Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C

Η ιογενής ηπατίτιδα C είναι μία από τις πιο επικίνδυνες και δύσκολο να διαγνωστεί ασθένειες. Το πρόβλημα είναι ότι συχνά αυτή η ασθένεια ανιχνεύεται μόνο στα μεταγενέστερα στάδια λόγω του γεγονότος ότι η κύρια μορφή της είναι χρόνια και η CHC είναι ασυμπτωματική. Ωστόσο, είναι η έγκαιρη διάγνωση που σας επιτρέπει να επιλέξετε την καταλληλότερη θεραπεία που θα σας βοηθήσει να ξεχάσετε για πάντα τη ιογενή φλεγμονή του ήπατος..

Μία από τις πιο ευέλικτες μεθόδους για τον προσδιορισμό του HCV είναι η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR). Αλλά τι είναι η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C; Ποια είναι τα χαρακτηριστικά αυτής της δοκιμής; Πώς διαφέρει η ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C από ποσοτική; Πώς αποκρυπτογραφείται το αποτέλεσμα της δοκιμής; Μπορείτε να βρείτε απαντήσεις σε κάθε μία από αυτές τις ερωτήσεις στο άρθρο μας..

Διάγνωση του HCV με PCR

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια από τις πιο κοινές και ακριβείς μεθόδους για τη διάγνωση του HCV. Αλλά τι δείχνει ένα τεστ PCR για ηπατίτιδα C; Τα αποτελέσματα των δοκιμών επιτρέπουν τον προσδιορισμό της παρουσίας του φλαβοϊού στο σώμα του ξενιστή, καθώς και τον βαθμό του ιικού φορτίου στο σώμα του..

Ένα δείγμα του φλεβικού αίματος του ασθενούς που λήφθηκε την ημέρα της μελέτης χρησιμοποιείται για την ανάλυση. Συνιστάται η εξέταση PCR για ηπατίτιδα C για τις ακόλουθες κατηγορίες ατόμων:

  • Ασθενείς με ανιχνευμένες ανοσοσφαιρίνες σε αντιγόνα του αιτιολογικού παράγοντα του HCV
  • Για γυναίκες κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης
  • Ιατροί που έρχονται σε συνεχή επαφή με μολυσμένα σωματικά υγρά
  • Ασθενείς με ιστορικό ιογενούς ηπατίτιδας που είχε προηγουμένως θεραπευτεί
  • Ασθενείς με εμφανή συμπτώματα ηπατικής βλάβης

Η δοκιμή PCR για την ηπατίτιδα C μπορεί να είναι ποιοτική ή ποσοτική. Και οι δύο μέθοδοι χρησιμοποιούνται ενεργά στη διάγνωση του HCV. Ας εξετάσουμε λεπτομερέστερα τα χαρακτηριστικά της ποιοτικής και ποσοτικής ανάλυσης PCR για την ηπατίτιδα C.

Ποιοτικές δοκιμές

Πραγματοποιείται ποιοτική αντίδραση εάν η προηγουμένως τεκμηριωμένη διάγνωση HCV απαιτεί επιβεβαίωση. Τα αποτελέσματα των δοκιμών μπορεί να είναι θετικά ή αρνητικά. Μια θετική αντίδραση δείχνει την παρουσία μολυσματικού παράγοντα στο σώμα του ατόμου. Με τη σειρά του, ένα αρνητικό αποτέλεσμα δείχνει είτε την απουσία του παθογόνου, είτε τη ασήμαντη συγκέντρωσή του..

Τι είναι η PCR για ηπατίτιδα (ποιοτικός προσδιορισμός τύπου); Αυτή η δοκιμή βοηθά στον καθορισμό οριστικά της διάγνωσης. Το κόστος εφαρμογής του στη Μόσχα, ανάλογα με την κλινική, κυμαίνεται από 1800 έως 3000 ρούβλια.

Ποσοτική απόκριση

Το αίμα για ποσοτική αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης δίνεται εάν η διάγνωση έχει ήδη τεκμηριωθεί. Η ανάλυση σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε το παθογόνο φορτίο στο σώμα του ασθενούς αυτή τη στιγμή. Έτσι, ο θεράπων ιατρός λαμβάνει πληροφορίες σχετικά με το ποια περιοχή του ήπατος επηρεάζεται από τον φλαβοϊό και μπορεί να επιλέξει το θεραπευτικό σχήμα που απαιτείται σε μια συγκεκριμένη περίπτωση..

Όσο υψηλότερες είναι οι παράμετροι του παθογόνου στο αίμα του ασθενούς, τόσο πιο σοβαρό θα πρέπει να αντιμετωπιστεί το στάδιο της νόσου. Το κόστος μιας ποσοτικής αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης στις κλινικές της Μόσχας κυμαίνεται από 1.800 έως 4.000 ρούβλια, ανάλογα με την επιλογή ενός ιατρικού κέντρου.

Προετοιμασία για το τεστ PCR για την ηπατίτιδα C

Λοιπόν, η απάντηση στην ερώτηση "Τι είναι η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C;" βρέθηκαν. Αλλά πώς προετοιμάζεστε για την επικείμενη διάγνωση; Όταν ετοιμάζεται να δωρίσει δείγμα αίματος για εξέταση PCR ηπατίτιδας C, ο ασθενής πρέπει:

  • Λίγες μέρες πριν φτάσετε στο εργαστήριο, εγκαταλείψτε εντελώς το γρήγορο φαγητό και άλλα βαριά και λιπαρά τρόφιμα
  • Εντός 24 ωρών προτού λάβετε τη δοκιμή PCR για ηπατίτιδα C, μην πίνετε αλκοόλ και αποφύγετε το κάπνισμα
  • Μην τρώτε για 8 ώρες πριν από τη διάγνωση
  • Για τη δική σας ασφάλεια, πριν τοποθετήσετε μια βελόνα ένεσης σε μια φλέβα, βεβαιωθείτε ότι ο ιατρός χρησιμοποιεί μόνο μια αποστειρωμένη σύριγγα μιας χρήσης

Λαμβάνεται πολύ λίγο αίμα για την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Επομένως, μετά τη διαδικασία, ο ασθενής δεν χρειάζεται αποκατάσταση. Επομένως, αμέσως μετά τη διαδικασία, ο ασθενής πηγαίνει σπίτι. Τα διαγνωστικά πραγματοποιούνται το πρωί.

Ανάλυση αποκωδικοποίησης PCR

Η αποκωδικοποίηση του τεστ PCR για ηπατίτιδα C πραγματοποιείται σε ιατρικό εργαστήριο. Το σφάλμα στα τελικά αποτελέσματα εξαρτάται από την ικανότητα των εργαζομένων στον τομέα της υγείας, καθώς και από τον τρόπο με τον οποίο το άτομο ακολούθησε τους κανόνες προετοιμασίας για τις δοκιμές..

Στην περίπτωση ποιοτικής ανάλυσης PCR για ηπατίτιδα C, είναι σημαντικό να ληφθεί υπόψη το όριο ευαισθησίας των αντιδραστηρίων, το οποίο κυμαίνεται εντός 10-500 IU / ml. Μια καλής ποιότητας αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης μπορεί να έχει μόνο 2 αποτελέσματα:

  • Θετικός. Η διάγνωση της ιογενούς ηπατίτιδας C επιβεβαιώνεται από την ανίχνευση του φλαβοϊού στο αίμα του ασθενούς. Η συγκέντρωση του παθογόνου στο πλάσμα του αίματος είναι αρκετή για τη διάγνωση. Εάν η διάγνωση πραγματοποιήθηκε μετά τη θεραπεία, ένα τέτοιο αποτέλεσμα δείχνει την αναποτελεσματικότητα της θεραπείας..
  • Αρνητικός. Το παθογόνο απουσιάζει ή η συγκέντρωσή του στο αίμα είναι εξαιρετικά χαμηλή. Ένα τέτοιο αποτέλεσμα δεν δείχνει πάντα την απουσία μόλυνσης. Συνιστάται στο υποκείμενο να περάσει πρόσθετες δοκιμές ευαισθησίας στα αντιδραστήρια.

Για να μάθετε τι δείχνει η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C σε ποσοτικούς ελέγχους, πρέπει να ξεκινήσετε από τον μεσαίο δείκτη ίσο με 8x10 ^ 5 IU / ml (800.000 IU / ml).

Εάν το επίπεδο του παθογόνου φορτίου είναι χαμηλότερο ή ίσο με το μέσο όρο, ο ασθενής συνταγογραφείται φαρμακευτική θεραπεία βάσει φαρμάκων άμεσης αντιικής δράσης Εάν ο αριθμός είναι πάνω από 800.000 μονάδες, ο θεράπων ιατρός θα πρέπει να σκεφτεί πιο σοβαρά μέτρα για την καταπολέμηση του HCV. Ο ασθενής μπορεί να χρειαστεί μεταμόσχευση ήπατος.

Ο προσδιορισμός της ιογενούς ηπατίτιδας C από PCR πραγματοποιείται σε πολλά ιατρικά ιδρύματα της πρωτεύουσας. Ταυτόχρονα, οι δοκιμές μπορούν να γίνουν τόσο σε εσωτερικούς όσο και σε εξωτερικούς ασθενείς..

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C: πού και πώς να περάσει σωστά, πράγμα που σημαίνει θετικό και αρνητικό αποτέλεσμα

Η PCR για την ηπατίτιδα C είναι μια υποχρεωτική ανάλυση κατά την εξέταση ενός ασθενούς με συμπτώματα ηπατικής βλάβης. Η μελέτη συνταγογραφείται για να επιβεβαιώσει τη διάγνωση και να λάβει τις πληρέστερες πληροφορίες σχετικά με τον αιτιολογικό παράγοντα της νόσου, τη δραστηριότητα της ιογενούς λοίμωξης. Τα αποτελέσματα χρησιμεύουν ως βάση για τη συνταγογράφηση αντιιικής θεραπείας, τον προσδιορισμό της διάρκειας και την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητάς της..

