Δοκιμές ιού ηπατίτιδας Β (ELISA και PCR)

Η ηπατίτιδα Β είναι μια μολυσματική ηπατική νόσος που εμφανίζεται από έναν αυτοάνοσο μηχανισμό. Ο ιός, που μπαίνει στο αίμα, πολλαπλασιάζεται στα ηπατοκύτταρα, προκαλώντας το θάνατό τους. Στην παρατεταμένη χρόνια μορφή της, η ηπατίτιδα Β προκαλεί καρκίνο και κίρρωση. Όσον αφορά τα συμπτώματα, η ασθένεια είναι παρόμοια με το κρυολόγημα, είναι δύσκολο να εντοπιστεί σε πρώιμο στάδιο. Μετά από επαφή με ένα άρρωστο άτομο ή χώρες που επισκέπτονται με υψηλή συχνότητα, την απειλή πιθανής μόλυνσης, πραγματοποιούνται εξετάσεις αίματος. Η ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β με υψηλή ακρίβεια καθορίζει την παρουσία του ιού, τον βαθμό δραστηριότητας του παθογόνου.

Η ποιοτική αξιολόγηση προσδιορίζει το παθογόνο, η ποσοτική αξιολόγηση βοηθά στον προσδιορισμό του βαθμού του ιικού φορτίου. Η επανεξέταση βοηθά να δείτε την κλινική εικόνα της πορείας της νόσου στη δυναμική.

Τι θα μάθω; Το περιεχόμενο του άρθρου.

Τι είναι η PCR για την ηπατίτιδα Β?

Η μέθοδος αντίδρασης πολυμεράσης (PCR) αναπτύχθηκε από τον βραβευμένο με Νόμπελ Mullis. Βασίζεται στην αρχή της αντιγραφής της δομής του παθογόνου. Προσδιορίζει το DNA του ιού HBV και τη συγκέντρωσή του στο αίμα. Κατά τη διάρκεια της περιόδου νοσηρότητας, ένα πρωτεϊνικό αντιγόνο υπάρχει στον ορό - μέρος του κελύφους του παθογόνου. Είναι αυτός που αναγνωρίζει και επιτίθεται στο ανοσοποιητικό σύστημα του σώματος..

Με τη συγκέντρωση αντιγόνων και αντισωμάτων στον ορό του αίματος, μπορεί κανείς να κρίνει τον βαθμό δραστικότητας του παθογόνου.

Η PCR παρέχει εκτίμηση του HBV κατά τη στιγμή της δειγματοληψίας. Κατά τη διαδικασία της μοριακής έρευνας, η αλυσίδα DNA διασπάται πρώτα · για αυτό, η θερμοκρασία στον ενισχυτή αυξάνεται πρώτα και μετά μειώνεται απότομα. Οι δείκτες στην επιθυμητή ακολουθία συνδέονται με το DNA - δημιουργούνται αντίγραφα του υλικού δοκιμής, προσδιορίζουν τη συγκέντρωση του παθογόνου ανά 1 ml.

Ενδείξεις για έρευνα

Η ποιοτική ανάλυση PCR προσδιορίζει το παθογόνο. Τα αποτελέσματα χρησιμοποιούνται για να κριθεί το στάδιο της ηπατίτιδας.

Η έρευνα βρίσκεται σε εξέλιξη:

  • δέκτες αίματος δότη ·
  • ασθενείς με νεφρική ανεπάρκεια σε αιμοκάθαρση.
  • μολυνθεί με HIV ·
  • εγκυος γυναικα;
  • ιατρικοί λειτουργοί τμημάτων μολυσματικών ασθενειών ·
  • βοηθοί εργαστηρίου που εξετάζουν αίμα.
  • ασθενείς με ηπατικές παθολογίες.
  • όλα δυνητικά μολυσμένα.
  • άτομα που έχουν επισκεφτεί χώρες με υψηλή συχνότητα.
Πραγματοποιείται ποσοτική PCR:
  • εάν το παθογόνο του HBV είχε προηγουμένως εντοπιστεί, η θεραπεία πραγματοποιείται.
  • μετά από θετικές δοκιμές ELISA (ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία) ·
  • για ασθένειες του ήπατος που προκαλούνται από τον ιό της ηπατίτιδας Β.

Για έρευνα, λαμβάνεται φλεβικό αίμα, αυτό γίνεται με άδειο στομάχι. Η ακρίβεια της αξιολόγησης εξαρτάται από τη σωστή προετοιμασία του ασθενούς πριν από τις εξετάσεις.

Τύποι PCR

Οι ποσοτικές και ποιοτικές μέθοδοι για τη διάγνωση της ηπατίτιδας Β είναι ουσιαστικά οι ίδιες. Βασίζονται στις ιδιότητες του ιού DNA, στην ικανότητά του να συνθέτει ειδικές πρωτεΐνες που δεν βρίσκονται στο ανθρώπινο σώμα. Η μέθοδος αντίδρασης πολυμεράσης με υψηλό βαθμό πιθανότητας αναγνωρίζει ένα παθογόνο με μια πολύπλοκη δομή.

Ανάλογα με τη συγκέντρωση των HBsAg, HBeAg, κρίνεται το στάδιο ανάπτυξης της νόσου και η ορθότητα της θεραπείας. Στην οξεία ηπατίτιδα, εμφανίζονται ταυτόχρονα στο αίμα · παρουσία HBeAg, ο ασθενής είναι φορέας ιών και είναι σε θέση να μολύνει άλλους. Η τεχνική PCR καθορίζεται από τον γιατρό με βάση το ιστορικό του ασθενούς.

Ποσοτική PCR για ηπατίτιδα Β

Κατά τη διάρκεια της νόσου, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης αναλύεται επανειλημμένα, ο αριθμός των ιών στο αίμα αλλάζει συνεχώς. Μετά την περίοδο επώασης, αυξάνεται το επίπεδο HBsAg. Στη συνέχεια εμφανίζεται το HBeAg - ένα αντιγόνο που βρίσκεται στον πυρήνα του παθογόνου. Όταν αυτό το αντιγόνο εξαφανίζεται, αντισώματα εμφανίζονται στη θέση του. Αυτό δείχνει τον αγώνα του σώματος με το παθογόνο. Η μέθοδος καθορίζει το ιικό φορτίο στο ανοσοποιητικό σύστημα.

Ο ποσοτικός δείκτης της PCR αποκαλύπτει τον κίνδυνο μιας χρόνιας μορφής της νόσου. Ο ρυθμός τρανσαμινάσης έχει καθοριστεί, στον οποίο ο ιός είναι ανενεργός σε άλλους. Για εγγεγραμμένους ασθενείς, η έρευνα πραγματοποιείται κάθε τρεις μήνες. Το ιικό φορτίο καθορίζει τη σοβαρότητα της νόσου. Εάν υπερβεί το επιτρεπόμενο διπλάσιο, ο ασθενής συνταγογραφείται μια πρόσθετη εξέταση, αλλάζει η τακτική θεραπείας.

PCR υψηλής ποιότητας

Η μέθοδος αντίδρασης πολυμεράσης είναι η πιο αξιόπιστη για την ταυτοποίηση του παθογόνου. Μια δοκιμή υψηλής ποιότητας PCR για ηπατίτιδα Β με υψηλή ακρίβεια επιβεβαιώνει το γεγονός της μόλυνσης από τον ιό HBV. Επιβεβαιώνει ή αρνείται την προκαταρκτική διάγνωση.

Στο 50% του DNA, ο ιός ανιχνεύεται σε ένα στάδιο έως ότου ο οργανισμός παράγει αντισώματα. Το ανοσοποιητικό σύστημα δεν αναγνωρίζει αμέσως ξένες πρωτεΐνες, ανιχνεύονται όταν ο πολλαπλασιαστικός ιός φεύγει από τα ηπατοκύτταρα.

