιατρό. Δεν συνιστάται κατηγορηματικά να εξαγάγετε ανεξάρτητα συμπεράσματα σχετικά με τη διάγνωσή σας και να σχεδιάσετε μια συγκεκριμένη θεραπεία.

Ανάλογα με τα αποτελέσματα των δοκιμών, ο ηπατολόγος συνταγογραφεί ένα ή άλλο θεραπευτικό σχήμα χρησιμοποιώντας ενεργά αντιιικά φάρμακα. Ανάλογα με τον αναλυτικά προσδιορισμένο γονότυπο HCV, μπορούν να συνταγογραφηθούν τα ακόλουθα θεραπευτικά σχήματα για αυτήν την επικίνδυνη ασθένεια:

  • Το Sofosbuvir σε συνδυασμό με το Ledipasvir στους γονότυπους 1, 4, 5 και 6;
  • Sofosbuvir και Daklatasvir - στα 1, 2, 3 και 4;
  • Το Sofosbuvir σε συνδυασμό με το Velpatasvir - για οποιονδήποτε από τους γνωστούς γονότυπους παθογόνων.

Ανάλογα με τη γενική κατάσταση του σώματος, τη συγκέντρωση του ηπατικού ιού και τα χαρακτηριστικά της βλάβης, η θεραπεία μπορεί να συνταγογραφηθεί για 12 ή 24 εβδομάδες, με ή χωρίς ριμπαβιρίνη. Ο ασθενής πρέπει να αγοράσει φάρμακα για ολόκληρη τη θεραπευτική περίοδο, καθώς δεν μπορεί να διακοπεί σε καμία περίπτωση..

Ωστόσο, δεν είναι καθόλου απαραίτητο να εξοικονομήσετε χρήματα για ακριβά αμερικανικά φάρμακα - μπορείτε να αγοράσετε φθηνότερα ινδικά ανάλογα. Αυτά τα φάρμακα παρασκευάζονται σύμφωνα με μια επίσημη συνταγή. Το χαμηλότερο κόστος σχετίζεται με τη δυνατότητα μαζικής παραγωγής του φαρμάκου. Ταυτόχρονα, οι ινδοί κατασκευαστές είναι τόσο σίγουροι για την υψηλή ποιότητα των προϊόντων τους που παρέχουν στους πελάτες τους οποιεσδήποτε εγγυήσεις. Για παράδειγμα, ο Zydus Heptiza προσφέρει την εγγύηση ανάκτησης. Αυτό είναι ένα έγγραφο σύμφωνα με το οποίο ο ασθενής έχει το δικαίωμα να επαν-θεραπεύσει εις βάρος της εταιρείας εάν η προηγούμενη θεραπεία δεν βοήθησε.

Σπουδαίος! Μετά την αγορά του φαρμάκου, ο ασθενής πρέπει να ακολουθεί πλήρως τις συστάσεις του θεράποντος ιατρού και να χρησιμοποιεί το φάρμακο καθημερινά καθ 'όλη τη διάρκεια της θεραπευτικής περιόδου..

Πού μπορώ να βρω μια ποιοτική ανάλυση για PCR?

Λοιπόν, η απάντηση στην ερώτηση "Πώς να κάνετε ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C;" Είναι επίσης γνωστό τι πρέπει να κάνει για τον ασθενή μετά την κατάλληλη εξέταση. Αλλά παραμένει ένα ακόμη δίλημμα - όπου ακριβώς είναι δυνατόν να δωρίσετε αίμα για ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C υψηλής ποιότητας.

Σε γενικές γραμμές, στη χώρα μας, μπορείτε να υποβληθείτε σε διαγνωστικά αυτού του τύπου:

  • Στις πολιτικές κλινικές?
  • Σε ιδιωτικές κλινικές με αποκλειστικό επίπεδο υπηρεσιών.
  • Σε νοσοκομεία και κλινικές εσωτερικών ασθενών.
  • Σε ανεξάρτητα ιατρικά εργαστήρια.

Επίσης, μια εξέταση αίματος PCR για ηπατίτιδα C μπορεί να πραγματοποιηθεί σε ξένες κλινικές και εργαστήρια. Αυτή η ερευνητική μέθοδος ανήκει στο πρότυπο.