Τα διαγνωστικά που χρησιμοποιούν την τεχνική αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης έχουν διαδεδοθεί σχετικά πρόσφατα. Έρευνα σχετικά με αυτό το θέμα έχει διεξαχθεί από τα μέσα της δεκαετίας του 1970. Αλλά οι πρώτες δημοσιεύσεις σχετικά με τη δυνατότητα χρήσης PCR στην πρακτική ιατρική εμφανίστηκαν μόνο στα μέσα της δεκαετίας του 1980..

  • Τύποι PCR
  • Ενδείξεις για τη δοκιμή
  • Πού να πάρετε?
  • Κανόνες αιμοδοσίας
  • Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων
  • Πλεονεκτήματα της διάγνωσης PCR
  • Το κόστος

Όταν εξηγούν τι είναι η PCR, οι γιατροί τονίζουν ότι αυτή είναι η πιο αξιόπιστη και αξιόπιστη ανάλυση για την ηπατίτιδα C. Αυτή η δοκιμή επιτρέπει όχι μόνο τον εντοπισμό των σωματιδίων RNA του ιού, αλλά και τη διαπίστωση της συγκέντρωσής του (υποδεικνύει τη δραστηριότητα της μολυσματικής διαδικασίας) και τον γονότυπο. Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται παίζουν βασικό ρόλο στον προσδιορισμό της τακτικής και του σχήματος της περαιτέρω θεραπείας..

Ποια είναι η ουσία της οργάνωσης μιας αντίδρασης; Με τη βοήθεια ορισμένων βιολογικά ενεργών ουσιών, επιτυγχάνεται αύξηση του αριθμού των σωματιδίων RNA του ιού σε μικρό όγκο αίματος. Στη συνέχεια, μέρη του γονιδιώματος προσδιορίζονται με διάφορες φυσικοχημικές μεθόδους.

Η PCR εκτελείται χρησιμοποιώντας διάφορα στοιχεία:

  • Αλφαβητάρι. Αυτή είναι μια τεχνητά συντεθειμένη ένωση στην οποία η νουκλεοτιδική αλληλουχία είναι απολύτως πανομοιότυπη με μια συγκεκριμένη περιοχή του RNA του ιού, η οποία δεν υφίσταται μεταλλάξεις και αλλαγές ανάλογα με τον γονότυπο. Ο προσδιορισμός του RNA του ιού της ηπατίτιδας C πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας ένα αυστηρά ειδικό αστάρι.
  • RNA πολυμεράση. Ένα ένζυμο που χαρακτηρίζεται από σταθερότητα και δομική σταθερότητα στο πλαίσιο των θερμοκρασιών που απαιτούνται για τη σωστή πορεία μιας χημικής αντίδρασης. Παρέχει την κατασκευή μιας αλυσίδας RNA σε ένα από τα στάδια PCR.
  • Πρωτεϊνικό μείγμα. Για την κατασκευή επιπλέον τμημάτων του RNA, απαιτείται "δομικό υλικό", για το οποίο ορισμένες ενώσεις της πρωτεϊνικής δομής προστίθενται στο βιολογικό δείγμα.
  • Ρυθμιστής. Μείγμα που διατηρεί το βέλτιστο επίπεδο pH για την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.
  • Ένα δείγμα βιολογικού υλικού που είναι ύποπτο ότι περιέχει δείγμα RNA HCV (ιός της ηπατίτιδας C).

Σε ορισμένες μεθόδους σταδιοποίησης PCR, χρησιμοποιούνται επιπλέον ανιχνευτές RNA και άλλοι εσωτερικοί έλεγχοι, οι οποίοι χρησιμοποιούνται ως δείγματα ελέγχου κατά τον προσδιορισμό των αποτελεσμάτων.

Η ίδια η διαδικασία αύξησης περιοχών του ιικού RNA χρησιμοποιώντας μια μήτρα ονομάζεται ενίσχυση. Η αντίδραση προχωρά σε διάφορα στάδια:

  1. Μετουσίωση. Η διαδικασία "ξετύλιξης" κλώνων RNA παρέχεται αυξάνοντας τη θερμοκρασία σε ένα ορισμένο επίπεδο.
  2. Ανόπτηση. Μετά τη μείωση της θερμοκρασίας στις απαιτούμενες τιμές, τα αστάρια προσκολλώνται στο RNA. Αυτό το στάδιο είναι δυνατό μόνο εάν τα επιθυμητά ιικά σωματίδια υπάρχουν στο δείγμα αίματος..
  3. Άμεση σύνθεση ιικών περιοχών RNA με τη συμμετοχή ενζύμων.

Οι αναφερόμενοι κύκλοι της σταδιοποίησης PCR επαναλαμβάνονται αρκετές δεκάδες φορές, γεγονός που παρέχει πολλαπλή αύξηση στον αριθμό των περιοχών RNA του παθογόνου ηπατίτιδας C του επιπέδου που καθορίζεται από εργαστηριακές μεθόδους.

Το δείγμα αίματος προετοιμάζεται κατάλληλα πριν από τη δοκιμή. Το περιέχον RNA προσροφάται σε ένα ρυθμιστικό φορέα, στη συνέχεια εκπλένεται και χρησιμοποιείται για την έναρξη της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης.

Τα αποτελέσματα ανιχνεύονται είτε με ηλεκτροφόρηση (οριζόντια ή κάθετη) είτε με υβριδισμό. Η μέθοδος για την αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων της αντίδρασης επιλέγεται με βάση τους στόχους της μελέτης (απλά προσδιορισμός του RNA ή προσδιορισμός της κατά προσέγγιση ποσού του).

PCR - η πιο ακριβής εξέταση αίματος για ηπατίτιδα C

Ο κατάλογος των προτεινόμενων μελετών για το HCV περιλαμβάνει διάφορα στοιχεία που διαφέρουν ως προς το κόστος, τον χρόνο ετοιμότητας και τη μέθοδο υλοποίησης..

Εάν αναφερόμαστε στα πρωτόκολλα του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (ΠΟΥ), η διαδικασία διάγνωσης μιας λοίμωξης περιλαμβάνει διάφορα διαδοχικά στάδια..

Αρχικά, ενοικιάστε:

  • γενική ανάλυση αίματος και ούρων
  • βιοχημεία αίματος
  • έρευνα για την περιεκτικότητα σε γλυκόζη (αυστηρά με άδειο στομάχι) ·
  • Δοκιμή HIV;
  • φθοριογραφία
  • ανοσογράφημα (εάν υποψιάζεστε την παρουσία αυτοάνοσων παθολογιών).

Εάν οι παράμετροι της βιοχημικής εξέτασης αίματος αποκλίνουν από τον φυσιολογικό κανόνα, ο ασθενής συνταγογραφείται μια δοκιμή με βάση την ανίχνευση συγκεκριμένων αντισωμάτων που παράγονται από την επαφή του ιού με το αίμα (ELISA).

Αλλά μια τέτοια εξέταση αίματος για ηπατίτιδα C έχει ένα σημαντικό μειονέκτημα. Η διαδικασία της σύνθεσης αντισωμάτων εξαρτάται από τη λειτουργία και την παραγωγή ανοσοϊκανών κυττάρων. Τα ατομικά χαρακτηριστικά του σώματος μπορούν να προκαλέσουν ψευδώς αρνητική και ψευδώς θετική απόκριση..

Πριν συνταγογραφήσει μια δοκιμή ELISA, ο γιατρός λέει στον ασθενή για ένα πιθανό σφάλμα, το οποίο θέτει μια ερώτηση απάντησης: "Ποια εξέταση αίματος δείχνει την ηπατίτιδα C με ελάχιστο κίνδυνο να πάρει λανθασμένα αποτελέσματα;" Για να επιβεβαιώσετε ή να αντικρούσετε τη διάγνωση, η πιο ακριβής εργαστηριακή δοκιμή είναι PCR σε πραγματικό χρόνο.

Περαιτέρω τακτικές δράσης εξαρτώνται από αυτό που δείχνει η έρευνα. Εάν επιβεβαιωθεί η διάγνωση, ο ασθενής συνταγογραφείται αμέσως ηπατοπροστατευτικά, προειδοποιώντας για τη σημασία της σωστής διατροφής και ενός υγιεινού τρόπου ζωής. Αλλά η στοχευμένη θεραπεία είναι αδύνατη χωρίς να προσδιοριστεί το επίπεδο του ιικού φορτίου και του γονότυπου της ηπατίτιδας C..

Ορισμένα φάρμακα μπορούν να προκαλέσουν επιδείνωση της ηπατίτιδας Β. Επομένως, προκειμένου να αποκλειστούν επιπλοκές, συνταγογραφούνται επιπλέον δοκιμές για HBsAg. Ο HCV αντιμετωπίζεται μόνο μετά από αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής.

Είδος: Ποιοτικός, Ποσοτικός και Γονοτυπικός

Στην αρχική διάγνωση της ηπατίτιδας C, ο τίτλος των αντισωμάτων που παράγονται προσδιορίζεται με την ορολογική μέθοδο. Αυτό το αποτέλεσμα δείχνει περίπου τη δραστηριότητα της παθολογικής διαδικασίας. Ωστόσο, ο γιατρός μπορεί να λάβει τις πιο ακριβείς πληροφορίες μόνο αφού μελετήσει τα δεδομένα PCR.

Επί του παρόντος, σε σχεδόν όλα τα εργαστήρια, η ανάλυση πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας μια υπερευαίσθητη μέθοδο. Έτσι, η διάγνωση του HCV είναι δυνατή εντός 10-14 ημερών μετά τη μόλυνση, λιγότερο συχνά - μετά από 2,5-3 εβδομάδες. Ανάλογα με τους επιδιωκόμενους στόχους κατά τη διάρκεια της μελέτης, ο γιατρός συνταγογραφεί έναν συγκεκριμένο τύπο εξέτασης.