Καταστρέφοντας τα HBsAg και HBeAg, το σώμα καταστρέφει ταυτόχρονα τα ηπατοκύτταρα. Αυτό οδηγεί σε σοβαρές επιπλοκές. Όταν ο HBV υπάρχει στο αίμα για περισσότερο από δύο μήνες, η ηπατίτιδα Β γίνεται χρόνια. Ο ιός είναι πιο εύκολο να καταπολεμηθεί τις πρώτες δύο εβδομάδες.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων της PCR για ηπατίτιδα Β

Ένα άτομο είναι υγιές εάν το παθογόνο δεν υπάρχει στο αίμα ή η συγκέντρωση του HBsAg είναι αμελητέα και το HBeAg απουσιάζει εντελώς. Το αποτέλεσμα σε αυτήν την περίπτωση είναι αρνητικό. Μόνο σε μεμονωμένες περιπτώσεις, με αρνητικό αποτέλεσμα, ανιχνεύεται μια ασθένεια, αυτό δείχνει μια ταχεία πορεία της νόσου ή την κακοήθη φύση της. Τα αντισώματα που παράγονται από το ανοσοποιητικό σύστημα εξουδετερώνουν τον ιό DNA. Σε αυτήν την περίπτωση, είναι δυνατή η εκτεταμένη ηπατική βλάβη..

Εάν το αποτέλεσμα HBsAg είναι υψηλότερο από τους τυπικούς δείκτες και υπάρχει HBeAg, τότε διενεργείται επίσης ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα Β για να μάθετε πόσο παθογόνο έχει ενεργοποιηθεί.

Τι πρέπει να κάνετε εάν η ηπατίτιδα Β επιβεβαιωθεί με PCR?

Είναι σημαντικό να προστατεύσετε τους αγαπημένους σας:

  • Κρατήστε ξεχωριστά είδη προσωπικής υγιεινής που μπορούν να βλάψουν το δέρμα και τους βλεννογόνους (οδοντόβουρτσα, ξυράφι, είδη μανικιούρ) ξεχωριστά.
  • χρησιμοποιήστε μια μεμονωμένη πετσέτα.
  • απομόνωση πληγών.

Είναι χρήσιμο να ακολουθείτε μια διατροφή, να εγκαταλείπετε τις κακές συνήθειες. Με την επιφύλαξη όλων των συνταγών του γιατρού, ο ιός απαλλάσσεται για πάντα.

Ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C, ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C: ποιοτική και ποσοτική ανάλυση του ιού RNA

Δοκιμές για ηπατίτιδα Β: κανόνες, αποτελέσματα και ερμηνεία τους

Δοκιμή αίματος HBsAg και HCV: τι είναι αυτό, ενδείξεις, αποκωδικοποίηση

Ποιοτική ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C: ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Τύποι PCR για ηπατίτιδα Β και ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι ένας τύπος εξέτασης αίματος που σας επιτρέπει να εντοπίσετε με ακρίβεια τον ιό της ηπατίτιδας Β. Ένα χαρακτηριστικό της μεθόδου είναι ότι είναι σε θέση να εμφανίσει HBV στα αρχικά στάδια - μέσα σε ένα μήνα μετά τη μόλυνση, ενώ το ειδικό αντιγόνο του ασθενούς ανιχνεύεται μόνο μετά από 2 μήνες... Η PCR μπορεί να ανιχνεύσει όχι μόνο έναν κοινό ιό DNA, αλλά και μεταλλαγμένα στελέχη που δεν σας επιτρέπει να δείτε άλλη ανάλυση.

Κατά την αποκωδικοποίηση της PCR για ηπατίτιδα Β, τα αποτελέσματα συγκρίνονται με τις τυπικές τιμές. Με βάση αυτό, συνάγονται συμπεράσματα σχετικά με την παρουσία μιας νόσου (θετικό αποτέλεσμα), τη συγκέντρωση του ιού (δραστηριότητα) ή την απουσία μιας ασθένειας (αρνητικό αποτέλεσμα). Η επεξεργασία δεδομένων διαρκεί 2 εβδομάδες.

Τύποι PCR για ιογενή ηπατίτιδα Β

Υπάρχουν 2 τύποι διαγνωστικών που συνταγογραφούνται για την ηπατίτιδα Β. Η υψηλής ποιότητας PCR καθιστά δυνατό να πούμε με ακρίβεια 100% εάν υπάρχει HBV στο αίμα ή όχι. Η ποσοτική PCR δείχνει τη δραστηριότητα του ιού, δηλαδή πόσα θραύσματα DNA HBV περιέχονται σε 1 ml αίματος.

Υψηλής ποιότητας PCR και η ερμηνεία του

Μια εξέταση αίματος για ηπατίτιδα Β με PCR μπορεί να αποκαλύψει μόνο την παρουσία θραυσμάτων DNA. Συνιστάται όταν ο ασθενής υποψιάζεται λοίμωξη από ΗΒν ή όταν άλλες διαγνωστικές μέθοδοι, για παράδειγμα, ορολογικές εξετάσεις, δεν δίνουν σαφή απάντηση. Η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων κατά τη διεξαγωγή ποιοτικής ανάλυσης είναι πολύ απλή:

  • αρνητικό αποτέλεσμα - χωρίς ιό
  • θετικό αποτέλεσμα - εντοπίστηκε ιός.

Ο σκοπός της ποιοτικής PCR είναι η επιβεβαίωση ή άρνηση της παρουσίας του ιού της ηπατίτιδας Β, καθώς και η έγκαιρη διάγνωση. Εάν εντοπιστεί HBV εντός 1-2 εβδομάδων μετά τη μόλυνση, τότε η θεραπεία θα είναι όσο το δυνατόν πιο αποτελεσματική. Με την ενεργό ανάπτυξη του HBV για 2 μήνες ή περισσότερο, η ασθένεια γίνεται χρόνια και δεν μπορεί να θεραπευτεί πλήρως.

Στην περίπτωση που μια ποιοτική PCR για ηπατίτιδα δείχνει την παρουσία ενός ιού, το επόμενο βήμα είναι η ποσοτική διάγνωση.

Ποσοτική PCR

Δεν αρκεί απλώς να γνωρίζουμε ότι ο ασθενής έχει HBV για να συνταγογραφήσει μια αποτελεσματική θεραπεία ή να αξιολογήσει τα αποτελέσματα της συνεχιζόμενης θεραπείας. Είναι απαραίτητο να ποσοτικοποιηθεί η αξία του ιού DNA της ηπατίτιδας Β σε 1 ml αίματος, δηλαδή το ιικό φορτίο στο σώμα. Αυτός ο τύπος PCR για ηπατίτιδα Β πραγματοποιείται στις ακόλουθες περιπτώσεις:

  1. Πριν από τη συνταγογράφηση θεραπείας.
  2. Για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.
  3. Για τον προσδιορισμό της ανάπτυξης της αντοχής του ιού στα φάρμακα που λαμβάνονται.
  4. Για να προσδιορίσετε το στάδιο στο οποίο είναι η ασθένεια.

Η μονάδα μέτρησης του ιού είναι διεθνείς μονάδες (IU / ml) ή ο αριθμός αντιγράφων DNA / ml, δηλαδή ο αριθμός θραυσμάτων DNA ανά 1 ml αίματος. Η αναλογία μεταξύ των δύο μονάδων εξαρτάται από το επιλεγμένο σύστημα δοκιμών και κυμαίνεται από 2 έως 7 αντίγραφα / ml σε 1 IU / ml. Εάν το σύστημα είναι άγνωστο, τότε χρησιμοποιείται η μέση τιμή για επανυπολογισμό:

1 IU / ml = 5 αντίγραφα / ml

Εάν μια ποσοτική ανάλυση γίνει αμέσως, τότε το οριακό πρότυπο για τη διάγνωση της νόσου είναι 75 IU / ml. Εάν το αποτέλεσμα είναι υψηλότερο από αυτόν τον δείκτη, γίνεται η διάγνωση του HBV, παρακάτω - δεν εντοπίζεται το HBV.