Τι άλλο πρέπει να γνωρίζετε για μια εξέταση αίματος υψηλής ποιότητας για ηπατίτιδα C?

Εάν υπάρχει ανάγκη για διαγνωστικά PCR της ηπατίτιδας C, θα πρέπει να γνωρίζετε μερικά από τα χαρακτηριστικά αυτής της μορφής δοκιμών. Συγκεκριμένα:

  • Τα αποτελέσματα της εν λόγω εξέτασης αίματος μπορεί να είναι θετικά για τον HCV μόλις 4-5 ημέρες μετά τη μόλυνση. Οι πρωτεϊνικές ενώσεις σχηματίζονται αργότερα.
  • Κατά την αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων μιας ποιοτικής εξέτασης αίματος για ηπατίτιδα C, ένα γράμμα μπορεί να βρίσκεται δίπλα στον γονότυπο του παθογόνου. Για παράδειγμα, "1α". Αυτός είναι ένας χαρακτηρισμός υποτύπου που δεν επηρεάζει με κανένα τρόπο τα χαρακτηριστικά της θεραπείας.
  • Τα αποτελέσματα των δοκιμών παρέχονται πολύ γρήγορα. Την επόμενη μέρα μετά τη διάγνωση, ο ασθενής λαμβάνει το αντίστοιχο έγγραφο.
  • Ταυτόχρονα με αυτό το τεστ, λαμβάνεται αίμα για εξέταση ELISA.

Υπάρχει μια άποψη σχετικά με μια ποιοτική εξέταση για ηπατίτιδα C ότι αυτή η εξέταση του αίματος του ασθενούς δεν είναι ο καλύτερος τρόπος για να προσδιοριστεί το επίπεδο του τύπου HCV. Αυτή η γνώμη είναι εν μέρει αληθινή, επειδή η διάγνωση πρέπει να είναι ολοκληρωμένη..

Ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C: αποκωδικοποίηση

Η αιτία της ανάπτυξης της ιογενούς ηπατίτιδας C είναι η μόλυνση από ένα παθογόνο που ανήκει στην οικογένεια Flaviviridae. Υπάρχει ένα μεγάλο χρονικό διάστημα μεταξύ της μόλυνσης και της έναρξης της παραγωγής αντισωμάτων, το οποίο δεν επιτρέπει την έγκαιρη διάγνωση της νόσου μέσω ενός ενζύμου ανοσοδοκιμασίας.

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C, βιοχημεία, CBC, ήπατος πραγματοποιείται εάν υπάρχει υποψία μόλυνσης. Με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, ο ιός μπορεί να ανιχνευθεί στο αίμα ακόμη και κατά την πρώτη εβδομάδα μόλυνσης, το οποίο είναι το κυρίαρχο πλεονέκτημα της μεθόδου.

Ποσοτική και ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C και χαρακτηριστικά της μελέτης, πώς να προετοιμαστεί, εάν υπάρχουν σφάλματα, αποκωδικοποίηση - θα εξετάσουμε λεπτομερώς.

Ποια είναι η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης?

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια τεχνική μοριακής έρευνας για τον προσδιορισμό του γενετικού υλικού ενός ιικού παράγοντα από τις πρώτες ημέρες της μόλυνσης. Η ανάλυση χαρακτηρίζεται από υψηλό βαθμό αξιοπιστίας, ειδικότητας και ακρίβειας. Χάρη σε αυτόν, εντοπίζεται όχι μόνο η απουσία / παρουσία του ιού, αλλά και το ιικό φορτίο (ποσοτική τιμή), ο γονότυπος.

Για τη μελέτη, απαιτείται το αίμα του ασθενούς, όπου πιθανώς βρίσκεται το RNA μιας ιογενούς λοίμωξης. Υπό εργαστηριακές συνθήκες, προστίθενται αστάρια στο βιολογικό υγρό - αυτά είναι τεχνητά συντεθειμένα θραύσματα του επιθυμητού γονιδίου μικρού μήκους. Plus RNA πολυμεράση - ένα εξειδικευμένο ένζυμο που πολλαπλασιάζει τη συγκέντρωση του επιθυμητού υλικού.