Υπάρχουν οι ακόλουθοι τύποι PCR:

  1. Ποιοτικός. Όταν συνταγογραφούν διαγνωστικές εξετάσεις, οι ασθενείς έχουν το ερώτημα τι δείχνει αυτή η ερευνητική μέθοδος. Η ποιοτική ανάλυση με τη μέθοδο PCR είναι μια εξαιρετικά ευαίσθητη δοκιμή που καθορίζει την παρουσία RNA ιού στο αίμα σε μια ελάχιστη συγκέντρωση. Συνήθως, αυτό το είδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας τεχνολογία αντίστροφης μεταγραφής. Αυτή είναι μία από τις λίγες μεθόδους PCR στις οποίες το RNA μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως στόχος.
  2. Ποσοτικός. Η ποσοτικοποίηση της ηπατίτιδας C σας επιτρέπει να προσδιορίσετε το ακριβές επίπεδο του HCV RNA στο αίμα σας. Η έρευνα είναι δυνατή με έναν μόνο τρόπο - τη μέθοδο σε πραγματικό χρόνο. Κατά τη διάρκεια της προετοιμασίας του υλικού για PCR, προστίθεται μια χρωστική στο δείγμα. Μετά από κάθε κύκλο ενίσχυσης, πραγματοποιείται μια αυτοματοποιημένη ποσοτική μελέτη σε πραγματικό χρόνο. Η τεχνική πραγματοποιείται συχνά σε συνδυασμό με αντίστροφη μεταγραφή. Έτσι, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί ποιοτικά ο μικρός αριθμός αντιγράφων RNA του ιού. Είναι λογικό να καθοριστεί ποσοτικά το επίπεδο του HCV RNA εάν επιτευχθεί ένα θετικό αποτέλεσμα ποιοτικής PCR..
  3. Γονότυπος. Η ανάλυση πραγματοποιείται στο τελικό στάδιο της διαγνωστικής διαδικασίας. Η αρχή της μελέτης βασίζεται στη διαφορά στην αλληλουχία νουκλεοτιδίων, η οποία διακρίνει έναν γονότυπο του ιού της ηπατίτιδας C από τον άλλο. Συνήθως η ανάλυση γίνεται με PCR πολλαπλών εκκινητών (multiplex).

Εάν υποψιάζεστε ότι υπάρχει φορέας του ιού, είναι απαραίτητο να εκτελέσετε PCR υψηλής ποιότητας. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, το άτομο είναι πιθανότατα υγιές. Αλλά για να αποκλειστεί εντελώς η μόλυνση, συνιστάται να επαναλάβετε τη μελέτη μετά από 7-10 ημέρες. Εάν ανιχνευτεί το RNA του ιού, διεξάγονται περαιτέρω δοκιμές (ποσοτικοί και γονότυποι).

Ενδείξεις για εργαστηριακή δοκιμή

Η κύρια ένδειξη δωρεάς αίματος για ηπατίτιδα C με τη μέθοδο αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης είναι ένας θετικός ενζυμικός ανοσοπροσδιορισμός (ανεξάρτητα από τον τύπο: Σύνολο, διαφοροποιημένη δοκιμή για IgG και IgM).

Επιπλέον, πρέπει να ελέγξετε:

  • κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης (η δοκιμή γίνεται δύο φορές - κατά το πρώτο τρίμηνο και 7-10 εβδομάδες πριν από τη γέννηση).
  • όταν εργάζεστε με αυξημένο κίνδυνο μόλυνσης (νοσοκόμες, βοηθοί εργαστηρίου, υπάλληλοι κέντρων δωρητών, κοσμετολόγοι κ.λπ.).
  • με αδιάκριτη σεξουαλική επαφή και απροστάτευτη επαφή με άγνωστο άτομο ·
  • στο πλαίσιο του HIV, του καρκίνου, της λήψης ορισμένων φαρμάκων κ.λπ.
  • ασθενείς εθισμένοι σε ενδοφλέβια φάρμακα.
  • με τη συνεχή διεξαγωγή επεμβατικών διαγνωστικών ή θεραπευτικών διαδικασιών ·
  • με μετάγγιση αίματος που πραγματοποιήθηκε πριν από το 1992 (προηγουμένως δεν υπήρχαν αξιόπιστοι τρόποι ελέγχου βιολογικού υλικού δότη για την παρουσία ιού).
  • όταν μια ανοιχτή πληγή έρχεται σε επαφή με αίμα κάποιου άλλου, αποστειρωμένα ιατρικά εργαλεία.

Η επίπτωση αυξάνεται κάθε χρόνο. Ως εκ τούτου, για την έγκαιρη ανίχνευση λοίμωξης, συνιστώνται εργαστηριακές εξετάσεις για HCV μία φορά το χρόνο..

Πού να δοκιμάσετε

Όταν επικοινωνεί με την κλινική, ο ασθενής δικαιούται δωρεάν εξετάσεις. Πρώτα όμως κάνουν μια δοκιμή ELISA. Και μόνο με θετικό ή αμφίβολο αποτέλεσμα, εμφανίζεται μια μελέτη PCR. Επομένως, μια επείγουσα διάγνωση μπορεί να γίνει επικοινωνώντας με ένα πληρωμένο εργαστήριο, όπου μπορείτε να δωρίσετε αίμα για PCR σε μια κατάλληλη στιγμή για τον ασθενή. Ταυτόχρονα, συνιστάται να ελέγχετε αμέσως τους δείκτες των ηπατικών ενζύμων, τις τυπικές κλινικές παραμέτρους του αίματος.

Κατά κανόνα, η μελέτη του αίματος με PCR είναι διαθέσιμη σε σχεδόν οποιοδήποτε εργαστήριο. Εάν το σημείο συλλογής αίματος δεν είναι εξοπλισμένο με τον κατάλληλο εξοπλισμό, το βιολογικό υλικό μεταφέρεται για τη μελέτη σύμφωνα με το καθεστώς θερμοκρασίας και άλλες συνθήκες. Η PCR σε πολυκλινική είναι δυνατή μόνο μετά από άλλες εξετάσεις, τα αποτελέσματα των οποίων δείχνουν έμμεσα την παρουσία ηπατίτιδας C.

Πώς να δωρίσετε σωστά αίμα

Πριν δωρίσετε αίμα για την ανίχνευση ενός πιθανού ιού, θα πρέπει να ακολουθήσετε έναν αριθμό κανόνων για την προετοιμασία της ανάλυσης..

Οι κύριες πτυχές αναφέρονται στο σημείωμα:

  1. Για 5-7 ημέρες, σταματήστε την κατανάλωση λιπαρών, τηγανισμένων τροφίμων, αλκοόλ. Σε γενικές γραμμές, οι γιατροί συστήνουν να τηρούν τους διατροφικούς κανόνες για τη δίαιτα αριθμός 5.
  2. Μην τρώτε 12-14 ώρες πριν από τη μελέτη. Μπορείτε να πιείτε μόνο νερό.
  3. Είναι καλύτερο να δωρίσετε αίμα το πρωί..
  4. Μην καπνίζετε πριν από τη διαδικασία.

Θα πρέπει επίσης να προειδοποιήσετε τον γιατρό σχετικά με τα φάρμακα που λαμβάνονται, τα πιθανά προβλήματα υγείας, τις χρόνιες ασθένειες..

Το αίμα προέρχεται από μια φλέβα. Μετά το πέρας της διαδικασίας, η νοσοκόμα σφραγίζει το σημείο παρακέντησης με αποστειρωμένο γύψο, προειδοποιεί για την ανάγκη κάμψης του βραχίονα και κράτημα σε αυτήν τη θέση για 10-15 λεπτά. Διαφορετικά, η πιθανότητα επώδυνου αιματώματος είναι υψηλή..

Πόσο διαρκεί η έρευνα;?

Η ανάλυση που πραγματοποιείται εξαρτάται από το εργαστήριο. Ο μέσος χρόνος παράδοσης κυμαίνεται από 1-3 ημέρες. Ορισμένες κλινικές παρέχουν υπηρεσία επί πληρωμή για ταχεία δοκιμή PCR, ωστόσο, ο χρόνος περιορίζεται από τις δυνατότητες του ιατρικού εξοπλισμού..

Στην πολυκλινική, τα αποτελέσματα μπορούν να μεταδοθούν στον γιατρό εντός 7-10 ημερών. Αυτό σχετίζεται με μεγάλη εισροή ασθενών. Ταυτόχρονα, το βιολογικό υλικό αποθηκεύεται σύμφωνα με όλες τις απαιτήσεις.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων

Κατά κανόνα, η αποκωδικοποίηση PCR υψηλής ποιότητας δεν είναι δύσκολη. Αλλά για να αποφύγετε την παρερμηνεία, θα πρέπει να συμβουλευτείτε έναν γιατρό με τη φόρμα που λάβατε από το εργαστήριο. Οι επιλογές, που σημαίνει αυτό ή αυτόν τον τύπο PCR, εμφανίζονται στον πίνακα.

Αρνητικό: το άτομο είναι υγιές ή η συγκέντρωση του ιικού RNA στο αίμα είναι πολύ χαμηλή για ανίχνευση.

Θετικό: το άτομο έχει μολυνθεί

Διεξάγεται εάν το ιό RNA ανιχνεύεται με ποιοτική ερευνητική μέθοδο.

Ανάλογα με τα αποτελέσματα των δοκιμών που λαμβάνονται, προσδιορίζεται το επίπεδο του ιικού φορτίου

Διεξήχθη με ηπατίτιδα C, επιβεβαιωμένη με άλλες ερευνητικές μεθόδους.

Η ανάλυση σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε τον ακριβή γονότυπο του παθογόνου της παθολογίας

Αλλά συχνά προκύπτει μια κατάσταση όταν η ELISA για ηπατίτιδα C είναι θετική και η PCR είναι αρνητική. Μόνο ένας γιατρός μπορεί να αποκρυπτογραφήσει τέτοια αποτελέσματα των εξετάσεων..