Ερμηνεία της ποσοτικής PCR

Στην ηπατίτιδα Β, οι ακόλουθες τιμές ιικού φορτίου (ιοιμία), αντίγραφα / ml, είναι οι κανόνες PCR:

  • 10 ^ 5 αντίγραφα / ml. Όταν, με υψηλή ιική δραστηριότητα, παρατηρείται αύξηση του επιπέδου ALT συχνότερα 2 φορές σε έξι μήνες, τότε συνταγογραφείται αμέσως αντιιική θεραπεία..

Για να μάθετε πώς θα συμπεριφέρεται το DNA της ηπατίτιδας όσον αφορά τη χρόνια, δηλαδή, τη μετάβαση σε μια χρόνια μορφή από οξεία, χρησιμοποιούνται επίσης τα αποτελέσματα των διαγνωστικών PCR:

  • Το HBV DNA 2 x 10 ^ 6 αντίγραφα / ml σημαίνει ότι η απόκτηση μιας χρόνιας μορφής της νόσου είναι αναπόφευκτη.

Προετοιμασία για την εξέταση

Για να προσδιοριστεί η παρουσία του HBV με PCR, λαμβάνεται μια εξέταση αίματος από μια φλέβα. Η διαδικασία πραγματοποιείται πάντα αυστηρά με άδειο στομάχι και είναι καλύτερο να φτάσετε στο εργαστήριο το πρωί, όταν ο φυσικός χρόνος ανάπαυσης από το φαγητό είναι 8 ώρες. Για να είναι σωστά τα αποτελέσματα της εξέτασης, πρέπει να γνωρίζετε εκ των προτέρων πώς να προετοιμαστείτε σωστά για το ταξίδι στην κλινική. Πρόσθετα βήματα είναι τα εξής:

  1. Αποφυγή λιπαρών τροφών, καπνίσματος, αλκοόλ και αθλητισμού 12 ώρες πριν από τη διαδικασία.
  2. Ξεκουραστείτε για 20 λεπτά αμέσως πριν δώσετε αίμα.
  3. Πριν ξεκινήσετε τη διαδικασία, είναι απαραίτητο να προειδοποιήσετε τη νοσοκόμα για τα φάρμακα που λαμβάνονται..

Προσοχή! Εάν η διάγνωση πραγματοποιείται σε παιδί κάτω των 5 ετών, τότε μισή ώρα πριν από τη διαδικασία, θα πρέπει να λαμβάνεται 1 ποτήρι βραστό νερό κάθε 10 λεπτά..

Ανακεφαλαίωση

Σήμερα, η διάγνωση PCR για την ανίχνευση της ηπατίτιδας Β είναι η πιο ακριβής μέθοδος. Η μέθοδος σάς επιτρέπει να δείτε τις λανθάνουσες και μεταλλαγμένες μορφές της νόσου, να εντοπίσετε την ασθένεια τις πρώτες εβδομάδες μετά τη μόλυνση και, κατά συνέπεια, να πραγματοποιήσετε αποτελεσματική θεραπεία. Ανάλογα με την κατάσταση, πραγματοποιείται ποιοτική ή ποσοτική PCR, η οποία αποσκοπεί στην ανίχνευση του HBV και στην καθιέρωση της δραστηριότητάς του. Για να δοκιμάσετε, πρέπει να επικοινωνήσετε με έναν ιολόγο, έναν ειδικό για τις μολυσματικές ασθένειες ή τον ηπατολόγο.

PCR για ηπατίτιδα Β

Η ιογενής ηπατίτιδα Β είναι μια σοβαρή και επικίνδυνη ασθένεια. Ο κίνδυνος αυτής της ασθένειας έγκειται στις επιπλοκές που ακολουθούν τις κύριες εκδηλώσεις της. Επομένως, είναι πολύ σημαντικό να μην ξεκινήσετε την ασθένεια και η έγκαιρη διάγνωση θα σας βοηθήσει να το επιτύχετε..

Δεδομένου ότι η ηπατίτιδα Β μεταδίδεται κυρίως μέσω μολυσμένου αίματος, η κύρια μέθοδος διάγνωσης αυτής της ασθένειας είναι η ανάλυση αυτού του βιολογικού υγρού. Συγκεκριμένα, αυτή είναι η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR). Αλλά πώς χρησιμοποιείται η PCR για την ηπατίτιδα Β; Τι είναι αυτή η ανάλυση; Πώς να προετοιμαστείτε σωστά για ένα τεστ PCR για ηπατίτιδα; Θα βρείτε τις απαντήσεις στο άρθρο.

Τι είναι αυτή η ανάλυση?

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια εξέταση αίματος που μπορεί να προσδιορίσει την ποσότητα και τη συγκέντρωση του DNA και του RNA του παθογόνου. Η PCR σάς επιτρέπει να διαγνώσετε την ασθένεια εγκαίρως, εξισορροπώντας τον κίνδυνο σοβαρών συνεπειών της νόσου. Λαμβάνεται ένα μικρό δείγμα του φλεβικού αίματος του ασθενούς για τη διάγνωση της ιογενούς ηπατίτιδας Β.

Τα κύρια καθήκοντα της PCR για την ηπατίτιδα Β είναι:

  • Διάγνωση ιογενούς ηπατικής βλάβης στο αρχικό στάδιο της ανάπτυξής του.
  • Διευκρίνιση της διάγνωσης σε περίπτωση αμφιλεγόμενων αποτελεσμάτων άλλων εξετάσεων.
  • Ανίχνευση φορέα ιού;
  • Προσδιορισμός του γονότυπου και οιονεί τύπου του παθογόνου.

Τα πλεονεκτήματα αυτού του τύπου διαγνωστικών είναι ένα υψηλό επίπεδο αξιοπιστίας και γρήγορα αποτελέσματα. Διάκριση μεταξύ ποσοτικών και ποιοτικών προσδιορισμών PCR. Ας εξετάσουμε καθένα από αυτά με περισσότερες λεπτομέρειες.

Ποσοτική PCR για ηπατίτιδα Β

Πραγματοποιείται ποσοτική PCR για ηπατίτιδα C για τον προσδιορισμό της ποσότητας του παθογόνου DNA στο πλάσμα του αίματος του ασθενούς. Το καθορισμένο θραύσμα σε αυτήν την περίπτωση γίνεται μια μοναδική αλληλουχία DNA της δομικής ιικής πρωτεΐνης.

Η ποσοτική PCR χρησιμοποιείται για κάτι περισσότερο από την απλή διάγνωση. Στη θεραπεία της ηπατίτιδας Β, αυτή η δοκιμή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα της θεραπείας με ιικό φορτίο. Εάν μειωθεί, η θεραπεία μπορεί να θεωρηθεί επιτυχής..

Η αποκωδικοποίηση υψηλής ποιότητας αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης πραγματοποιείται σε εργαστηριακές συνθήκες από εξειδικευμένους εργαζόμενους στον τομέα της υγείας. Οι βασικοί δείκτες ανάλυσης παρουσιάζονται παρακάτω:

  • Από 75 IU / ml έως 108 IU / ml - θετικό.
  • Λιγότερο από 75 IU / ml - αρνητικό αποτέλεσμα, δεν εντοπίστηκε ο αιτιολογικός παράγοντας της ιογενούς βλάβης του ήπατος.