Περαιτέρω, το αίμα με την προσθήκη συστατικών θερμαίνεται και ψύχεται αρκετές φορές σε μια ειδική συσκευή. Μετά από αυτό έρχεται η ανάλυση των ληφθέντων αποτελεσμάτων, σύγκριση με τα γνωστά γονίδια του ιικού παράγοντα. Με βάση αυτό, γίνεται ένα συμπέρασμα σχετικά με την ασθένεια.

Ποικιλίες έρευνας PCR

Η ανάλυση για PCR ηπατίτιδας C πραγματοποιείται στο εργαστήριο με την προσθήκη των απαραίτητων αντιδραστηρίων, έχει τρεις ποικιλίες με διακριτικά χαρακτηριστικά:

  1. Η ποιοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C είναι το πρώτο στάδιο της μελέτης. Μέσω αυτού, ανιχνεύεται το γενετικό υλικό του παθογόνου στον ορό του αίματος.
  2. Μια ποσοτική μελέτη σας επιτρέπει να εκτιμήσετε το ιικό φορτίο - αυτό είναι το περιεχόμενο του ιικού υλικού σε 1 ml αίματος ενός ασθενούς. Πραγματοποιείται πριν από την έναρξη της θεραπείας και μετά από 1-4-12 εβδομάδες θεραπείας. Όταν το μάθημα είναι μακρύ, η μελέτη πρέπει να πραγματοποιηθεί μετά από 24 εβδομάδες θεραπείας για να εκτιμηθεί η αποτελεσματικότητα.
  3. Γονότυπος. Μια μολυσματική ασθένεια αναπτύσσεται γρήγορα, ο ιός τείνει να μεταλλάσσεται. Επομένως, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί ο γονότυπος του ιού.

Οι επιστήμονες έχουν εντοπίσει 7 γονότυπους του ιού. Στη Ρωσική Ομοσπονδία, 1-2-3 είδη είναι πολύ κοινά.

Κάθε ένας από τους γονότυπους χαρακτηρίζεται από αντοχή στη θεραπεία.

Για παράδειγμα, με τον τύπο 1, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας είναι περίπου 60%, με φόντο 2-3 τύπους, ο δείκτης φτάνει το 85%.

Για να επιλέξετε τα σωστά φάρμακα, τη διάρκεια της θεραπείας, απαιτείται να προσδιορίσετε όχι μόνο το γεγονός της μόλυνσης, αλλά και τη συγκέντρωση του ιού, τον γονότυπο του.

Ενδείξεις για

Δείκτες για ηπατίτιδα, PCR και ELISA, άλλες δοκιμές έχουν ορισμένες ιατρικές ενδείξεις:

  • Όταν ένας ασθενής έχει ιστορικό λοίμωξης από HIV, το AIDS.
  • Επαφή με μολυσμένο άτομο, καθώς η ιογενής ηπατίτιδα είναι πολύ μεταδοτική.
  • Συμπτώματα κίρρωσης του ήπατος - ηπατομεγαλία, αύξηση του μεγέθους του σπλήνα, φλεβικό μοτίβο εμφανίστηκε στην κοιλιά κ.λπ..
  • Κλινική λειτουργικών ηπατικών διαταραχών - περιοδικός / επίμονος πόνος στο δεξιό υποχόνδριο, κιτρίνισμα του δέρματος, ναυτία.
  • Υψηλές τιμές AST και ALT στη βιοχημεία του αίματος.
  • Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, όταν οι δοκιμασίες ηπατικής λειτουργίας είναι κακές.
  • Πριν ξεκινήσετε ένα πρόγραμμα προστασίας από ιούς για τον προσδιορισμό του ιικού φορτίου.
  • Για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.
  • Μετά τη θεραπεία για την πρόληψη της επανεμφάνισης ιογενών λοιμώξεων.

Η PCR πραγματοποιείται με επιβεβαιωμένη διάγνωση ηπατίτιδας Β για τον αποκλεισμό μικτού τύπου ηπατικής βλάβης.