Ωστόσο, τέτοια δεδομένα είναι δυνατά στις ακόλουθες περιπτώσεις:

  • εγκυμοσύνη;
  • μεταφέρεται σε οξεία μορφή ηπατίτιδας C ·
  • Η θεραπεία HCV ολοκληρώθηκε.
  • την παρουσία λοιμώξεων που αυξάνουν την πιθανότητα ψευδώς θετικού αποτελέσματος ELISA.

Μόνο η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης δείχνει την ακριβή παρουσία ιογενούς λοίμωξης στο σώμα. Στο πλαίσιο της αρνητικής PCR, ένα θετικό ELISA στις περισσότερες περιπτώσεις δείχνει ότι το άτομο δεν έχει μολυνθεί. Αλλά ο γιατρός πρέπει να καθορίσει την ακριβή αιτία του ψευδώς θετικού αποτελέσματος..

Ποιοτική ανάλυση

Μια ποιοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C επιβεβαιώνει την παρουσία του παθογόνου στο αίμα. Εάν το RNA του ιού δεν ανιχνευθεί, το άτομο είναι υγιές. Ωστόσο, εάν υπάρχει υποψία μόλυνσης, συνιστάται να υποβληθείτε ξανά στη μελέτη. Ένα θετικό αποτέλεσμα δείχνει λοίμωξη. Αλλά αυτή η ανάλυση δεν επιτρέπει τη διαφοροποίηση της χρόνιας ηπατίτιδας C από την οξεία και δεν μπορεί να δείξει πόσο ενεργή είναι η παθολογική διαδικασία..

Ποσοτική δοκιμή

Η ποσοτική ανάλυση με PCR πραγματοποιείται μετά την επιβεβαίωση της διάγνωσης και η αποκωδικοποίησή της είναι σημαντική για τον προσδιορισμό της τακτικής θεραπείας. Ανάλογα με τη συγκέντρωση των σωματιδίων του αιτιολογικού παράγοντα της ηπατίτιδας C, διακρίνονται διάφοροι βαθμοί ιού φορτίου: μεσαίο, υψηλό και χαμηλό. Όσο υψηλότερος είναι ο δείκτης, τόσο πιο σοβαρή είναι η λοίμωξη και τόσο πιο δύσκολη είναι η θεραπεία. Κανονικά, το ιικό RNA απουσιάζει στο αίμα.

Γονότυπος

Πολλά εργαστήρια εκτελούν γονότυπους σε συνδυασμό με ποσοτική PCR, η οποία εξοικονομεί χρήματα. Μια τέτοια μελέτη γίνεται μόνο μία φορά, πριν από την έναρξη της θεραπείας. Συνήθως, η ανάλυση πραγματοποιείται για έναν από τους τέσσερις πιο συνηθισμένους γονότυπους (1, 2, 3 ή 4). Ο υποτύπος HCV προσδιορίζεται ταυτόχρονα. Δεν είναι δυνατός ο γονότυπος για τα υποείδη 5 και 6 της ηπατίτιδας C σε κάθε εργαστήριο.

Πλεονεκτήματα της διάγνωσης PCR

Τα διαγνωστικά με μέθοδο PCR είναι ευρέως διαδεδομένα λόγω:

  • υψηλή ακρίβεια (υπό την προϋπόθεση ότι χρησιμοποιούνται τα συστήματα δοκιμής τελευταίας γενιάς) ·
  • ευκολία δειγματοληψίας βιοϋλικών
  • γρήγορα αποτελέσματα (έως 5 ημέρες).

Αλλά το κύριο πλεονέκτημα έγκειται στις ευρείες διαγνωστικές δυνατότητες της μελέτης. Η ανάλυση επιτρέπει όχι μόνο τον εντοπισμό του ιού, αλλά και τον ακριβή προσδιορισμό της συγκέντρωσής του στο σώμα και τον προσδιορισμό του γονότυπου της λοίμωξης. Επιπλέον, απαιτείται ποσοτική έρευνα για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της αντιιικής θεραπείας. Ο κύριος στόχος της θεραπείας είναι να επιτευχθεί ο ρυθμός δοκιμής (δηλαδή, μη ανιχνεύσιμο επίπεδο HCV RNA) στις 4, 12 ή 24 εβδομάδες της αντιιικής πορείας και να διατηρηθεί αυτό το αποτέλεσμα.

Το κόστος

Το κόστος της ανάλυσης PCR ποικίλλει ανά περιοχή. Έτσι, στη Μόσχα οι τιμές είναι υψηλότερες. Η PCR υψηλής ποιότητας θα κοστίσει 600-800 ρούβλια, ποσοτικά - 2200-3000 ρούβλια, γονοτυπία - από 1000 ρούβλια. Μπορείτε να μάθετε ακριβώς πόσο κοστίζει μια συγκεκριμένη μελέτη απευθείας στο εργαστήριο, στον ιστότοπο ενός ιατρικού οργανισμού ή μέσω τηλεφώνου.

Ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C: αποκωδικοποίηση

Η αιτία της ανάπτυξης της ιογενούς ηπατίτιδας C είναι η μόλυνση από ένα παθογόνο που ανήκει στην οικογένεια Flaviviridae. Υπάρχει ένα μεγάλο χρονικό διάστημα μεταξύ της μόλυνσης και της έναρξης της παραγωγής αντισωμάτων, το οποίο δεν επιτρέπει την έγκαιρη διάγνωση της νόσου μέσω ενός ενζύμου ανοσοδοκιμασίας.

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C, βιοχημεία, CBC, ήπατος πραγματοποιείται εάν υπάρχει υποψία μόλυνσης. Με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, ο ιός μπορεί να ανιχνευθεί στο αίμα ακόμη και κατά την πρώτη εβδομάδα μόλυνσης, το οποίο είναι το κυρίαρχο πλεονέκτημα της μεθόδου.

Ποσοτική και ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C και χαρακτηριστικά της μελέτης, πώς να προετοιμαστεί, εάν υπάρχουν σφάλματα, αποκωδικοποίηση - θα εξετάσουμε λεπτομερώς.

Ποια είναι η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης?

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια τεχνική μοριακής έρευνας για τον προσδιορισμό του γενετικού υλικού ενός ιικού παράγοντα από τις πρώτες ημέρες της μόλυνσης. Η ανάλυση χαρακτηρίζεται από υψηλό βαθμό αξιοπιστίας, ειδικότητας και ακρίβειας. Χάρη σε αυτόν, εντοπίζεται όχι μόνο η απουσία / παρουσία του ιού, αλλά και το ιικό φορτίο (ποσοτική τιμή), ο γονότυπος.

Για τη μελέτη, απαιτείται το αίμα του ασθενούς, όπου πιθανώς βρίσκεται το RNA μιας ιογενούς λοίμωξης. Υπό εργαστηριακές συνθήκες, προστίθενται αστάρια στο βιολογικό υγρό - αυτά είναι τεχνητά συντεθειμένα θραύσματα του επιθυμητού γονιδίου μικρού μήκους. Plus RNA πολυμεράση - ένα εξειδικευμένο ένζυμο που πολλαπλασιάζει τη συγκέντρωση του επιθυμητού υλικού.

Περαιτέρω, το αίμα με την προσθήκη συστατικών θερμαίνεται και ψύχεται αρκετές φορές σε μια ειδική συσκευή. Μετά από αυτό έρχεται η ανάλυση των ληφθέντων αποτελεσμάτων, σύγκριση με τα γνωστά γονίδια του ιικού παράγοντα. Με βάση αυτό, γίνεται ένα συμπέρασμα σχετικά με την ασθένεια.

Ποικιλίες έρευνας PCR

Η ανάλυση για PCR ηπατίτιδας C πραγματοποιείται στο εργαστήριο με την προσθήκη των απαραίτητων αντιδραστηρίων, έχει τρεις ποικιλίες με διακριτικά χαρακτηριστικά:

  1. Η ποιοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C είναι το πρώτο στάδιο της μελέτης. Μέσω αυτού, ανιχνεύεται το γενετικό υλικό του παθογόνου στον ορό του αίματος.
  2. Μια ποσοτική μελέτη σας επιτρέπει να εκτιμήσετε το ιικό φορτίο - αυτό είναι το περιεχόμενο του ιικού υλικού σε 1 ml αίματος ενός ασθενούς. Πραγματοποιείται πριν από την έναρξη της θεραπείας και μετά από 1-4-12 εβδομάδες θεραπείας. Όταν το μάθημα είναι μακρύ, η μελέτη πρέπει να πραγματοποιηθεί μετά από 24 εβδομάδες θεραπείας για να εκτιμηθεί η αποτελεσματικότητα.
  3. Γονότυπος. Μια μολυσματική ασθένεια αναπτύσσεται γρήγορα, ο ιός τείνει να μεταλλάσσεται. Επομένως, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί ο γονότυπος του ιού.

Οι επιστήμονες έχουν εντοπίσει 7 γονότυπους του ιού. Στη Ρωσική Ομοσπονδία, 1-2-3 είδη είναι πολύ κοινά.

Κάθε ένας από τους γονότυπους χαρακτηρίζεται από αντοχή στη θεραπεία.

Για παράδειγμα, με τον τύπο 1, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας είναι περίπου 60%, με φόντο 2-3 τύπους, ο δείκτης φτάνει το 85%.

Για να επιλέξετε τα σωστά φάρμακα, τη διάρκεια της θεραπείας, απαιτείται να προσδιορίσετε όχι μόνο το γεγονός της μόλυνσης, αλλά και τη συγκέντρωση του ιού, τον γονότυπο του.