Εάν το αποτέλεσμα της δοκιμής είναι θετικό, μπορούμε να μιλήσουμε για την ανίχνευση ενός παθογόνου στο σώμα του ξενιστή, καθώς και για το συνακόλουθο ιικό φορτίο. Σε αυτήν την περίπτωση, στον ασθενή μπορεί να συνταγογραφηθεί μια ειδική θεραπεία. Η πιο αποτελεσματική είναι η θεραπεία χρησιμοποιώντας καινοτόμους αντιιικούς παράγοντες. Ωστόσο, το HBV αναγνωρίζεται ως μόνο μερικώς ιάσιμο..

Μια αρνητική PCR υποδηλώνει την απουσία λοίμωξης με τον αιτιολογικό παράγοντα του ιού της ηπατίτιδας Β. Ωστόσο, αυτό δεν σημαίνει ότι το άτομο είναι εντελώς υγιές. Συνιστάται να δοκιμάζεται και για άλλους τύπους ηπατίτιδας. Ο τύπος Γ του ήπατος είναι ιδιαίτερα ύπουλος, ο οποίος συχνά προκαλεί μια χρόνια μορφή της νόσου χωρίς έντονα συμπτώματα. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό να διαγνώσετε την ασθένεια εγκαίρως..

Ποιοτική ανάλυση PCR

Η ποιοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα Β στοχεύει στην ανίχνευση του παθογόνου. Αυτή είναι μια από τις πιο ακριβείς μεθόδους για τη διάγνωση του ηπατοϊού. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης με βάση τα δείγματα φλεβικού αίματος του ασθενούς πραγματοποιείται σε πραγματικό χρόνο.

Ένας δείκτης άνω των 75,0 IU ανά ml υποδηλώνει την παρουσία αιτιολογικού παράγοντα στο σώμα του ασθενούς. Αυτό μπορεί να είναι και ένας φορέας ιών και μια ενεργή φάση μιας επικίνδυνης ασθένειας..

Πότε υποδεικνύεται η PCR;?

Η μέθοδος PCR για την ηπατίτιδα Β είναι ο πιο συνιστώμενος τρόπος από τους ηπατολόγους να ελέγχουν την παρουσία του ιού στο αίμα. Συνιστάται να υποβληθείτε σε δοκιμή αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης στις ακόλουθες περιπτώσεις:

  • Παρουσία προφανών συμπτωμάτων ηπατίτιδας - ναυτία, έμετος, κιτρίνισμα του σκληρού και του δέρματος, πόνος στο ήπαρ, αποχρωματισμός των περιττωμάτων και σκουρόχρωμα ούρα.
  • Με ενδοφλέβιο (ένεση) εθισμό στα ναρκωτικά.
  • Με υψηλές ενδείξεις ALT και AST στα αποτελέσματα μιας βιοχημικής εξέτασης αίματος.
  • Με χολόσταση (στασιμότητα στη χολική οδό).
  • Εγκυμοσύνη ή χειρουργική επέμβαση, προετοιμασία για τον τοκετό ή χειρουργική επέμβαση.
  • Με τακτικές διαδικασίες αιμοκάθαρσης ή μετάγγισης αίματος.
  • Εάν είχατε σεξουαλική επαφή με δυνητικά μολυσμένο σύντροφο.

Μια ποσοτική ή ποιοτική ανάλυση PCR μπορεί επίσης να συνταγογραφηθεί σε άτομα που είχαν ήδη μία από τις μορφές ηπατίτιδας στο παρελθόν. Έτσι, παρακολουθείται η κατάσταση του ασθενούς, καθώς είναι πιθανή μια υποτροπή..

Πώς να προετοιμάσεις?

Οποιαδήποτε διάγνωση μιας ιογενούς νόσου απαιτεί προετοιμασία, διαφορετικά τα αποτελέσματα θα είναι ανακριβή. Πριν δωρίσει αίμα για ποσοτική PCR για ηπατίτιδα Β, ο ασθενής πρέπει:

  • Απορρίψτε τα βαριά και πλούσια σε λιπαρά τρόφιμα την ημέρα πριν φτάσετε στο δείγμα αίματος.
  • Μην τρώτε τις τελευταίες 8 ώρες πριν από τη δοκιμή.
  • Αρνηθείτε να καταναλώνετε αλκοόλ και προϊόντα καπνού τουλάχιστον 1 ημέρα νωρίτερα.
  • Αποφύγετε το άγχος και τη σωματική υπερφόρτωση, πάρτε έναν καλό ύπνο.

Η συλλογή δειγμάτων βιολογικού υγρού για έρευνα πραγματοποιείται το πρωί. Τις περισσότερες φορές, μια εξέταση PCR για ηπατίτιδα Β πραγματοποιείται στις 8 π.μ..

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β

Ένας ιός που περιέχει DNA της οικογένειας Hepadnaviridae είναι ένας άμεσος αιτιολογικός παράγοντας της ηπατίτιδας Β. Η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα Β επιτρέπει τον προσδιορισμό της παρουσίας ενός ιού DNA στο αίμα του ασθενούς. Μια θετική εξέταση DNA HBV δείχνει την παρουσία λοίμωξης στο αίμα του ασθενούς. Πρέπει να σημειωθεί ότι τα διαγνωστικά μέσω της ανάλυσης PCR επιτρέπουν όχι μόνο τον προσδιορισμό της παρουσίας μιας λοίμωξης, αλλά και το ποσοτικό φορτίο και τη δραστηριότητά της. Αυτή η μέθοδος είναι αξιόπιστη, ακριβής και αναπαραγώγιμη. Ο ποσοτικός προσδιορισμός του DNA HBV με χρήση qPCR μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας με HBV και να είναι χρήσιμος στην κατανόηση της φυσικής ιστορίας του HBV.

Η διαδικασία μόλυνσης με ηπατίτιδα Β συμβαίνει μέσω οικιακής ή σεξουαλικής επαφής ή μέσω άμεσης επαφής με μολυσμένο αίμα. Μετά τη μόλυνση, ο ιός εισέρχεται στα ηπατικά κύτταρα, στα οποία συνεχίζει την ενεργή αναπαραγωγή του. Μέσω της κυκλοφορίας του αίματος, τα παθογόνα κύτταρα εξαπλώνονται σε όλο το σώμα. Πρέπει να σημειωθεί ότι ο ιός της ηπατίτιδας Β είναι ιδιαίτερα ανθεκτικός σε οξέα και υψηλές θερμοκρασίες. Είναι ικανό να διατηρήσει τις βλαβερές ιδιότητές του για έξι μήνες..

Τύποι PCR για ηπατίτιδα Β

Σήμερα, διακρίνονται δύο τύποι διαγνωστικών, τα οποία συνταγογραφούνται εάν υπάρχει υποψία παρουσίας του ιού της ηπατίτιδας Β: ποιοτική PCR (σας επιτρέπει να προσδιορίσετε με εκατό τοις εκατό ακρίβεια την παρουσία ιού στο αίμα) και ποσοτική PCR (σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον βαθμό της δραστηριότητας του ιού).

  • Τύποι PCR για ηπατίτιδα Β
  • Ποσοτική ανάλυση αποκωδικοποίησης
  • Προετοιμασία για την έρευνα
  • Ανακεφαλαίωση

Υψηλής ποιότητας PCR συνταγογραφείται εάν υπάρχει υποψία λοίμωξης από HBV, ή εάν άλλες διαγνωστικές μέθοδοι δεν απέδωσαν σαφές αποτέλεσμα. Αυτός ο τύπος ανάλυσης PCR είναι εξαιρετικά απλός να αποκρυπτογραφηθεί: αρνητικός (δεν ανιχνεύθηκε ιός στο αίμα), θετικός (ανιχνεύθηκε ιός στο αίμα). Το κύριο καθήκον μιας ποιοτικής ανάλυσης είναι να προσδιοριστεί η παρουσία μολυσμένων κυττάρων στα αρχικά στάδια της νόσου. Εάν ο ιός διαγνώστηκε δύο εβδομάδες μετά την υποψία λοίμωξης, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας θα είναι υψηλότερη κατά σειρά. Εάν ο ιός είναι στο αίμα για περίπου δύο μήνες, η ασθένεια γίνεται χρόνια, επομένως, δεν μπορεί να θεραπευτεί πλήρως..