Προετοιμασία για έρευνα και δειγματοληψία

Πώς θα προετοιμαστεί για την ανάλυση, θα πει ο γιατρός. Συνιστάται προετοιμασία στον ασθενή για να λάβει ένα ακριβές αποτέλεσμα. Αποτελείται από τις ακόλουθες συστάσεις:

  1. Η ανάλυση πρέπει να γίνεται το πρωί, με άδειο στομάχι. Επιτρέπεται να πίνει μόνο καθαρό, μη ανθρακούχο νερό πριν από τη λήψη αίματος. Τελευταίο γεύμα - 8 ώρες πριν από τη συλλογή.
  2. Εάν δεν μπορείτε να κάνετε τη δοκιμή το πρωί, μπορείτε να το κάνετε το βράδυ ή το μεσημέρι, το πιο σημαντικό - 5-6 ώρες μετά το φαγητό, όχι νωρίτερα.
  3. Σταματήστε αλκοολούχα ποτά, ποτά με καφεΐνη, χυμούς 48 ώρες πριν από τη μελέτη.
  4. Για 2 ημέρες πρέπει να ακολουθήσετε μια δίαιτα, εξαιρουμένων όλων των επιβλαβών προϊόντων. Ωστόσο, ορισμένοι γιατροί πιστεύουν ότι τα λιπαρά, τηγανητά τρόφιμα δεν επηρεάζουν την ακρίβεια του τεστ PCR..

Μην πάρετε φάρμακα για 24 ώρες πριν από τον ιατρικό χειρισμό. Εάν αυτό δεν είναι δυνατό, ενημερώστε το γιατρό σας. Η ανάλυση δεν συνιστάται να πραγματοποιείται αμέσως μετά από υπερηχογράφημα, CT, μασάζ και άλλες διαδικασίες φυσικοθεραπείας.

Η δειγματοληψία αίματος πραγματοποιείται ως εξής:

  • Μέσω μιας ειδικής αιχμής που σφίγγεται στο αντιβράχιο του ασθενούς, ο γιατρός σταματά τη ροή του φλεβικού αίματος. Οι φλέβες γίνονται πιο ορατές, γεγονός που διευκολύνει την εισαγωγή βελόνας και μετά τη λήψη αίματος.
  • Η περιοχή του δέρματος πριν από την εισαγωγή μιας αποστειρωμένης βελόνας υποβάλλεται σε επεξεργασία με υγρό που περιέχει αλκοόλη.
  • Μια βελόνα εισάγεται στη φλέβα, μετά την οποία συνδέεται ένας δοκιμαστικός σωλήνας, μέσα στον οποίο ρέει αίμα.
  • Μετά την εισαγωγή της βελόνας, το τουρνουά αφαιρείται. Συλλέξτε την απαιτούμενη ποσότητα αίματος, αφαιρέστε τη βελόνα.
  • Εφαρμόζεται βαμβάκι που βυθίζεται σε αλκοόλ στο σημείο της ένεσης.

Για να αποφευχθεί ο σχηματισμός μώλωπας στο σημείο ένεσης της βελόνας, είναι απαραίτητο να πιέσετε το βαμβάκι αρκετά σκληρά στην τραυματισμένη περιοχή, λυγίστε το βραχίονα και κρατήστε το σε αυτήν τη θέση για 3-4 λεπτά.

Εάν ο ασθενής παίρνει φάρμακα που αραιώνουν το αίμα (ασπιρίνη, βαρφαρίνη), μπορεί να υπάρχουν ορισμένα προβλήματα με τη διακοπή της αιμορραγίας.

Πλεονεκτήματα της PCR σε σχέση με άλλες δοκιμές

Η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης έχει ορισμένα πλεονεκτήματα έναντι άλλων διαγνωστικών τεχνικών..

Τα πλεονεκτήματα της μελέτης παρουσιάζονται στον πίνακα:

Τύπος μελέτηςΠιθανό αποτέλεσμα και σκοπούμενη μεταγραφή
PCR υψηλής ποιότητας
Ποσοτικός
Γονότυπος
Άμεση διάγνωση του αιτιολογικού παράγοντα της παθολογίαςΆλλες μελέτες μας επιτρέπουν να δώσουμε μια απάντηση - υπάρχει παθογόνο στο σώμα ή όχι. Αλλά χρησιμοποιώντας τεχνικές PCR, μπορείτε να προσδιορίσετε συγκεκριμένα τον τύπο του ιογενούς παράγοντα.
Ειδικότητα μελέτηςΗ PCR ανιχνεύει ένα μοναδικό κομμάτι DNA που ταιριάζει μόνο σε έναν τύπο ιικού παράγοντα. Αυτό ελαχιστοποιεί την πιθανότητα σφάλματος..
Υψηλός βαθμός ευαισθησίαςΕίναι δυνατόν να εντοπιστεί ακόμη και μια μικρή συγκέντρωση του ιού στο αίμα.
Προσδιορισμός όλων των παθογόνωνΚατά τη διάρκεια της έρευνας, όλοι οι παθογόνοι παράγοντες μπορούν να ανιχνευθούν.
Λανθάνουσες λοιμώξειςΕκτός από το ιικό παθογόνο, μπορούν να ανιχνευθούν λοιμώξεις που έχουν λανθάνουσα πορεία, διακρίνονται από υψηλή αντιγονική δράση..