Ενδείξεις για

Δείκτες για ηπατίτιδα, PCR και ELISA, άλλες δοκιμές έχουν ορισμένες ιατρικές ενδείξεις:

  • Όταν ένας ασθενής έχει ιστορικό λοίμωξης από HIV, το AIDS.
  • Επαφή με μολυσμένο άτομο, καθώς η ιογενής ηπατίτιδα είναι πολύ μεταδοτική.
  • Συμπτώματα κίρρωσης του ήπατος - ηπατομεγαλία, αύξηση του μεγέθους του σπλήνα, φλεβικό μοτίβο εμφανίστηκε στην κοιλιά κ.λπ..
  • Κλινική λειτουργικών ηπατικών διαταραχών - περιοδικός / επίμονος πόνος στο δεξιό υποχόνδριο, κιτρίνισμα του δέρματος, ναυτία.
  • Υψηλές τιμές AST και ALT στη βιοχημεία του αίματος.
  • Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, όταν οι δοκιμασίες ηπατικής λειτουργίας είναι κακές.
  • Πριν ξεκινήσετε ένα πρόγραμμα προστασίας από ιούς για τον προσδιορισμό του ιικού φορτίου.
  • Για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.
  • Μετά τη θεραπεία για την πρόληψη της επανεμφάνισης ιογενών λοιμώξεων.

Η PCR πραγματοποιείται με επιβεβαιωμένη διάγνωση ηπατίτιδας Β για τον αποκλεισμό μικτού τύπου ηπατικής βλάβης.

Προετοιμασία για έρευνα και δειγματοληψία

Πώς θα προετοιμαστεί για την ανάλυση, θα πει ο γιατρός. Συνιστάται προετοιμασία στον ασθενή για να λάβει ένα ακριβές αποτέλεσμα. Αποτελείται από τις ακόλουθες συστάσεις:

  1. Η ανάλυση πρέπει να γίνεται το πρωί, με άδειο στομάχι. Επιτρέπεται να πίνει μόνο καθαρό, μη ανθρακούχο νερό πριν από τη λήψη αίματος. Τελευταίο γεύμα - 8 ώρες πριν από τη συλλογή.
  2. Εάν δεν μπορείτε να κάνετε τη δοκιμή το πρωί, μπορείτε να το κάνετε το βράδυ ή το μεσημέρι, το πιο σημαντικό - 5-6 ώρες μετά το φαγητό, όχι νωρίτερα.
  3. Σταματήστε αλκοολούχα ποτά, ποτά με καφεΐνη, χυμούς 48 ώρες πριν από τη μελέτη.
  4. Για 2 ημέρες πρέπει να ακολουθήσετε μια δίαιτα, εξαιρουμένων όλων των επιβλαβών προϊόντων. Ωστόσο, ορισμένοι γιατροί πιστεύουν ότι τα λιπαρά, τηγανητά τρόφιμα δεν επηρεάζουν την ακρίβεια του τεστ PCR..

Μην πάρετε φάρμακα για 24 ώρες πριν από τον ιατρικό χειρισμό. Εάν αυτό δεν είναι δυνατό, ενημερώστε το γιατρό σας. Η ανάλυση δεν συνιστάται να πραγματοποιείται αμέσως μετά από υπερηχογράφημα, CT, μασάζ και άλλες διαδικασίες φυσικοθεραπείας.

Η δειγματοληψία αίματος πραγματοποιείται ως εξής:

  • Μέσω μιας ειδικής αιχμής που σφίγγεται στο αντιβράχιο του ασθενούς, ο γιατρός σταματά τη ροή του φλεβικού αίματος. Οι φλέβες γίνονται πιο ορατές, γεγονός που διευκολύνει την εισαγωγή βελόνας και μετά τη λήψη αίματος.
  • Η περιοχή του δέρματος πριν από την εισαγωγή μιας αποστειρωμένης βελόνας υποβάλλεται σε επεξεργασία με υγρό που περιέχει αλκοόλη.
  • Μια βελόνα εισάγεται στη φλέβα, μετά την οποία συνδέεται ένας δοκιμαστικός σωλήνας, μέσα στον οποίο ρέει αίμα.
  • Μετά την εισαγωγή της βελόνας, το τουρνουά αφαιρείται. Συλλέξτε την απαιτούμενη ποσότητα αίματος, αφαιρέστε τη βελόνα.
  • Εφαρμόζεται βαμβάκι που βυθίζεται σε αλκοόλ στο σημείο της ένεσης.

Για να αποφευχθεί ο σχηματισμός μώλωπας στο σημείο ένεσης της βελόνας, είναι απαραίτητο να πιέσετε το βαμβάκι αρκετά σκληρά στην τραυματισμένη περιοχή, λυγίστε το βραχίονα και κρατήστε το σε αυτήν τη θέση για 3-4 λεπτά.

Εάν ο ασθενής παίρνει φάρμακα που αραιώνουν το αίμα (ασπιρίνη, βαρφαρίνη), μπορεί να υπάρχουν ορισμένα προβλήματα με τη διακοπή της αιμορραγίας.

Πλεονεκτήματα της PCR σε σχέση με άλλες δοκιμές

Η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης έχει ορισμένα πλεονεκτήματα έναντι άλλων διαγνωστικών τεχνικών..

Τα πλεονεκτήματα της μελέτης παρουσιάζονται στον πίνακα:

Τύπος μελέτηςΠιθανό αποτέλεσμα και σκοπούμενη μεταγραφή
PCR υψηλής ποιότητας
Ποσοτικός
Γονότυπος
Άμεση διάγνωση του αιτιολογικού παράγοντα της παθολογίαςΆλλες μελέτες μας επιτρέπουν να δώσουμε μια απάντηση - υπάρχει παθογόνο στο σώμα ή όχι. Αλλά χρησιμοποιώντας τεχνικές PCR, μπορείτε να προσδιορίσετε συγκεκριμένα τον τύπο του ιογενούς παράγοντα.
Ειδικότητα μελέτηςΗ PCR ανιχνεύει ένα μοναδικό κομμάτι DNA που ταιριάζει μόνο σε έναν τύπο ιικού παράγοντα. Αυτό ελαχιστοποιεί την πιθανότητα σφάλματος..
Υψηλός βαθμός ευαισθησίαςΕίναι δυνατόν να εντοπιστεί ακόμη και μια μικρή συγκέντρωση του ιού στο αίμα.
Προσδιορισμός όλων των παθογόνωνΚατά τη διάρκεια της έρευνας, όλοι οι παθογόνοι παράγοντες μπορούν να ανιχνευθούν.
Λανθάνουσες λοιμώξειςΕκτός από το ιικό παθογόνο, μπορούν να ανιχνευθούν λοιμώξεις που έχουν λανθάνουσα πορεία, διακρίνονται από υψηλή αντιγονική δράση..

Όταν ένας ασθενής λάβει θετικό αποτέλεσμα, αυτό σημαίνει ότι το γενετικό υλικό του αιτιολογικού παράγοντα της ηπατίτιδας έχει βρεθεί στο βιολογικό υγρό. Αρνητικό σύνολο - χωρίς ίχνη ιού.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων

Ο γιατρός πρέπει να αποκρυπτογραφήσει τα αποτελέσματα με βάση το συμπέρασμα που λαμβάνει ο ασθενής στο εργαστήριο. Είναι απαραίτητο να αναλυθούν τα δεδομένα σε συνδυασμό με δείκτες βιοχημείας, CBC, υπερήχους.

Ποιοτικός

Μια ποιοτική μελέτη θα δείξει την παρουσία ή την απουσία του αιτιολογικού παράγοντα μιας ιογενούς νόσου στο ανθρώπινο αίμα. Μπορεί να υπάρχουν δύο επιλογές - αρνητικό (κανονικό) ή θετικό αποτέλεσμα.

Η φόρμα μερικές φορές λέει: βρέθηκε ή δεν βρέθηκε.

Ένα θετικό αποτέλεσμα - ο βοηθός του εργαστηρίου εντόπισε το γενετικό υλικό του ιικού παράγοντα στο αίμα του ασθενούς, επιβεβαιώθηκε η λοίμωξη. Αρνητικό συμπέρασμα - δεν υπάρχει λοίμωξη, τα θραύσματα RNA του ιού είναι κάτω από τα όρια ευαισθησίας.

Ποσοτικός

Η ποσοτική ανάλυση συνεπάγεται διάφορες επιλογές για τα αποτελέσματα. Για ευκολία, θα τα παρουσιάσουμε σε μορφή πίνακα..

ΑποτέλεσμαΑποκρυπτογράφηση
ΑρνητικόςΑυτός είναι ο κανόνας για ένα υγιές άτομο. Αυτό σημαίνει ότι δεν υπάρχει ιικό RNA ηπατίτιδας στο βιολογικό υλικό που μελετήθηκε ή ότι το περιεχόμενο είναι μικρότερο από τα όρια ευαισθησίας.
Έως 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlΥποδεικνύει ότι το περιεχόμενο RNA είναι μικρότερο από το εύρος ποσοτικοποίησης. Αυτό το αποτέλεσμα πρέπει να ερμηνευθεί προσεκτικά επειδή θεωρείται αμφιλεγόμενο. Επιπλέον, διεξάγονται και άλλες μελέτες για επακόλουθη σύγκριση. Επαναλάβετε επίσης τη δοκιμή PCR.
Έως 8 * 10 ^ 5 IU / mlΧαμηλό ιικό φορτίο. Κατά κανόνα, αυτό το αποτέλεσμα σημαίνει ότι η θεραπεία είναι αποτελεσματική..
Από 8 * 10 ^ 5 IU / mlΥψηλό ιικό φορτίο. Απαιτείται αμέσως θεραπεία (εάν δεν πραγματοποιηθεί) ή απαιτείται διόρθωση της φαρμακευτικής αγωγής.
2,4 * 10 ^ 7 IU / mlΤο RNA είναι μεγαλύτερο από το ανώτατο μέγιστο ποσοτικοποίησης. Στο πλαίσιο ενός τέτοιου αποτελέσματος, το ιικό φορτίο δεν κρίνεται. Απαιτείται δεύτερη μελέτη με αραίωση δείγματος βιολογικού υγρού.