Εάν μια ποιοτική διάγνωση έχει επιβεβαιώσει την παρουσία HBV στο αίμα, ο γιατρός συνταγογραφεί ποσοτική ανάλυση.

Η ποσοτική ανάλυση σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τη δραστηριότητα ανάπτυξης του ιού στο σώμα του ασθενούς. Αυτός ο τύπος ανάλυσης PCR εκχωρείται:

  • για τον προσδιορισμό του σταδίου της νόσου ·
  • να παρακολουθεί την αποτελεσματικότητα της θεραπείας που χρησιμοποιείται ·
  • για τον προσδιορισμό του επιπέδου αντοχής του ιού σε ένα συγκεκριμένο φάρμακο ·
  • για την επιλογή φαρμάκων.

Οι ποσοτικοί δείκτες του ιού στο αίμα μετρώνται σε IU ανά χιλιοστόλιτρο ή DNA ανά χιλιοστόλιτρο.

Εάν ο γιατρός συνταγογραφήσει αμέσως ποσοτική διάγνωση χωρίς να ελέγξει την ποιοτική, τότε 75 IU ανά χιλιοστόλιτρο θεωρούνται ο κανόνας. Εάν βρεθούν λιγότερες διεθνείς μονάδες, το αποτέλεσμα είναι ότι δεν εντοπίζεται HBV, όταν οι τιμές είναι υψηλότερες από τον κανόνα, διαγιγνώσκεται η παρουσία ιογενούς ηπατίτιδας Β.

Ποσοτική ανάλυση αποκωδικοποίησης

Οι ακόλουθοι δείκτες (σε αντίγραφα / χιλιοστόλιτρο) θεωρούνται ο κανόνας του OCP στην ηπατίτιδα Β: λιγότερο από 10 3 - ο ιός είναι ανενεργός. από 10 4 έως 10 5 - ο ιός είναι συνήθως ανενεργός. 10 6 - ενεργός ιός; 10 7 - ιός σε υψηλό στάδιο δραστηριότητας.

Με βάση ποσοτικούς δείκτες, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί με απόλυτη ακρίβεια η μορφή της νόσου (μεταφορά, οξεία ή χρόνια), η απόκριση του ιού στη θεραπεία, η ανάγκη για πρόσθετα διαγνωστικά.

Η χρόνια ηπατίτιδα Β διαπιστώνεται όταν η δραστηριότητα του ιού είναι 10 5 αντίγραφα ανά χιλιοστόλιτρο. Η μεταφορά διαγιγνώσκεται εάν οι ποσοτικοί δείκτες είναι κάτω από 10 5 αντίγραφα ανά χιλιοστόλιτρο.

Κατά τη διάρκεια της περιόδου θεραπείας, είναι απαραίτητο να υποβάλλονται τακτικά (μία φορά κάθε τρεις μήνες) επαναλαμβανόμενα ποσοτικά διαγνωστικά για να προσδιοριστεί εγκαίρως η στιγμή που ο ιός θα αναπτύξει ανοσία στα φάρμακα που χρησιμοποιούνται και θα αλλάξει τη μέθοδο. Εάν όλες οι μελέτες διεξαχθούν σωστά και επιλεγεί μια αποτελεσματική θεραπεία, μια επαναλαμβανόμενη ανάλυση (μετά από τρεις ημέρες θεραπείας) θα δείξει μείωση της δραστηριότητας των παθογόνων κυττάρων κατά τουλάχιστον ογδόντα πέντε τοις εκατό.

Η βιοψία του ήπατος πραγματοποιείται όταν, μετά από έξι μήνες θεραπείας, οι τιμές ALT είναι διπλάσιες από τον κανονικό και η διάγνωση PCR δείχνει τιμές κάτω από 10 5 αντίγραφα ανά χιλιοστόλιτρο αίματος.

Προετοιμασία για την έρευνα

Η ανάλυση απαιτεί φλεβικό αίμα. Για να έχετε τα πιο ακριβή αποτελέσματα, πρέπει να προετοιμαστείτε για τη διαδικασία: αρνηθείτε να πάρετε τροφή τουλάχιστον οκτώ ώρες πριν από τη δειγματοληψία να εγκαταλείψετε τη φαρμακευτική αγωγή σε δύο ημέρες (είναι υποχρεωτικό να προειδοποιήσετε τον γιατρό σχετικά με τη λήψη φαρμάκων). Πριν δωρίσετε αίμα, πρέπει να περάσετε είκοσι λεπτά σε κατάσταση ανάπαυσης. σταματήστε τα σπορ, το αλκοόλ, το κάπνισμα και τα λιπαρά τρόφιμα δώδεκα ώρες πριν από τη διαδικασία.

Σημαντικό: εάν η διάγνωση είναι απαραίτητη για ένα παιδί κάτω των πέντε μηνών, τότε πρέπει να δίνει μια κουταλιά της σούπας βραστό νερό κάθε δέκα λεπτά εξήντα λεπτά πριν από τη διαδικασία δειγματοληψίας αίματος.

Ανακεφαλαίωση

Η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα Β σήμερα είναι η πιο ακριβής μέθοδος για τη διάγνωση του ιού. Η μέθοδος σάς επιτρέπει να εντοπίσετε μεταλλαγμένες και λανθάνουσες μορφές της νόσου, να διαγνώσετε την ασθένεια τις πρώτες ημέρες της μόλυνσης και, επομένως, να επιλέξετε την πιο αποτελεσματική θεραπεία. Ο εργαστηριακός βοηθός συγκρίνει τα αποτελέσματα της ανάλυσης με τον κανόνα και στη συνέχεια τα εισάγει στο συμπέρασμα. Η επεξεργασία των δεδομένων γίνεται μέσα σε λίγες ημέρες. Για να λάβετε μια παραπομπή για ανάλυση PCR, θα πρέπει να επικοινωνήσετε με έναν ηπατολόγο, ειδικό για τις μολυσματικές ασθένειες ή ιολόγους. Είναι σημαντικό να θυμάστε ότι όσο πιο γρήγορα φτάσετε στο γιατρό, τόσο πιο γρήγορα θα επιτευχθούν τα αποτελέσματα, επομένως, τόσο πιο αποτελεσματική θα είναι η θεραπεία..

Πιο φρέσκες και σχετικές πληροφορίες για την υγεία στο κανάλι μας στο Telegram. Εγγραφείτε: https://t.me/foodandhealthru

Ειδικότητα: ειδικός λοιμώξεων, γαστρεντερολόγος, πνευμονολόγος.

Συνολική εμπειρία: 35 χρόνια.

Εκπαίδευση: 1975-1982, 1MMI, san-gig, υψηλότερα προσόντα, γιατρός μολυσματικών ασθενειών.

Επιστημονικό πτυχίο: γιατρός της υψηλότερης κατηγορίας, υποψήφιος ιατρικών επιστημών.

Εκπαίδευση:

  1. Μεταδοτικές ασθένειες.
  2. Παρασιτικές ασθένειες.
  3. Έκτακτες ανάγκες.
  4. HIV.