Όταν ένας ασθενής λάβει θετικό αποτέλεσμα, αυτό σημαίνει ότι το γενετικό υλικό του αιτιολογικού παράγοντα της ηπατίτιδας έχει βρεθεί στο βιολογικό υγρό. Αρνητικό σύνολο - χωρίς ίχνη ιού.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων

Ο γιατρός πρέπει να αποκρυπτογραφήσει τα αποτελέσματα με βάση το συμπέρασμα που λαμβάνει ο ασθενής στο εργαστήριο. Είναι απαραίτητο να αναλυθούν τα δεδομένα σε συνδυασμό με δείκτες βιοχημείας, CBC, υπερήχους.

Ποιοτικός

Μια ποιοτική μελέτη θα δείξει την παρουσία ή την απουσία του αιτιολογικού παράγοντα μιας ιογενούς νόσου στο ανθρώπινο αίμα. Μπορεί να υπάρχουν δύο επιλογές - αρνητικό (κανονικό) ή θετικό αποτέλεσμα.

Η φόρμα μερικές φορές λέει: βρέθηκε ή δεν βρέθηκε.

Ένα θετικό αποτέλεσμα - ο βοηθός του εργαστηρίου εντόπισε το γενετικό υλικό του ιικού παράγοντα στο αίμα του ασθενούς, επιβεβαιώθηκε η λοίμωξη. Αρνητικό συμπέρασμα - δεν υπάρχει λοίμωξη, τα θραύσματα RNA του ιού είναι κάτω από τα όρια ευαισθησίας.

Ποσοτικός

Η ποσοτική ανάλυση συνεπάγεται διάφορες επιλογές για τα αποτελέσματα. Για ευκολία, θα τα παρουσιάσουμε σε μορφή πίνακα..

ΑποτέλεσμαΑποκρυπτογράφηση
ΑρνητικόςΑυτός είναι ο κανόνας για ένα υγιές άτομο. Αυτό σημαίνει ότι δεν υπάρχει ιικό RNA ηπατίτιδας στο βιολογικό υλικό που μελετήθηκε ή ότι το περιεχόμενο είναι μικρότερο από τα όρια ευαισθησίας.
Έως 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlΥποδεικνύει ότι το περιεχόμενο RNA είναι μικρότερο από το εύρος ποσοτικοποίησης. Αυτό το αποτέλεσμα πρέπει να ερμηνευθεί προσεκτικά επειδή θεωρείται αμφιλεγόμενο. Επιπλέον, διεξάγονται και άλλες μελέτες για επακόλουθη σύγκριση. Επαναλάβετε επίσης τη δοκιμή PCR.
Έως 8 * 10 ^ 5 IU / mlΧαμηλό ιικό φορτίο. Κατά κανόνα, αυτό το αποτέλεσμα σημαίνει ότι η θεραπεία είναι αποτελεσματική..
Από 8 * 10 ^ 5 IU / mlΥψηλό ιικό φορτίο. Απαιτείται αμέσως θεραπεία (εάν δεν πραγματοποιηθεί) ή απαιτείται διόρθωση της φαρμακευτικής αγωγής.
2,4 * 10 ^ 7 IU / mlΤο RNA είναι μεγαλύτερο από το ανώτατο μέγιστο ποσοτικοποίησης. Στο πλαίσιο ενός τέτοιου αποτελέσματος, το ιικό φορτίο δεν κρίνεται. Απαιτείται δεύτερη μελέτη με αραίωση δείγματος βιολογικού υγρού.