Γονότυπος

Αποτέλεσμα - βρέθηκε ριβονουκλεϊκό οξύ συγκεκριμένου γονότυπου. Επιπλέον, υποδεικνύεται ο γονότυπος και ο υποτύπος, ο βοηθός εργαστηρίου κωδικοποιεί το συμπέρασμα με λατινικά γράμματα και αριθμούς. Για παράδειγμα, ο γονότυπος 1α. Συνολικά, διακρίνονται 7 γονότυποι, 67 υπότυποι.

Αποτέλεσμα - Εντοπίστηκε RNA του ιού της ηπατίτιδας C - αυτό είναι το DNA ενός σπάνιου γονότυπου που δεν μπορεί να αποδοθεί σε κοινούς ιογενείς παράγοντες, επομένως απαιτείται πρόσθετη διάγνωση.

Όταν η PCR είναι αρνητική και η ELISA είναι θετική

Αποφασίζει το συμπέρασμα του εργαστηριακού βοηθού ηπατολόγου ή ειδικού για τις μολυσματικές ασθένειες. Υπάρχει πάντα ο κίνδυνος ψευδούς αρνητικού ή ψευδούς θετικού αποτελέσματος. Μερικές φορές συμβαίνει ότι η PCR είναι αρνητική και η ELISA είναι θετική.

Αυτό σημαίνει ότι προς το παρόν δεν υπάρχει ιός στο αίμα του ασθενούς, αλλά έχει υποστεί οξεία ασθένεια. Γενικά πιστεύεται ότι το ELISA εμφανίζει αντισώματα που παράγονται από το ανοσοποιητικό σύστημα μετά την εισβολή του παθογόνου στο σώμα..

Το ELISA, σε σύγκριση με το PCR, χαρακτηρίζεται από χαμηλή αξιοπιστία και αξιοπιστία, επομένως χρησιμοποιείται ως πρωταρχικός έλεγχος. Κατά τη διάγνωση της ιογενούς ηπατίτιδας, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι απαραίτητη.

Το κόστος των δοκιμών για την ηπατίτιδα C

Μπορείτε να κάνετε εξετάσεις στο νοσοκομείο όπου παρατηρείται ο ασθενής, εάν υπάρχει εργαστήριο εκεί ή μπορείτε να πάτε σε ιδιωτικό κέντρο επί πληρωμή..

Σε σύντομο χρονικό διάστημα, μπορείτε να λάβετε το αποτέλεσμα σε εργαστηριακά κέντρα όπως Gemotest, Invitro, Helix.

Κόστος έρευνας ανάλογα με το εργαστήριο:

Όνομα εργαστηριακής υπηρεσίαςΠολιτική τιμών
Ελιξ· Το κόστος της δειγματοληψίας βιολογικού υλικού - 170 ρούβλια.

Ποιοτική + ποσοτική έρευνα με μέθοδο PCR - 3990 ρούβλια.

Ανίχνευση αντισωμάτων μιας ιογενούς νόσου - 1.500 ρούβλια (2-3 ημέρες).

Έλεγχος της δραστηριότητας του ιού πριν από την έναρξη της θεραπείας - 4090 ρούβλια.

InvitroΠοσοτική ανίχνευση RNA του ιού της ηπατίτιδας C με PCR - 3140 ρούβλια.

Συλλογή βιολογικού υλικού (φλεβικό αίμα) - 199 ρούβλια.

Αξιολόγηση ιικού φορτίου με ανίχνευση σε πραγματικό χρόνο - 18.000 ρούβλια.

Υψηλής ποιότητας υπερευαισθησία - από 3000 ρούβλια.

Γονοτύπος - από 1250 ρούβλια.

HemotestΠοσοτική έρευνα τιμή 2200 ρούβλια.

Διαγνωστικά υψηλής ποιότητας από 700 ρούβλια.

Προσδιορισμός του RNA του παθογόνου - από 4000 ρούβλια.

Δειγματοληψία αίματος από φλέβα περίπου 150 ρούβλια.

Η διάρκεια της μελέτης είναι κατά μέσο όρο 2-3 ημέρες. Σε ορισμένα εργαστήρια υπάρχει μια επείγουσα υπηρεσία ανάλυσης, το κόστος της είναι 1,5-2 φορές υψηλότερο. Είναι επίσης δυνατό να καλέσετε έναν ειδικό γιατρό για να δωρίσετε αίμα και να λάβετε τα αποτελέσματα μέσω e-mail ή αυτοπροσώπως όταν επικοινωνήσετε με το εργαστήριο..

Διαγνωστικά PCR για ηπατίτιδα: πώς να αποκρυπτογραφήσετε, πίνακας

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα - τι είναι και γιατί γίνεται

Η ουσία της ανάλυσης PCR είναι ότι ένα μέρος του υπό μελέτη γονιδίου αναγκάζεται να πολλαπλασιαστεί σε έναν δοκιμαστικό σωλήνα χρησιμοποιώντας ειδικά ένζυμα και συνθήκες. Η ανάλυση PCR για ιούς ηπατίτιδας σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε το στέλεχος του ιού, χωρίς το οποίο είναι αδύνατο να πραγματοποιηθεί αποτελεσματική θεραπεία: κάθε γονότυπος είναι διαφορετικά ευαίσθητος στα αντιιικά φάρμακα.

Χρησιμοποιούνται δύο τύποι PCR:

  • ποιοτικός;
  • ποσοτικός.

Η αντιιική θεραπεία χρειάζεται συνεχή παρακολούθηση για την έγκαιρη προσαρμογή της θεραπείας · για τους σκοπούς αυτούς, χρησιμοποιείται επίσης η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

Ποιοτική και ποσοτική PCR

Η υψηλής ποιότητας PCR για ηπατίτιδα δίνει την απάντηση: υπάρχει στέλεχος ιού στο αίμα του ασθενούς και ποιο. Ο γονότυπος είναι απαραίτητος για την αποσαφήνιση της διάγνωσης, της πρόγνωσης της νόσου και για τον προσδιορισμό του χρόνου θεραπείας.

Όταν επιβεβαιώνεται η παρουσία του ιού, εκτελείται ποσοτική PCR για ηπατίτιδα, με τη βοήθεια της οποίας υπολογίζεται ο αριθμός των μορίων RNA στο εργαστηριακό δείγμα του ασθενούς.

Προετοιμασία για ανάλυση PCR για ηπατίτιδα

Για την ανάλυση με τη μέθοδο αντίδρασης πολυμεράσης, απαιτείται φλεβικό αίμα. Αυτό πρέπει να γίνει το πρωί με άδειο στομάχι..

Ο ασθενής πρέπει να προετοιμαστεί κατάλληλα για τη μελέτη:

  • Για 10 ώρες απόρριψης φαγητού, μπορείτε να πίνετε μόνο καθαρό νερό.
  • Σταματήστε να πίνετε αλκοόλ την προηγούμενη μέρα, μην καπνίζετε για 4 ώρες.
  • Το σωματικό και συναισθηματικό στρες πρέπει να αποφεύγεται πριν από την εξέταση..
  • Για 2 ημέρες για να σταματήσετε να χρησιμοποιείτε φάρμακα, εάν αυτό δεν είναι δυνατό, τότε είναι απαραίτητο να προειδοποιήσετε τον βοηθό του εργαστηρίου. Ορισμένα φάρμακα επηρεάζουν το τελικό αποτέλεσμα.

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C

Εάν το τεστ PCR για ηπατίτιδα C δίνει θετικό αποτέλεσμα, αυτό δείχνει ότι ο παθογόνος μικροοργανισμός διαιρείται συνεχώς και μολύνει τα ηπατικά κύτταρα.

Η επακόλουθη ποσοτική PCR για την ηπατίτιδα C μετράται σε Διεθνείς Μονάδες ανά 1 ml ή IU / ml, που σημαίνει πόσα αντίγραφα ριβονουκλεϊκού οξέος ενός συγκεκριμένου στελέχους του ιού C βρίσκονται σε 1 ml του εξεταζόμενου αίματος.

Ο παρακάτω πίνακας δείχνει την αποκωδικοποίηση μιας ποσοτικής μελέτης για την ηπατίτιδα C με τη μέθοδο PCR:

Ιικό φορτίο, αντίγραφα / mlΑξιολόγηση φορτίουΗ φύση της αντιγραφής του παθογόνου
103 και λιγότεροΠολύ χαμηλάΑδρανής
104 - 105ΧαμηλόςΠιο συχνά ανενεργό
106ΜέτριοςΕνεργός
107ΜεγάλοΠολύ ενεργό
  1. Το χαμηλό ιικό φορτίο είναι ένα σήμα ότι η θεραπευτική αγωγή επιλέγεται σωστά και η πρόγνωση για θεραπεία της ηπατίτιδας C είναι ευνοϊκή..
  2. Μια υψηλή συγκέντρωση ιικών κυττάρων δείχνει ότι η ασθένεια βρίσκεται σε οξεία φάση. Το αίμα του ασθενούς είναι μια επικίνδυνη πηγή μόλυνσης.
  3. Το ιικό φορτίο, των οποίων οι δείκτες είναι σε μέσο επίπεδο, χαρακτηρίζει είτε το χρόνιο στάδιο του HVS, είτε μπορεί να έχει δύο τάσεις ανάπτυξης: προς την αύξηση ή τη μείωση του.

Η ποσοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C πραγματοποιείται σε ολόκληρη την αντιική θεραπεία: μετά από 4, 12 και 24 εβδομάδες, σκοπός της οποίας είναι η μείωση του ιικού φορτίου.

Στο τέλος του - μετά από 6 μήνες, γίνεται PCR ελέγχου.

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β

Η ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β (Β) πραγματοποιείται για την ανίχνευση λοίμωξης (HBV DNA).