Διαγνωστικά PCR για ηπατίτιδα: πώς να αποκρυπτογραφήσετε, πίνακας

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα - τι είναι και γιατί γίνεται

Η ουσία της ανάλυσης PCR είναι ότι ένα μέρος του υπό μελέτη γονιδίου αναγκάζεται να πολλαπλασιαστεί σε έναν δοκιμαστικό σωλήνα χρησιμοποιώντας ειδικά ένζυμα και συνθήκες. Η ανάλυση PCR για ιούς ηπατίτιδας σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε το στέλεχος του ιού, χωρίς το οποίο είναι αδύνατο να πραγματοποιηθεί αποτελεσματική θεραπεία: κάθε γονότυπος είναι διαφορετικά ευαίσθητος στα αντιιικά φάρμακα.

Χρησιμοποιούνται δύο τύποι PCR:

  • ποιοτικός;
  • ποσοτικός.

Η αντιιική θεραπεία χρειάζεται συνεχή παρακολούθηση για την έγκαιρη προσαρμογή της θεραπείας · για τους σκοπούς αυτούς, χρησιμοποιείται επίσης η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

Ποιοτική και ποσοτική PCR

Η υψηλής ποιότητας PCR για ηπατίτιδα δίνει την απάντηση: υπάρχει στέλεχος ιού στο αίμα του ασθενούς και ποιο. Ο γονότυπος είναι απαραίτητος για την αποσαφήνιση της διάγνωσης, της πρόγνωσης της νόσου και για τον προσδιορισμό του χρόνου θεραπείας.

Όταν επιβεβαιώνεται η παρουσία του ιού, εκτελείται ποσοτική PCR για ηπατίτιδα, με τη βοήθεια της οποίας υπολογίζεται ο αριθμός των μορίων RNA στο εργαστηριακό δείγμα του ασθενούς.

Προετοιμασία για ανάλυση PCR για ηπατίτιδα

Για την ανάλυση με τη μέθοδο αντίδρασης πολυμεράσης, απαιτείται φλεβικό αίμα. Αυτό πρέπει να γίνει το πρωί με άδειο στομάχι..

Ο ασθενής πρέπει να προετοιμαστεί κατάλληλα για τη μελέτη:

  • Για 10 ώρες απόρριψης φαγητού, μπορείτε να πίνετε μόνο καθαρό νερό.
  • Σταματήστε να πίνετε αλκοόλ την προηγούμενη μέρα, μην καπνίζετε για 4 ώρες.
  • Το σωματικό και συναισθηματικό στρες πρέπει να αποφεύγεται πριν από την εξέταση..
  • Για 2 ημέρες για να σταματήσετε να χρησιμοποιείτε φάρμακα, εάν αυτό δεν είναι δυνατό, τότε είναι απαραίτητο να προειδοποιήσετε τον βοηθό του εργαστηρίου. Ορισμένα φάρμακα επηρεάζουν το τελικό αποτέλεσμα.

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C

Εάν το τεστ PCR για ηπατίτιδα C δίνει θετικό αποτέλεσμα, αυτό δείχνει ότι ο παθογόνος μικροοργανισμός διαιρείται συνεχώς και μολύνει τα ηπατικά κύτταρα.

Η επακόλουθη ποσοτική PCR για την ηπατίτιδα C μετράται σε Διεθνείς Μονάδες ανά 1 ml ή IU / ml, που σημαίνει πόσα αντίγραφα ριβονουκλεϊκού οξέος ενός συγκεκριμένου στελέχους του ιού C βρίσκονται σε 1 ml του εξεταζόμενου αίματος.

Ο παρακάτω πίνακας δείχνει την αποκωδικοποίηση μιας ποσοτικής μελέτης για την ηπατίτιδα C με τη μέθοδο PCR:

Ιικό φορτίο, αντίγραφα / mlΑξιολόγηση φορτίουΗ φύση της αντιγραφής του παθογόνου
103 και λιγότεροΠολύ χαμηλάΑδρανής
104 - 105ΧαμηλόςΠιο συχνά ανενεργό
106ΜέτριοςΕνεργός
107ΜεγάλοΠολύ ενεργό
  1. Το χαμηλό ιικό φορτίο είναι ένα σήμα ότι η θεραπευτική αγωγή επιλέγεται σωστά και η πρόγνωση για θεραπεία της ηπατίτιδας C είναι ευνοϊκή..
  2. Μια υψηλή συγκέντρωση ιικών κυττάρων δείχνει ότι η ασθένεια βρίσκεται σε οξεία φάση. Το αίμα του ασθενούς είναι μια επικίνδυνη πηγή μόλυνσης.
  3. Το ιικό φορτίο, των οποίων οι δείκτες είναι σε μέσο επίπεδο, χαρακτηρίζει είτε το χρόνιο στάδιο του HVS, είτε μπορεί να έχει δύο τάσεις ανάπτυξης: προς την αύξηση ή τη μείωση του.

Η ποσοτική ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C πραγματοποιείται σε ολόκληρη την αντιική θεραπεία: μετά από 4, 12 και 24 εβδομάδες, σκοπός της οποίας είναι η μείωση του ιικού φορτίου.

Στο τέλος του - μετά από 6 μήνες, γίνεται PCR ελέγχου.

Ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β

Η ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β (Β) πραγματοποιείται για την ανίχνευση λοίμωξης (HBV DNA).

Η συγκέντρωση του HBV DNA μετράται σε αντίγραφα / ml ή me / ml. Κατά την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μελέτης, καθοδηγούνται από τους ακόλουθους δείκτες:

  • 2x10 ^ 6 - σε ενενήντα πέντε τοις εκατό των περιπτώσεων θα γίνει χρόνια.

Ανάλυση αποκωδικοποίησης PCR για ηπατίτιδα

Η ποιοτική ανάλυση PCR έχει δύο απαντήσεις:

  1. αρνητικός;
  2. θετικός.

Το PCR αρνητικό σημαίνει ότι δεν βρέθηκε παθογόνο στα δείγματα αίματος.

Η πιθανότητα αξιοπιστίας του αποτελέσματος είναι 95%. Το υπόλοιπο 5% είναι ανθρώπινο σφάλμα. Αυτή η δυνατότητα επιτρέπεται λόγω των υψηλών απαιτήσεων για τη μελέτη:

  • κανόνες αποθήκευσης για αντιδραστήρια ·
  • κατάλληλα προσόντα του ιατρικού προσωπικού ·
  • καθαρότητα βιοϋλικών.

Το ίδιο το κιτ PCR έχει 100% διαγνωστική ακρίβεια.

Η ποσοτική PCR για την ηπατίτιδα σας επιτρέπει να προσδιορίσετε το ιικό φορτίο στο σώμα του ασθενούς. Με τη βοήθειά του:

  • προσδιορίζεται το στάδιο της νόσου (οξεία, χρόνια).
  • προσδιορίζεται η αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας ·
  • προσδιορίζεται η ανάγκη για βιοψία ήπατος.

Σε ορισμένες περιπτώσεις, ο ασθενής δεν αισθάνεται σημάδια της νόσου, ενώ η μέθοδος PCR έχει διαπιστώσει λοίμωξη. Αυτό σημαίνει ότι η ασθένεια βρίσκεται σε πρώιμο στάδιο ανάπτυξης ή σε χρόνια μορφή. Για να αποσαφηνιστεί η διάγνωση, απαιτούνται πρόσθετες μελέτες για την πρώιμη έναρξη της αντιιικής θεραπείας.

Κόστος διαγνωστικών PCR

Οι κυβερνητικές κλινικές κάνουν εξέταση αίματος για PCR χωρίς χρέωση εάν υπάρχει παραπομπή από ειδικό για λοιμώξεις ή ηπατολόγους.

Υπηρεσίες επί πληρωμή για διαγνωστικά PCR παρέχονται σε όλες τις μεγάλες ρωσικές πόλεις. Το κόστος εξαρτάται από τον τύπο της δοκιμής, τον διαθέσιμο εξοπλισμό, το χρονοδιάγραμμα και άλλους παράγοντες.