Γονότυπος

Αποτέλεσμα - βρέθηκε ριβονουκλεϊκό οξύ συγκεκριμένου γονότυπου. Επιπλέον, υποδεικνύεται ο γονότυπος και ο υποτύπος, ο βοηθός εργαστηρίου κωδικοποιεί το συμπέρασμα με λατινικά γράμματα και αριθμούς. Για παράδειγμα, ο γονότυπος 1α. Συνολικά, διακρίνονται 7 γονότυποι, 67 υπότυποι.

Αποτέλεσμα - Εντοπίστηκε RNA του ιού της ηπατίτιδας C - αυτό είναι το DNA ενός σπάνιου γονότυπου που δεν μπορεί να αποδοθεί σε κοινούς ιογενείς παράγοντες, επομένως απαιτείται πρόσθετη διάγνωση.

Όταν η PCR είναι αρνητική και η ELISA είναι θετική

Αποφασίζει το συμπέρασμα του εργαστηριακού βοηθού ηπατολόγου ή ειδικού για τις μολυσματικές ασθένειες. Υπάρχει πάντα ο κίνδυνος ψευδούς αρνητικού ή ψευδούς θετικού αποτελέσματος. Μερικές φορές συμβαίνει ότι η PCR είναι αρνητική και η ELISA είναι θετική.

Αυτό σημαίνει ότι προς το παρόν δεν υπάρχει ιός στο αίμα του ασθενούς, αλλά έχει υποστεί οξεία ασθένεια. Γενικά πιστεύεται ότι το ELISA εμφανίζει αντισώματα που παράγονται από το ανοσοποιητικό σύστημα μετά την εισβολή του παθογόνου στο σώμα..

Το ELISA, σε σύγκριση με το PCR, χαρακτηρίζεται από χαμηλή αξιοπιστία και αξιοπιστία, επομένως χρησιμοποιείται ως πρωταρχικός έλεγχος. Κατά τη διάγνωση της ιογενούς ηπατίτιδας, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι απαραίτητη.

Το κόστος των δοκιμών για την ηπατίτιδα C

Μπορείτε να κάνετε εξετάσεις στο νοσοκομείο όπου παρατηρείται ο ασθενής, εάν υπάρχει εργαστήριο εκεί ή μπορείτε να πάτε σε ιδιωτικό κέντρο επί πληρωμή..

Σε σύντομο χρονικό διάστημα, μπορείτε να λάβετε το αποτέλεσμα σε εργαστηριακά κέντρα όπως Gemotest, Invitro, Helix.

Κόστος έρευνας ανάλογα με το εργαστήριο:

Όνομα εργαστηριακής υπηρεσίαςΠολιτική τιμών
Ελιξ· Το κόστος της δειγματοληψίας βιολογικού υλικού - 170 ρούβλια.

Ποιοτική + ποσοτική έρευνα με μέθοδο PCR - 3990 ρούβλια.

Ανίχνευση αντισωμάτων μιας ιογενούς νόσου - 1.500 ρούβλια (2-3 ημέρες).

Έλεγχος της δραστηριότητας του ιού πριν από την έναρξη της θεραπείας - 4090 ρούβλια.

InvitroΠοσοτική ανίχνευση RNA του ιού της ηπατίτιδας C με PCR - 3140 ρούβλια.

Συλλογή βιολογικού υλικού (φλεβικό αίμα) - 199 ρούβλια.

Αξιολόγηση ιικού φορτίου με ανίχνευση σε πραγματικό χρόνο - 18.000 ρούβλια.

Υψηλής ποιότητας υπερευαισθησία - από 3000 ρούβλια.

Γονοτύπος - από 1250 ρούβλια.

HemotestΠοσοτική έρευνα τιμή 2200 ρούβλια.

Διαγνωστικά υψηλής ποιότητας από 700 ρούβλια.

Προσδιορισμός του RNA του παθογόνου - από 4000 ρούβλια.

Δειγματοληψία αίματος από φλέβα περίπου 150 ρούβλια.

Η διάρκεια της μελέτης είναι κατά μέσο όρο 2-3 ημέρες. Σε ορισμένα εργαστήρια υπάρχει μια επείγουσα υπηρεσία ανάλυσης, το κόστος της είναι 1,5-2 φορές υψηλότερο. Είναι επίσης δυνατό να καλέσετε έναν ειδικό γιατρό για να δωρίσετε αίμα και να λάβετε τα αποτελέσματα μέσω e-mail ή αυτοπροσώπως όταν επικοινωνήσετε με το εργαστήριο..