Η συγκέντρωση του HBV DNA μετράται σε αντίγραφα / ml ή me / ml. Κατά την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μελέτης, καθοδηγούνται από τους ακόλουθους δείκτες:

  • 2x10 ^ 6 - σε ενενήντα πέντε τοις εκατό των περιπτώσεων θα γίνει χρόνια.

Ανάλυση αποκωδικοποίησης PCR για ηπατίτιδα

Η ποιοτική ανάλυση PCR έχει δύο απαντήσεις:

  1. αρνητικός;
  2. θετικός.

Το PCR αρνητικό σημαίνει ότι δεν βρέθηκε παθογόνο στα δείγματα αίματος.

Η πιθανότητα αξιοπιστίας του αποτελέσματος είναι 95%. Το υπόλοιπο 5% είναι ανθρώπινο σφάλμα. Αυτή η δυνατότητα επιτρέπεται λόγω των υψηλών απαιτήσεων για τη μελέτη:

  • κανόνες αποθήκευσης για αντιδραστήρια ·
  • κατάλληλα προσόντα του ιατρικού προσωπικού ·
  • καθαρότητα βιοϋλικών.

Το ίδιο το κιτ PCR έχει 100% διαγνωστική ακρίβεια.

Η ποσοτική PCR για την ηπατίτιδα σας επιτρέπει να προσδιορίσετε το ιικό φορτίο στο σώμα του ασθενούς. Με τη βοήθειά του:

  • προσδιορίζεται το στάδιο της νόσου (οξεία, χρόνια).
  • προσδιορίζεται η αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας ·
  • προσδιορίζεται η ανάγκη για βιοψία ήπατος.

Σε ορισμένες περιπτώσεις, ο ασθενής δεν αισθάνεται σημάδια της νόσου, ενώ η μέθοδος PCR έχει διαπιστώσει λοίμωξη. Αυτό σημαίνει ότι η ασθένεια βρίσκεται σε πρώιμο στάδιο ανάπτυξης ή σε χρόνια μορφή. Για να αποσαφηνιστεί η διάγνωση, απαιτούνται πρόσθετες μελέτες για την πρώιμη έναρξη της αντιιικής θεραπείας.

Κόστος διαγνωστικών PCR

Οι κυβερνητικές κλινικές κάνουν εξέταση αίματος για PCR χωρίς χρέωση εάν υπάρχει παραπομπή από ειδικό για λοιμώξεις ή ηπατολόγους.

Υπηρεσίες επί πληρωμή για διαγνωστικά PCR παρέχονται σε όλες τις μεγάλες ρωσικές πόλεις. Το κόστος εξαρτάται από τον τύπο της δοκιμής, τον διαθέσιμο εξοπλισμό, το χρονοδιάγραμμα και άλλους παράγοντες.

  • Ανάλυση PCR υψηλής ποιότητας στη Μόσχα και την Αγία Πετρούπολη θα κοστίσει από 600 έως 900 ρούβλια. Στις περιοχές - από 300 έως 800 ρούβλια.
  • Ο προσδιορισμός του ιικού φορτίου της ηπατίτιδας C θα κοστίσει 17.000-22.000 ρούβλια. Για την ηπατίτιδα B (B) η τιμή μιας ποσοτικής μελέτης: 1200-10000 ρούβλια.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της μεθόδου PCR

Ποια είναι τα πλεονεκτήματα της μεθόδου αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης έναντι άλλων διαγνωστικών μεθόδων?

  1. Μεγάλη γκάμα εφαρμογών. Με το PCR, χρησιμοποιώντας τον τυπικό εξοπλισμό, μπορείτε να εντοπίσετε οποιονδήποτε ιό.
  2. Η ακρίβεια του προσδιορισμού του παθογόνου. Χρησιμοποιώντας διάφορους συνδυασμούς ενζύμων και τεχνικών ανάλυσης, επιτυγχάνεται 100% δοκιμή προδιαγραφής για την ενδεικνυόμενη λοίμωξη.
  3. Υψηλή ευαισθησία. Η τεχνική σάς επιτρέπει να εντοπίσετε την παρουσία ενός μορίου ιού στο αίμα.
  4. Αποδοτικότητα. Μια ποιοτική ανάλυση είναι έτοιμη σε λίγες ώρες, μια ποσοτική ανάλυση σε δύο ημέρες.
  5. Διαγνωστικά του ιού κατά την περίοδο επώασης. Με την PCR, το παθογόνο προσδιορίζεται όχι από την παρουσία αντισωμάτων, όταν υπάρχει ήδη ανοσοαπόκριση του σώματος, αλλά πριν από την έναρξη της παθολογικής διαδικασίας, η οποία διευκολύνει τη θεραπεία.

Τα μειονεκτήματα της ανάλυσης PCR είναι συνέπεια των πλεονεκτημάτων της:

  • Για την καθαρότητα της ανάλυσης, απαιτείται ο υψηλότερος βαθμός καθαρότητας, συμπεριλαμβανομένου του αέρα στο εργαστήριο, έτσι ώστε το "ξένο" DNA να μην μπει στο υπό εξέταση δείγμα.
  • υψηλές απαιτήσεις για το προσωπικό που εκτελεί τη δειγματοληψία και την ανάλυση βιοϋλικών.

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων που θα ληφθούν πρέπει να γίνει από τον θεράποντα ιατρό, ο οποίος ξέρει πώς να διαχωρίσει την πραγματική ανάλυση από το ψευδώς θετικό (όταν η θεραπεία έχει ήδη ολοκληρωθεί, αλλά ένας βιώσιμος ιός παραμένει στο αίμα) και ψευδώς αρνητικός (όταν ο ιός δεν ανιχνεύεται στην κλινική εικόνα).

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C

Για να γίνει η διάγνωση της χρόνιας ιογενούς ηπατίτιδας C (CVHC), απαιτείται μια ολοκληρωμένη εξέταση ενός ατόμου, η οποία περιλαμβάνει κλινικές, εργαστηριακές και οργανικές μελέτες. Από την άποψη της διάγνωσης για τη σωστή διάγνωση είναι η μέθοδος PCR - αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

Τι δείχνει αυτή η ανάλυση και γιατί είναι απαραίτητη?

Αυτή η εργαστηριακή μέθοδος ανιχνεύει RNA του ιού της ηπατίτιδας C στο ανθρώπινο αίμα. Μαζί με τον ενζυμικό ανοσοπροσροφητικό προσδιορισμό (ELISA) για αντισώματα κατά του ιού, το PCR χρησιμοποιείται για τη διάγνωση του CVHC και του γονότυπου του αιτιολογικού παράγοντα του. Αυτή η μελέτη είναι μία από τις τελευταίες εργαστηριακές διαγνωστικές μεθόδους. Η αξιοπιστία του σε CVHC υπερβαίνει το 97%, το οποίο θεωρείται πολύ καλός δείκτης για την έρευνα.

Υπάρχουν τρεις εξετάσεις αίματος PCR για CVHC: ποιοτικός, ποσοτικός και γονότυπος του ιού. Η πρώτη μελέτη (ποιοτική ανάλυση) για τον ιό τον εντοπίζει στο αίμα, επομένως χρησιμοποιείται μόνο για τη διάγνωση.

Η δεύτερη (ποσοτική) μελέτη προσδιορίζει το βαθμό του ιικού φορτίου στο σώμα, επομένως χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.

Η τρίτη PCR (γονότυπος) διευκρινίζει τη διάγνωση με την καθιέρωση του γονότυπου του ιού, ο οποίος είναι πολύ σημαντικός για τον διορισμό της σωστής αντιιικής θεραπείας.

Η ουσία της τεχνικής αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης είναι η χρήση ενζύμων που πολλαπλασιάζουν το γενετικό υλικό του παθογόνου στο βιοϋλικό. Κατά τη διάρκεια μιας τέτοιας αντιγραφής, ένας δοκιμαστικός σωλήνας με αίμα θερμαίνεται και ψύχεται αρκετές φορές σε θερμοκρασία απαραίτητη για την επιτάχυνση της ενζυματικής αντίδρασης. Ως αποτέλεσμα αυτών των χειρισμών, η ποσότητα του ιικού γονιδιώματος αυξάνεται πολλές φορές, γεγονός που καθιστά δυνατή την ανίχνευσή του ακόμη και με ελάχιστη ποσότητα.

Τα διαγνωστικά PCR έχουν πολλά πλεονεκτήματα σε σχέση με άλλες εργαστηριακές εξετάσεις:

  • υψηλή ευαισθησία - 97-98%
  • εγγυημένη αναλυτική ειδικότητα (προσδιορίζει ακριβώς το παθογόνο που θέλετε να βρείτε και όχι το σχετικό στέλεχος του).
  • ταχύτητα εκτέλεσης (δεν χρειάζονται περισσότερες από 2 ημέρες για να λάβετε γνώμη).

Τρεις τύποι αναλύσεων PCR

Ανάλυση PCR υψηλής ποιότητας συνταγογραφείται σε όλους τους ασθενείς στους οποίους ανιχνεύθηκαν αντισώματα έναντι του ιού CVHC με ανάλυση ELISA. Μετά την πραγματοποίηση ποιοτικής PCR, μπορούν να ληφθούν δύο παραλλαγές της απάντησης: "RNA ανιχνεύθηκε" ή "RNA δεν ανιχνεύθηκε". Για την ανίχνευση της ελάχιστης ποσότητας του ιού στο αίμα, απαιτούνται συστήματα δοκιμών με ευαισθησία τουλάχιστον 50 IU / ml. Εάν η συγκέντρωση του ιού στο αίμα του ασθενούς είναι μικρότερη από εκείνη που μπορεί να προσδιορίσει το διαγνωστικό, τότε το αποτέλεσμα της εξέτασης μπορεί να είναι ψευδώς αρνητικό. Για την αποφυγή ενός τέτοιου διαγνωστικού σφάλματος, τα εργαστήρια που εκτελούν διαγνωστικά PCR πρέπει να διαθέτουν εξαιρετικά ευαίσθητα συστήματα δοκιμών. Στο εργαστήριο "Invitro", για παράδειγμα, χρησιμοποιούνται δοκιμές με ευαισθησία 15 IU / ml. Οι εργαζόμενοι στο εργαστήριο είναι υποχρεωμένοι να παρέχουν πληροφορίες σχετικά με την ευαισθησία των εξετάσεων σε ασθενείς και γιατρούς με το πρώτο αίτημά τους..