  • Ανάλυση PCR υψηλής ποιότητας στη Μόσχα και την Αγία Πετρούπολη θα κοστίσει από 600 έως 900 ρούβλια. Στις περιοχές - από 300 έως 800 ρούβλια.
  • Ο προσδιορισμός του ιικού φορτίου της ηπατίτιδας C θα κοστίσει 17.000-22.000 ρούβλια. Για την ηπατίτιδα B (B) η τιμή μιας ποσοτικής μελέτης: 1200-10000 ρούβλια.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της μεθόδου PCR

Ποια είναι τα πλεονεκτήματα της μεθόδου αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης έναντι άλλων διαγνωστικών μεθόδων?

  1. Μεγάλη γκάμα εφαρμογών. Με το PCR, χρησιμοποιώντας τον τυπικό εξοπλισμό, μπορείτε να εντοπίσετε οποιονδήποτε ιό.
  2. Η ακρίβεια του προσδιορισμού του παθογόνου. Χρησιμοποιώντας διάφορους συνδυασμούς ενζύμων και τεχνικών ανάλυσης, επιτυγχάνεται 100% δοκιμή προδιαγραφής για την ενδεικνυόμενη λοίμωξη.
  3. Υψηλή ευαισθησία. Η τεχνική σάς επιτρέπει να εντοπίσετε την παρουσία ενός μορίου ιού στο αίμα.
  4. Αποδοτικότητα. Μια ποιοτική ανάλυση είναι έτοιμη σε λίγες ώρες, μια ποσοτική ανάλυση σε δύο ημέρες.
  5. Διαγνωστικά του ιού κατά την περίοδο επώασης. Με την PCR, το παθογόνο προσδιορίζεται όχι από την παρουσία αντισωμάτων, όταν υπάρχει ήδη ανοσοαπόκριση του σώματος, αλλά πριν από την έναρξη της παθολογικής διαδικασίας, η οποία διευκολύνει τη θεραπεία.

Τα μειονεκτήματα της ανάλυσης PCR είναι συνέπεια των πλεονεκτημάτων της:

  • Για την καθαρότητα της ανάλυσης, απαιτείται ο υψηλότερος βαθμός καθαρότητας, συμπεριλαμβανομένου του αέρα στο εργαστήριο, έτσι ώστε το "ξένο" DNA να μην μπει στο υπό εξέταση δείγμα.
  • υψηλές απαιτήσεις για το προσωπικό που εκτελεί τη δειγματοληψία και την ανάλυση βιοϋλικών.

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων που θα ληφθούν πρέπει να γίνει από τον θεράποντα ιατρό, ο οποίος ξέρει πώς να διαχωρίσει την πραγματική ανάλυση από το ψευδώς θετικό (όταν η θεραπεία έχει ήδη ολοκληρωθεί, αλλά ένας βιώσιμος ιός παραμένει στο αίμα) και ψευδώς αρνητικός (όταν ο ιός δεν ανιχνεύεται στην κλινική εικόνα).

Ανάλυση για ηπατίτιδα Β: Μελέτη PCR

Οι εξελίξεις στην ιατρική είναι εκπληκτικές - πολλοί τύποι διαγνωστικών δεν ήταν διαθέσιμοι ακόμη και πριν από μισό αιώνα. Ενώ τώρα, χάρη σε αυτούς, μπορούν να προσδιοριστούν ακόμη και οι λανθάνουσες ασθένειες - για παράδειγμα, ανάλυση PCR για ηπατίτιδα Β της λανθάνουσας πορείας. Πράγματι, με την έγκαιρη ανίχνευση της παθολογίας, είναι πιο εύκολο να το αντιμετωπίσουμε.

Η ουσία της μεθόδου

Από μόνη της, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι ένα είδος αντιγραφής ενός συγκεκριμένου τμήματος DNA χρησιμοποιώντας ένα σύνολο ειδικών ενζύμων. Εάν στο δείγμα βιολογικού υλικού που παρουσιάζεται - κατά κανόνα, είναι ανθρώπινο αίμα, υπάρχουν υπολείμματα ιικών σωματιδίων ηπατίτιδας Β, τότε μπορούν να ανιχνευθούν σε εργαστηριακές συνθήκες - χρησιμοποιώντας τη μέθοδο διάγνωσης PCR που αναπτύχθηκε από επιστήμονες.

Μπορείτε να δείτε την αντίδραση χρησιμοποιώντας ένα τυπικό σύνολο:

  • DNA μήτρας - στην οποία υπάρχει περιοχή αντιγραφής.
  • Περιοχές DNA παρόμοιες στη δομή - εκκινητές.
  • ένα ένζυμο που μπορεί να ενεργοποιήσει την αντίδραση - πολυμεράση.
  • λύση εργαστηριακής αντίδρασης.

Έχουν αναπτυχθεί δύο παραλλαγές έρευνας για την ηπατίτιδα Β - όχι μόνο ποιοτικά, αλλά και ποσοτικά. Αυτό αυξάνει την αξιοπιστία του αποτελέσματος - μπορείτε να εντοπίσετε μεταλλαγμένα στελέχη του μολυσματικού παράγοντα. Ως εκ τούτου, η μέθοδος PCR αναγνωρίζεται στις περισσότερες χώρες του κόσμου ως το «πρότυπο χρυσού» των διαγνωστικών. Επιτρέπει στους γιατρούς να κάνουν ένα σαφές συμπέρασμα - ένα άτομο έχει μια ιογενή νόσο ηπατίτιδα Β, ακόμη και με την λανθάνουσα πορεία του, ή είναι απολύτως υγιές.

Ποιοτική παραλλαγή PCR

Ο κύριος στόχος της μελέτης είναι ο προσδιορισμός της παρουσίας ή της απουσίας ιικών σωματιδίων ηπατίτιδας Β σε ένα δείγμα βιολογικού υλικού. Θα συνιστάται εξέταση υψηλής ποιότητας PCR στα άτομα για τις ακόλουθες ενδείξεις:

  • υποψία μόλυνσης από ηπατίτιδα Β
  • την πρώιμη περίοδο της πορείας της νόσου - πριν από το σχηματισμό της ανοσολογικής απόκρισης του οργανισμού ενός μολυσμένου ατόμου ·
  • αμφίβολο αποτέλεσμα άλλων διαγνωστικών μεθόδων - για παράδειγμα, ορολογική εξέταση αίματος.

Η αποτελεσματικότητα μιας τέτοιας διαγνωστικής διαδικασίας έχει αποδειχθεί πειστικά ακόμη και στην πρώιμη περίοδο μόλυνσης στον άνθρωπο - τις πρώτες 1-2 εβδομάδες μετά από μια πιθανή λοίμωξη. Η σύνθετη θεραπεία, την οποία ο γιατρός επιλέγει λαμβάνοντας υπόψη τα αποτελέσματα της εργαστηριακής ανάλυσης για ηπατίτιδα, αυξάνει τις πιθανότητες των ασθενών για πλήρη ανάρρωση.

Ποσοτική παραλλαγή PCR

Εκτός από τις ποιοτικές μελέτες PCR, είναι σημαντικό να γνωρίζουμε την ποσοτική παράμετρο της ηπατίτιδας Β - το ιικό φορτίο στο ανθρώπινο σώμα. Αυτό διευκολύνει τον γιατρό να επιλέξει το βέλτιστο θεραπευτικό σχήμα για τη λοίμωξη. Συνιστάται ποσοτική PCR για τις ακόλουθες περιπτώσεις:

  • πριν από το διορισμό της αντιιικής θεραπείας - μια συνολική εκτίμηση του ιικού φορτίου ·
  • έλεγχος της αποτελεσματικότητας της συνεχιζόμενης σύνθετης θεραπείας - εάν ο αριθμός των ιογενών παραγόντων στην κυκλοφορία του αίματος μειώνεται.
  • την ανάγκη προσδιορισμού της αντοχής των μικροοργανισμών στα φάρμακα που συνταγογραφούνται από γιατρό ·
  • έγκαιρη διάγνωση της συνεχιζόμενης εξέλιξης της λοίμωξης, επιδείνωση της σοβαρότητας της νόσου.