Η ποσοτική ανάλυση PCR καθορίζει το βαθμό της ιοιμίας, δηλαδή τη συγκέντρωση του παθογόνου στο αίμα, το ιικό φορτίο. Το αποτέλεσμα αυτής της μελέτης, σε αντίθεση με μια ποιοτική PCR, εκφράζεται σε αριθμούς, για παράδειγμα, 2 × 10 * 6 IU / ml, που σημαίνει 2 εκατομμύρια διεθνείς μονάδες σε 1 ml αίματος. Ορισμένα εργαστήρια χρησιμοποιούν διαφορετική ένδειξη - τον αριθμό αντιγράφων / ml. Αυτοί οι δύο δείκτες είναι εύκολο να μετατραπούν: 1 διεθνής μονάδα ισούται με 4 αντίγραφα RNA. Έτσι, 2 × 10 * 6 IU / ml θα σημαίνει ότι 8 × 10 * 6 αντίγραφα ιικού RNA σε 1 ml βρίσκονται στο αίμα του ασθενούς, δηλ. 8 εκατομμύρια αντίγραφα σε 1 ml αίματος.

Ο γονότυπος είναι ο ορισμός ενός από τους έξι γονότυπους ενός ιού. Η κλινική εικόνα, ο ρυθμός ανάπτυξης επιπλοκών από το ήπαρ και η πρόγνωση για τη μελλοντική ζωή του ασθενούς εξαρτώνται από τον γονότυπο του παθογόνου. Ο γονότυπος του ιού είναι πολύ σημαντικός ήδη στο στάδιο της διάγνωσης, καθώς ο συνδυασμός φαρμάκων και η διάρκεια της θεραπευτικής πορείας που θα συνταγογραφηθεί στον ασθενή εξαρτώνται από τον σωστό ορισμό του..

Ωστόσο, ακόμη και μια φαινομενικά «ιδανική» εργαστηριακή μελέτη έχει τα μειονεκτήματά της:

  • κατά τη διάρκεια της μελέτης, πραγματοποιείται ο πολλαπλασιασμός του γενετικού υλικού όλων των παθογόνων, ακόμη και των άψυχων, το οποίο μπορεί να παραμορφώσει το αποτέλεσμα. Επομένως, για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας χρησιμοποιώντας PCR, η επαναλαμβανόμενη ανάλυση πραγματοποιείται όχι νωρίτερα από 2 μήνες μετά την προηγούμενη, έτσι ώστε οι νεκροί ιοί να έχουν χρόνο να «αφήσουν» το σώμα του ασθενούς.
  • μέρος του ιικού γονιδιώματος, το οποίο προσδιορίζεται με τη χρήση συστημάτων δοκιμής, μπορεί θεωρητικά να υπάρχει σε άλλους ιούς ή μικροοργανισμούς, επομένως υπάρχει πιθανότητα ψευδούς θετικής απόκρισης.
  • οι ιοί μεταλλάσσονται γρήγορα. Μερικές φορές η ταχύτητα και ο βαθμός μετάλλαξης του ιού είναι τόσο υψηλός που το σύστημα δοκιμής σταματά να καταγράφει το γονιδίωμά τους. Κατά συνέπεια, είναι πιθανό ένα ψευδώς αρνητικό αποτέλεσμα..

Για να μετριαστούν αυτά τα μειονεκτήματα, οι κατασκευαστές συστημάτων εργαστηριακών δοκιμών για διαγνωστικά PCR τα δοκιμάζουν συνεχώς, συμπεριλαμβανομένων των διασταυρούμενων αντιδράσεων και της ευαισθησίας σε έναν συγκεκριμένο γονότυπο του ιού..

Πώς να κάνετε τεστ PCR για ηπατίτιδα C?

Για να είναι αξιόπιστο το συμπέρασμα της εξέτασης με τη μέθοδο PCR, είναι απαραίτητο να ακολουθείτε αυστηρά τους κανόνες προετοιμασίας για τη διεξαγωγή της:

  • η μελέτη διεξάγεται με άδειο στομάχι (γλυκόζη, λίπη, μέταλλα που εισέρχονται στην κυκλοφορία του αίματος από τα τρόφιμα μπορούν να επηρεάσουν την ταχύτητα και την ποιότητα της ενζυματικής αντίδρασης).
  • το χάσμα μεταξύ του τελευταίου γεύματος και της δειγματοληψίας αίματος για ανάλυση πρέπει να είναι τουλάχιστον 8 ώρες ·
  • την παραμονή της μελέτης, απαγορεύεται η κατανάλωση αλκοόλ και η κατανάλωση λιπαρών τροφών, η περίοδος εξάλειψης των οποίων είναι παρατεταμένη.
  • μια ημέρα πριν πάτε στο εργαστήριο, θα πρέπει να αποφεύγετε έντονο σωματικό και συναισθηματικό στρες.
  • Το κάπνισμα δεν συνιστάται μέχρι τη δειγματοληψία αίματος.

Για να αποφευχθεί η εμφάνιση ψευδών συμπερασμάτων, ο υποτιθέμενος ασθενής πρέπει να έρθει στο εργαστήριο λίγο νωρίτερα από τη λήψη του δείγματος αίματος. Χρειάζονται 15-20 λεπτά για ένα άτομο να πιάσει την αναπνοή του και να ηρεμήσει. Η αδρεναλίνη στο αίμα μετά από γρήγορο περπάτημα μπορεί να επηρεάσει το αποτέλεσμα της εξέτασης.

Εάν ο ασθενής που στάλθηκε για ανάλυση παίρνει φάρμακα, πρέπει να ενημερώσει το γιατρό σχετικά με αυτό. Είναι πιθανό ότι θα πρέπει να αρνηθείτε να πάρετε μερικά από αυτά για λίγο (εάν είναι δυνατόν).

Το αποτέλεσμα της ανάλυσης PCR για ηπατίτιδα C

Η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων πραγματοποιείται από τον βοηθό του εργαστηρίου που πραγματοποίησε την ανάλυση. Η αποκωδικοποίηση είναι ένας ορισμός της απόκλισης του αποτελέσματος από τον κανόνα. Ο κανόνας των δεικτών καθορίζεται απευθείας από τον κατασκευαστή του συστήματος δοκιμών, το οποίο χρησιμοποιείται από το εργαστήριο για διαγνωστικά. Επομένως, δεν πρέπει να προκαλεί έκπληξη το γεγονός ότι σε ορισμένα εργαστήρια το ιικό φορτίο προσδιορίζεται σε IU / ml και σε άλλα - σε αντίγραφα / ml..

Αφού λάβετε ένα συμπέρασμα, πρέπει να μπορείτε να το ερμηνεύσετε σωστά. Η ερμηνεία των αποτελεσμάτων της μελέτης θα πρέπει να εξετάζεται από τον θεράποντα ιατρό ενός ασθενούς με ηπατίτιδα C. Μόνο μετά από αντικειμενική, οργανική και εργαστηριακή εξέταση του ασθενούς, ο γιατρός μπορεί να λάβει επαρκή ποσότητα δεδομένων για μια κατάλληλη ερμηνεία των ληφθέντων αποτελεσμάτων PCR..

Η αξιολόγηση μιας ποιοτικής ανάλυσης είναι γενικά απλή, ακόμη και για τους ασθενείς. Μπορεί να υπάρχει μόνο ένα αποτέλεσμα: "βρέθηκε" ή "δεν βρέθηκε". Επιπλέον, το δεύτερο από αυτά είναι ο κανόνας.

Η ποσοτική ανάλυση είναι πιο δύσκολο να ερμηνευθεί. Δείχνει τον βαθμό του ιικού φορτίου στον ασθενή. Ακόμη και μεταξύ των ηπατολόγων, δεν υπάρχει συναίνεση για τον τρόπο ερμηνείας της ανιχνευθείσας ιοιμίας. Οι περισσότεροι γιατροί τείνουν να πιστεύουν ότι ένα φορτίο μεγαλύτερο από 8 × 10 * 5 IU / ml πρέπει να θεωρείται υψηλό. Ένα πολύ υψηλό φορτίο θεωρείται περισσότερο από 1 × 10 * 7 IU / ml και ένα χαμηλό φορτίο είναι μικρότερο από 4 × 10 * 5 IU / ml..

Ο βαθμός του ιικού φορτίου υποδηλώνει την λοιμογόνο δράση (επιθετικότητα) του ιού: όσο περισσότερο η ποσότητα του στο αίμα, τόσο πιο γρήγορα μπορούν να αναπτυχθούν επιπλοκές από το ήπαρ. Η υψηλή συγκέντρωση του ιού στο αίμα μιας εγκύου αυξάνει την πιθανότητα διείσδυσης μέσω του φραγμού του πλακούντα στο αίμα για το έμβρυο. Η αναιμία επηρεάζει επίσης την αποτελεσματικότητα της θεραπείας: με χαμηλούς αριθμούς, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας είναι υψηλότερη από ό, τι με την υψηλή.

Προκειμένου να είστε σίγουροι για την αξιοπιστία της ανάλυσης PCR για την ηπατίτιδα C, πρέπει να προτιμάτε μόνο τα εργαστήρια που έχουν αποδειχθεί καλά. Ταυτόχρονα, η τιμολογιακή πολιτική δεν πρέπει να διαδραματίζει πρωταρχικό ρόλο..