Αποκωδικοποίηση PCR

Στις περισσότερες περιπτώσεις, οι ειδικοί συνιστούν την ταυτόχρονη διεξαγωγή ποιοτικής και ποσοτικής εξέτασης με PCR. Αυτό σας επιτρέπει να λάβετε το πιο ενημερωτικό αποτέλεσμα από την εργαστηριακή διάγνωση της ηπατίτιδας Β. Τυπικές τιμές του ιικού φορτίου:

  • λιγότερο από 10x3 - οι μολυσματικοί μικροοργανισμοί είναι ανενεργοί, έχουν εντοπιστεί ίχνη παρουσίας τους (έως 200 αντίγραφα / ml).
  • από 10x4 έως 10x5 - το φορτίο του ιού στο σώμα είναι ελάχιστο.
  • από 10x6 - ο ιός είναι ενεργός, αλλά δημιουργεί ένα μέσο φορτίο στον ήπαρ.
  • από 10x7 - η λοίμωξη έχει μια λεπτομερή κλινική εικόνα με υψηλή ιική δραστηριότητα.

Εάν το αποτέλεσμα PCR είναι θετικό, από την ποσοτική παράμετρο της ανάλυσης ο ειδικός θα καταλήξει σε ποιο στάδιο της πορείας είναι η ασθένεια:

  • μεταφορά ηπατίτιδας Β;
  • χρόνια λοίμωξη - η μόλυνση εμφανίστηκε πριν από 3-6 μήνες
  • οξεία περίοδος της νόσου - έως 1-1,5 μήνες από τη στιγμή της διείσδυσης ιικών σωματιδίων στην κυκλοφορία του αίματος.

Εάν το αποτέλεσμα PCR της μελέτης είναι αρνητικό, μπορεί επίσης να υπάρχουν δύο συμπεράσματα - δεν υπάρχει λοίμωξη στο σώμα και δεν υπήρχε ή το άτομο έχει αναρρώσει πλήρως, για παράδειγμα, μετά από πλήρη έγκαιρη αντιιική θεραπεία.

Ποιος πρέπει να υποβληθεί σε PCR για ηπατίτιδα Β

Οι γιατροί δεν θα συστήσουν σε όλους τους ανθρώπους μια τέτοια εξέταση του σώματος όπως η δωρεά αίματος για ανίχνευση PCR της ηπατίτιδας Β. Όπως οποιαδήποτε άλλη ιατρική διαδικασία, ο προσδιορισμός του ιικού φορτίου έχει τις δικές του ενδείξεις:

  • η χειρουργική επέμβαση είναι μπροστά.
  • Απαιτείται μετάγγιση αίματος και των συστατικών του.
  • η εγκυμοσύνη έχει προγραμματιστεί ή έχει ήδη διαγνωστεί.
  • την ανάγκη για συνεχή καθαρισμό του αίματος από προϊόντα αποσύνθεσης / τοξίνες - με σοβαρή νεφρική ανεπάρκεια.
  • κατάσταση ανοσοανεπάρκειας - αποκλεισμός δευτερογενών επιπλοκών.
  • συχνή επαφή με βιολογικά υλικά - ιατρούς.
  • επιλογή του βέλτιστου θεραπευτικού σχήματος για ηπατικές παθήσεις ·
  • αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της αντιιικής θεραπείας για την ηπατίτιδα Β.

Προετοιμασία για PCR

Για να αποκτήσετε το πιο αξιόπιστο αποτέλεσμα - εάν η ηπατίτιδα Β βρίσκεται πραγματικά στο ανθρώπινο σώμα, είναι απαραίτητο να προετοιμαστείτε πριν από τη διεξαγωγή μελέτης PCR. Όταν συμβουλεύεστε το εξεταζόμενο άτομο, ο ειδικός θα σας προτείνει να τηρείτε τους ακόλουθους κανόνες:

  • Προσαρμόστε τη διατροφή - μια εβδομάδα πριν επισκεφθείτε το εργαστήριο, απορρίψτε λιπαρά, τηγανητά, καπνιστά και πικάντικα πιάτα, είναι καλύτερα να συμπεριλάβετε στο μενού περισσότερα φρέσκα λαχανικά με φρούτα, σούπες και δημητριακά.
  • 2-3 ημέρες πριν από την εξέταση, αποφύγετε την υπερβολική σωματική άσκηση, το άγχος και επίσης αποφύγετε να πίνετε αλκοολούχα ποτά.
  • φροντίστε να προειδοποιήσετε τον θεράποντα ιατρό για προηγούμενες χειρουργικές επεμβάσεις, ιογενείς ή μολυσματικές ασθένειες με ηπατική βλάβη, σχετικά με τα συνεχώς ληφθέντα φάρμακα.
  • την παραμονή της μελέτης, προσπαθήστε να ξεκουραστείτε, μην είστε νευρικοί.

Το πρωί της ημέρας της εξέτασης PCR για την ανίχνευση της ηπατίτιδας Β, θα πρέπει να έρθετε στο εργαστήριο με έντυπο παραπομπής από γιατρό, με άδειο στομάχι, εάν καπνίζετε, μην καπνίζετε για περίπου 30-40 λεπτά. Ο εργαστηριακός βοηθός θα πάρει την απαιτούμενη ποσότητα αίματος από μια φλέβα και θα δώσει ένα βιολογικό δείγμα για έλεγχο. Ένα άτομο λαμβάνει μια γνώμη κυριολεκτικά την επόμενη μέρα - αυτοπροσώπως. Πρέπει να αποδειχθεί στον θεράποντα ιατρό, ώστε να μπορεί να γίνει η σωστή διάγνωση..

Δυνατότητα λανθασμένου συμπεράσματος

Φυσικά, η διαδικασία διεξαγωγής αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης μπορεί να εκτελεστεί με έναν αριθμό παραβιάσεων που θα επηρεάσουν την ακρίβεια του ληφθέντος αποτελέσματος. Η επίδραση ασκείται και από τους δύο εσωτερικούς παράγοντες - κακή ποιότητα προετοιμασίας του εξεταζόμενου ατόμου και εξωτερικές επιδράσεις - πτώσεις θερμοκρασίας, υγρασία στο εργαστήριο, μόλυνση βιολογικού υλικού.

Ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα εμφανίζεται στις γυναίκες κατά την περίοδο της μεταφοράς ενός μωρού - λόγω ορμονικής διαταραχής στο σώμα. Σε αυτήν την περίπτωση, θα υποβληθεί σε άλλες διαγνωστικές εξετάσεις για να αποκλείσει τη μεταφορά της ηπατίτιδας Β.

Σφάλματα σε μελέτες PCR είναι επίσης πιθανά - κατά τη διάρκεια οξείας αναπνευστικής λοίμωξης, κατά τη λήψη ορισμένων υποομάδων φαρμάκων, λόγω μόλυνσης με έρπητα, λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό. Λιγότερο συχνά, ο μη επαγγελματίας του εργαστηριακού βοηθού έχει αντίκτυπο - μόλυνση του δείγματος αίματος, εάν δουλεύει με αυτό χωρίς γάντια ή με κακώς επεξεργασμένα όργανα.

Επομένως, η εμπιστοσύνη στη μέθοδο PCR για την ανίχνευση της ηπατίτιδας Β είναι καλύτερη από ένα εργαστήριο που ασχολείται επιτυχώς με τέτοιες μελέτες για πολλές δεκαετίες, οι υπάλληλοι είναι πιστοποιημένοι και εξαιρετικά επαγγελματικοί..